D****g
发帖数: 275 | 1 最近在做shRNA转染，悬浮细胞，直接转染vector的效率大约有80％，担心效率太低的
话，knockdown的效果可能不明显。现在纠结于要不要包装成病毒再转染，不知道
retrovirus病毒的转染效率有多少，有没有人有经验？ |
r***e
发帖数: 2539 | 2 如果直接转染80%效率，那就直接转了，比病毒感染copy number多，应该效率高。不过
直接转3-4天后由于细胞分裂，会被稀释。权衡一下吧，有的蛋白半衰期比较长。
【在 D****g 的大作中提到】
: 最近在做shRNA转染，悬浮细胞，直接转染vector的效率大约有80％，担心效率太低的
: 话，knockdown的效果可能不明显。现在纠结于要不要包装成病毒再转染，不知道
: retrovirus病毒的转染效率有多少，有没有人有经验？
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s******s
发帖数: 1584 | 3 我喜欢包病毒。1）包一次可以用好多回； 2）效率比转质粒高多了（我要做稳转）。
我做primary fibroblast,质粒基本转不进的。 |
D****g
发帖数: 275 | 4 正在提shRNA vector转染细胞的RNA, 不知道knockdown的效果怎样。 |
D****g
发帖数: 275 | 5 大家都说primary fibrablast不好转染。我们实验室有一种mouse embryonic
fibroblast, 虽说是primary cell, 但是已经建立好多年了，估计是自然transformed
了，前两天试了一下，转染效率能有90％以上。一直纳闷，为什么primary cell不容易
转染哪？是因为生长慢吗？
【在 s******s 的大作中提到】
: 我喜欢包病毒。1）包一次可以用好多回； 2）效率比转质粒高多了（我要做稳转）。
: 我做primary fibroblast,质粒基本转不进的。
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