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Biology版 - [求助]knockdown p53或p14ARF后细胞死亡
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s*****y
发帖数: 32
1
最近实验需要在人的细胞里做抑制p53信号通路。结果用慢病毒载体过表达p53或者
p14ARF的shRNA
后,细胞增殖明显受影响。大约在六七天左右细胞开始死亡。到后面一个细胞都不剩。
但control组转
none targeting shRNA的细胞生长正常。实验是在WI38和HFL1(都是人的胚肺纤维细胞
系)做
的。这不符全逻辑啊。不是抑制p53信号通路后,细胞增殖会加快的吗?有没有谁在人
的细胞里抑制过
p53表达的?
B******o
发帖数: 496
2
你试过几个不同的shRNA么?
有时候可能那个shRNA积累在细胞内会造成毒性。换个别的就好了

【在 s*****y 的大作中提到】
: 最近实验需要在人的细胞里做抑制p53信号通路。结果用慢病毒载体过表达p53或者
: p14ARF的shRNA
: 后,细胞增殖明显受影响。大约在六七天左右细胞开始死亡。到后面一个细胞都不剩。
: 但control组转
: none targeting shRNA的细胞生长正常。实验是在WI38和HFL1(都是人的胚肺纤维细胞
: 系)做
: 的。这不符全逻辑啊。不是抑制p53信号通路后,细胞增殖会加快的吗?有没有谁在人
: 的细胞里抑制过
: p53表达的?

d******u
发帖数: 178
3
如果不是因为毒性的话,这是个很有意思的phonotype。
Z******5
发帖数: 435
4
搭车问问:
话说我最近overexpress c-Myc,MTT也检测到细胞增殖变慢。 这个不应该啊。
补充一句,我的质粒表达能力非常强,估计是细胞凋亡导致的?
h******y
发帖数: 1374
5
That makes sense....because of OIS

【在 Z******5 的大作中提到】
: 搭车问问:
: 话说我最近overexpress c-Myc,MTT也检测到细胞增殖变慢。 这个不应该啊。
: 补充一句,我的质粒表达能力非常强,估计是细胞凋亡导致的?

d******u
发帖数: 178
6
Myc-Arf-p53。不过一般Myc sensitize the cell to apoptosis。

【在 h******y 的大作中提到】
: That makes sense....because of OIS
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