V******t
发帖数: 444 | 1 原来如此
那转染之前把质粒线性化能大大提高效率呀？ |
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e********c
发帖数: 30 | 2 看很多protocol说制备lentivirus或者retrovirus最好不要用mini-prep的质粒。请问
有人这么用过没？效果如何？ |
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e********c
发帖数: 30 | 3 我提取的shRNA质粒浓度在0.2到0.4 lamada之间 （不知为嘛，重复了两次，浓度就是
上不去，但是OD 1.9），这样的可以么？
会不会浓度不高会影响virus得率？ |
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O**********a
发帖数: 317 | 4 说明生物行业生态日益恶劣，知道质粒是什么的、素质好的都去MBB了
无他，自然选择尔
[在 IonFish (离子鱼) 的大作中提到：]
：公司刚招了个老美小本
：干活好像还蛮卖力
：........... |
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k********n
发帖数: 756 | 5 想做个质粒用CAG promoter在NEURON里面表达，Addgene有个现成的但是CMV promoter
with CAG enhancer. 它的效果和CAG promoter在神经元里表达会是一样的么？ |
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a*****e
发帖数: 33 | 6 最近要回国，有朋友托我带质粒回去，存在小管里的，有9小管，本人非生物专业，不
知这东西是不是敏感或机密材料？带回去会有风险吗？是美国安检会查还是中国海关会
查？需要冒险的话我是不打算带了
请大家不吝赐教，谢谢了 |
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a*****e
发帖数: 33 | 8 你有个p逻辑，不相信算了。
碰到问题了来这求帮助，不回答就算了,阴阳怪气的有意思吗？
谁tm有闲功夫挖这坑！
[在 apostle (apostle) 的大作中提到：]
：最近要回国，有朋友托我带质粒回去，存在小管里的，有9小管，本人非生物专业，不
：知这东西是不是敏感或机密材料？带回去会有风险吗？是美国安检会查还是中国海关
会查？需要冒险的话我是不打算带了
：........... |
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c**i
发帖数: 265 | 9 怕风险的话，让你朋友把质粒滴在滤纸，装信封里自己寄回来。他不怕风险就自己寄，
他怕风险就别折腾你。
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 1.0.6 |
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c**i
发帖数: 265 | 10 怕风险的话，让你朋友把质粒滴在滤纸，装信封里自己寄回来。他不怕风险就自己寄，
他怕风险就别折腾你。
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 1.0.6 |
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c**i
发帖数: 265 | 11 怕风险的话，让你朋友把质粒滴在滤纸，装信封里自己寄回来。他不怕风险就自己寄，
他怕风险就别折腾你。
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 1.0.6 |
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c**i
发帖数: 265 | 12 怕风险的话，让你朋友把质粒滴在滤纸，装信封里自己寄回来。他不怕风险就自己寄，
他怕风险就别折腾你。
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 1.0.6 |
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c**i
发帖数: 265 | 13 怕风险的话，让你朋友把质粒滴在滤纸，装信封里自己寄回来。他不怕风险就自己寄，
他怕风险就别折腾你。
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 1.0.6 |
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A***u
发帖数: 3714 | 14 你有这么糟糕的朋友？做事这么不专业的朋友？你可不可以拍个Pic 让我看一下啥管子
？那透明的小管是不是能看出里面有东西？：）
麻烦你回答一下。。描述一下他送来啥管子，我己经离开本领域6年，对你说的质粒非
常好奇。。你完全唤醒我沉睡的。。。。
，不 |
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n****m
发帖数: 25 | 15 听说很多地方这种工作早就外包给biotech公司了，我们实验室老板还是让我们构建。
除了自己的，还要帮一个新来的薄厚做。大家有没有什么构建质粒的公司推荐啊，在中
部。 |
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b****e
发帖数: 685 | 16 1.对于30kb的质粒，不管是电转还是liposome效率都很难达到很高，即便是293这种好
转的细胞，虽然电转的效率高一点儿，但是这么大的size,在电转的时候会kill掉很大
比例的细胞。所以对于这么大的Size,要想高转染效率，估计只有包成Helper
Dependent Adenoviral Vector.
2.要看你转的是哪种细胞，mouse gene没有问题，但CMV在一些细胞里会表达很差，或
不表达。 |
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b****e
发帖数: 685 | 17 1.对于30kb的质粒，不管是电转还是liposome效率都很难达到很高，即便是293这种好
转的细胞，虽然电转的效率高一点儿，但是这么大的size,在电转的时候会kill掉很大
比例的细胞。所以对于这么大的Size,要想高转染效率，估计只有包成Helper
Dependent Adenoviral Vector.
2.要看你转的是哪种细胞，mouse gene没有问题，但CMV在一些细胞里会表达很差，或
不表达。 |
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n******e
发帖数: 89 | 18 是想解决转染效率不高的问题？看着好像只是表达一个蛋白，整个质粒也没有那么大吧
？有可能做小了效率不见得提高很多，可能和细胞种类的关系更大。 |
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j****x
发帖数: 1704 | 19 这个1.2是包含了全部的表达元件的，包括promoter和polyA，你自己做的话，这些也元
件少不了。当然理论上有可能做到比1.2更小，比如采用更短的promoter/polyA，但是
表达效果就未必能保证了。
mcDNA的制备很tricky没错，但你的线性DNA制备我个人觉得更不稳定。当然，你可以尝
试。我曾经用线性片段建稳转细胞株，效果比质粒强。
systembio. |
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l******n
发帖数: 298 | 20 请问用addgene买的质粒表达出来一个很新颖的蛋白，想卖钱的话需要跟addgene打招呼
吗？买的时候是从学校买的。现在送人了人家问到这个我也不懂。之前没接触过类似问
题。怎么能避开呢？ |
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发帖数: 1 | 21 其实就是最基本的pcDNA3.1 plasmid。
以前他做实验都用没有质粒的做对照，有一次labmeeting我show出来的用pcDNA做对照
然后他就一直问我要。一开始我就给了100ug，现在用完了又来问我要。关键是这东西
可以自己养细菌扩增纯化，东西不值钱，但是每次纯化我还需要时间。
怎么拒绝比较好些？ |
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发帖数: 1 | 22 我要是你的话我就做个Maxiprep.每次来要就给他100ug. 没必要为了这点小事驳人面子
。人情比这点质粒重要了不止一万倍。 |
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l***y
发帖数: 638 | 23 就说用完了给ecoli自己提，其实质粒不值钱有的多就给吧大家省事 |
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l*******1
发帖数: 16217 | 24 如果是隔壁性感白妞要质粒，楼主肯定屁颠儿屁颠儿的双手奉上，肯定不会在这里唧唧
歪歪了
人那。。。。。。。。 |
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m****a
发帖数: 270 | 25 确实，得看这人怎么样，如果人品可以，是可以做朋友的，给点质粒小意思。 |
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a*********n
发帖数: 390 | 26 少壮不努力，
老大提质粒。
小时爱偷懒，
长大涂平板。 |
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h*****x
发帖数: 147 | 27 对于80后实际情况是： 少壮太努力，老大提质粒。小时不偷懒，长大涂平板。 |
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j****i
发帖数: 6 | 28 如果那位学者可以提供下列生物试剂材料，请和我们联系
1）杂交瘤细胞
2）MAMMALIAN细胞表达质粒（可用于建立Stable cell lines)
3）Adenovirues OR Lentiviral constructs
4) Any other useful cell based assays
谢谢！
Andrew |
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l******n
发帖数: 11737 | 29 [翻译]生化奇兵 Bioshock 剧情小结.全
http://bbs.a9vg.com/thread-767550-1-1.html
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TABLE OF CONTENTS 目录
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***
{c01} ... Andrew Ryan
{c02} ... The Construction of Rapture （Rapture的诞生）
{c03} ... The Discovery of Adam （发现Adam）
{c04} ... Frank Fontaine
{c05} ... Little Sisters （小妹妹）
{c06} ... Rivalry （对立）
{c07} ... Jack Ryan
{c08} ... The... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 30 #注明译者，请随便转载：）
CRISPR英雄谱
埃里克・兰德（Eric Lander）
小鹿／译
三年之前，科学家们宣布，CRISPR技术能够对真核活细胞进行精准与有效的基因组编辑
。自此，这项技术手段已然震撼了科学界，数以千计的实验室正在将其运用于从生物医
药到农业的各个领域。然而，从一种奇特的细菌重复序列现象的发现开始，到确认这种
现象为适应性免疫系统，进而对它的生物功能特性的了解，直至开发为一项基因工程的
技术，这此前二十载相关的研究历程却不为人所知。本文正是着眼于填补这段科学历史
的空白，它讲述的是观念的演化历史和先锋人物的传奇故事，并且从中获得关于支撑科
学发现的优秀科研环境的启迪。
前言
很难想起曾经有哪一次科学革命像CRISPR这般如此迅速地改变生物学界。仅仅三年之前
，科学家宣布，CRISPR系统，即细菌通过纪录和精准攻击入侵病毒的DNA序列而进行自
身防御的适应性免疫系统，可以利用转化为一项简单而有效的技术在哺乳动物和其它生
物体的活体细胞内进行基因组编辑。CRISPR即此被全球数以千计的实验室运用于广泛的
领域，如创建人类遗传疾病和癌症的复杂动物模型；... 阅读全帖 |
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f****u
发帖数: 443 | 31 44、宇宙空间的奥秘是无穷的，宇宙本身是无掩盖的、表露的。宇宙空间分物质空间和
能质空间。其实都是能质空间，只是从现象分物质和能质空间，分开便于认识宇宙。能
质空间的能质间距是空间的最小距离，这个距离的产生便是宇宙空间的产生，是动的产
生，是时间的产生。这是维态的第二转变。能质粒距是均等的，指的是在正常的情况下
。既使在爆发时能质粒的间距，也是均等的。但在能显示时能质粒的间距有了改变，间
距的改变只是想着一个方向变化，是正值方向，只是距的长短不同而已。长短不光是显
示不同，因粒子增长的不同，显示自然不同。能质粒间距在正常值为v，各种显示为1.
5v，1.1v，1.3v，1.7v，1.9v，皆是奇数值，但不能超过2 v。如果在2 v，4 v，6 v，
8 v范畴内，就变成物质了。能质粒是个纯单子，没有再组成它的东西了。在维态时能
质粒的整体运动和分裂膨胀所形成空间时，能粒间距出现了，这便是射线。射线产生了
空间，产生了动，产生了时间，自然是维态产生了空间。现在的空间组成应该是恒光热
星，即恒光热星的射线运动形成了空间。恒星是分离的维态，而且是现存的维态，是宇
宙三要素之一。空间是能质粒所... 阅读全帖 |
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y***i
发帖数: 11639 | 32 质粒转染。不是植物DNA转染。
实验室里天天用质粒转染细菌转染动物细胞，这个应该不陌生吧。
植物细胞也一样用质粒转染。
所以最简单的可能性是质粒转染后，没有整合到植物染色体里，然后植物细胞被破坏，结
果胃里的细菌接受了质粒。
更复杂点，让质粒随机截取点植物DNA，然后再转到细菌甚至人的细胞里，也不是完全没
有可能，呵呵呵。
只能希望孟山别弄个太恐怖的质粒或基因。
质粒
的。 |
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n*********e
发帖数: 180 | 33 你这个问题问得非常好。这个bacterial colony只能take一种质粒纯粹是分子克隆作者
的谣传。
根本就不是这么回事。我原来做recombineering的时候需要将一个质粒的一部分切掉形
成一个新的质粒。但是因为不是每个质粒都被切，最后拿到的是一个混合物。由于两个
质粒都特别大，相差的片段也很短，没法通过跑胶分开。所以我就想到了这个质粒不相
容原理。结果试了一下完全是bull shit。无论怎么反复稀释transformation拿新的
colony，发现这两个质粒都在一起。最后只好把质粒切成片段，回收重新ligate才解决
这个问题。 |
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发帖数: 1 | 34 作为一个科研民工，韩论文出来后新闻报道的第一时间就下载了paper看了，当时觉得
这么个学校里这样的条件能出好成果十分不易的，paper里面通篇的实验方法实验数据
都是很朴素的，但整个idea和做出来的结果确十分惊人，就像小成本的高质量电影，让
人看了当时就感叹像是寒门出贵子的感觉，还第一时间和同学分享了这个事情，感到挺
高兴的，结果后来闹成这样，说实话后来韩的反应给人的感觉就完全不是一个搞科研的
人，第一次感觉比较差的就是韩说把质粒提供给addgene了，结果连addgene都能拼成
addgen，这个最常用的质粒数据库不太可能拼错吧，后来有人爆料说派学生去河北他们
实验室要质粒，结果第一次给的质粒没有完整的质粒信息，他们检测发现质粒竟然是原
核表达系统的，怎么做真核编辑？第二次重新要了质粒，测序发现质粒没有promotor和
终止密码子，怎么表达？再后来韩的表现完全是一个政客而不是科研工作者 |
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x****6
发帖数: 4339 | 35 下面这个问题，大家有好的方法简化拟合吗：
从一个细胞开始，里面5个拷贝质粒，其中一个是突变子。然后开始扩增，每一代，每
一个细胞分裂成两个，然后质粒复制一套（不考虑新突变）、之后随机分到两个子细胞
里，但是每个细胞总是保持5个拷贝的质粒。比如第一次分裂之后，有两个新细胞，8个
拷贝的没有突变的质粒，2个突变质粒。那么两个细胞可以是各取一个突变质粒，也可
以是一个细胞拿两个而另一个细胞全部都是没有突变的。
然后问题是，N代扩增以后，突变子在种群（N~10-30）里的分布：五个质粒拷贝里，有
0，1，2，3，4，5个突变拷贝的分布.
我能想到的就是拟合每一个细胞和每一次分裂；但是因为是分裂是以2为底数的指数过
程，计算量也是随N指数扩增，当N=30的时候，要计算5亿次才能得出下一代的结果，
computationally impossible。
这和urn process有点类似，但是urn里面没有对数增长过程。
大家有可行的计算/理论方法吗？ |
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x****6
发帖数: 4339 | 36 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: xiao86 (xiao86), 信区: Military
标 题: 【数学/计算问题求教】
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Oct 19 14:36:54 2017, 美东)
下面这个问题，大家有好的方法简化拟合吗：
从一个细胞开始，里面5个拷贝质粒，其中一个是突变子。然后开始扩增，每一代，每
一个细胞分裂成两个，然后质粒复制一套（不考虑新突变）、之后随机分到两个子细胞
里，但是每个细胞总是保持5个拷贝的质粒。比如第一次分裂之后，有两个新细胞，8个
拷贝的没有突变的质粒，2个突变质粒。那么两个细胞可以是各取一个突变质粒，也可
以是一个细胞拿两个而另一个细胞全部都是没有突变的。
然后问题是，N代扩增以后，突变子在种群（N~10-30）里的分布：五个质粒拷贝里，有
0，1，2，3，4，5个突变拷贝的分布.
我能想到的就是拟合每一个细胞和每一次分裂；但是因为是分裂是以2为底数的指数过
程，计算量也是随N指数扩增，当N=30的时候，要计算5亿次才能得出下一代的结果，
computationally impossible。
... 阅读全帖 |
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H********g
发帖数: 43926 | 37 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: xiao86 (xiao86), 信区: Military
标 题: 【数学/计算问题求教】
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Oct 19 14:36:54 2017, 美东)
下面这个问题，大家有好的方法简化拟合吗：
从一个细胞开始，里面5个拷贝质粒，其中一个是突变子。然后开始扩增，每一代，每
一个细胞分裂成两个，然后质粒复制一套（不考虑新突变）、之后随机分到两个子细胞
里，但是每个细胞总是保持5个拷贝的质粒。比如第一次分裂之后，有两个新细胞，8个
拷贝的没有突变的质粒，2个突变质粒。那么两个细胞可以是各取一个突变质粒，也可
以是一个细胞拿两个而另一个细胞全部都是没有突变的。
然后问题是，N代扩增以后，突变子在种群（N~10-30）里的分布：五个质粒拷贝里，有
0，1，2，3，4，5个突变拷贝的分布.
我能想到的就是拟合每一个细胞和每一次分裂；但是因为是分裂是以2为底数的指数过
程，计算量也是随N指数扩增，当N=30的时候，要计算5亿次才能得出下一代的结果，
computationally impossible。
... 阅读全帖 |
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h**********d
发帖数: 30 | 38 恩，多谢前辈。我知道AMP是被开环分解的，而TET是细胞EFLUX的原理，浓度不会有太
大变化，一
般我不会让细菌长超过一天，否则我会追加五分之一或者二分之一的AMP，所以我想应
该不是这个
问题。之前我还有一些单质粒的体系，只有PET质粒，蛋白的表达式非常高的，我唯一
能想到的应
该就是这个双质粒变种的PET质粒不如那几个单质粒PET质粒的诱发性好，因为我每次用
的是严格
一致的表达条件。
BTW,我的GENOME上有KM和CM的抗药性，所以没法再在质粒里换抗药性了~ |
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m****a
发帖数: 270 | 39 看来学术界已经逐渐达成了共识，如果连张锋和Doudna都重复不出来，还有
啥话好讲？
“在数百个基因中都重复失败，韩春雨的基因编辑技术恐遭弃用”
澎湃新闻见习记者 王盈颖
http://www.thepaper.cn/newsDetail_forward_1538953
因为大面积无法重复实验，作者和所在单位又不出面应对质疑声，河北科技大学副教授
韩春雨领衔的NgAgo基因编辑技术的重复工作已经遇冷。
自2016年5月2日在《自然-生物技术》在线发表论文，NgAgo已经问世5个月，韩春雨在
论文中描述的NgAgo是一项和目前主流的“基因魔剪”CRISPR拥有同样效率的基因编辑
技术，能高效地实现对特定DNA片段的敲除、加入。
但在近日哥本哈根举办的“CRISPR Genome Editing（CRISPR基因编辑）”大会上，美
国、丹麦、德国在基因编辑领域顶尖的实验室参会，却无人提及NgAgo。
美国生物学家张锋、詹妮弗·杜德娜（Jennifer Doudna）、乔治·丘奇（George
Church）各自所在的实验室是基因编辑领域的权威。知情人士向澎湃新闻（www.
thepaper... 阅读全帖 |
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H********g
发帖数: 43926 | 40 F质粒又叫F因子，为fertility factor（致育因子）的简称，是在大肠杆菌等细菌中发
现的一种最有代表性的单拷贝的接合型质粒，其决定性别并有转移功能。
F质粒是雄性决定因子，因此带有F质粒的细胞为雄性细胞，与此对应不含F质粒的为雌
性细胞。带有F质粒的细菌有性菌毛（每菌仅为1-4根）。 |
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H*******i
发帖数: 196 | 41 如果不同质粒使用相同方法控制在e.coli里的复制还有数量得话，那么这两种质粒就容
易出现兼容性问题（数量是不稳定的）
e.coli里最常用的三个分属不同体系的ori是PMB1,p15A,pSC101
其他还有几个常用的，不过我一般用那三种，使用三种不同抗性，没啥问题
其他bacteria原理应该是一样的，不过ori应该有些区别。
这种内容随便搜点关键词就能找到答案，或者去公开的一些实验wiki也有介绍
另外LS某同学提到用不兼容原理来分隔质粒，好歹你质粒选择压力要相差很大才行。不
然十几到几十甚至几百copy的质粒想要只有一种，哪有那么容易。。
我曾经试过去除ecoli中的质粒，十分困难，也不知道是不是我方法不对。。 |
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m**1
发帖数: 2 | 43 我想用Lentivirus介导针对某一基因ShRNA感染U2OS细胞以Knockdown该基因的表达，结
果是反复几次均未成功----感染U2OS细胞后用Puromycin筛选，细胞全部死亡。这说明
可能1）Lentivirus没有包装成功2）U2OS对Lentivirus敏感3）----？
我有该种Lentiviral表达质粒直接用Fugene
6转染U2OS细胞，然后用puromycin
筛选，有大部分细胞survival,说明Lentiviral表达质粒没有问题。
我包装Lentivirus的过程是：
Co-transfect下列质粒至 293T 细胞（用Fugene
6），48小时后，将上清液过滤，直接加到U2OS细胞上，48小时后加入Puromycin进行筛
选。
Lentiviral质粒 5ug
Gap 2ug
Rev 2ug
VSVG 2ug DNA总量 11ug, Fugene reagent 33ul.
第二次加大了DNA量，但还是不成功。
Lentiviral 质粒 10ug
Gap 3ug
Rev 3ug
VsVG 3ug DNA 总量19ug,Fugene 57 |
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发帖数: 1 | 44 想成立一家技术服务+研发的公司，早期以技术服务为主，在有利润充分保障的情况下
，再考虑向 研发倾斜。
就我自己能力而言，我在质料克隆，基因表达细胞株的建立和某些方面的生物信息学方
面有所专长。
在基因的亚克隆方面（就是把一个基因从一个质粒载体转到客户指定的另一个质粒中）
，我有独门技巧，可以节省不少耗材和时间。亚克隆一个<1kb和5kb基因的质粒的平均
周期分别为3天和10天， 试剂耗材成本平均分别为$15和$80左右。 对于<2kb基因的质
粒亚克隆，以我的方法，一般只要挑选3个克隆即可以得到至少一个阳性质粒克隆，所
以我估计每三天我可以完成至少20个基因以上的亚克隆。我的问题是， 基因亚克隆这
方面市场大不大？
现在市面上的克隆服务多是基因的直接克隆，即用PCR方法将获取的基因插入到公司或
客户指定的质粒中。收费都在$250以上（对<1kb基因而言， 5kb基因大概要上千元）。
这方面我并没有特别的技巧，和那些公司比没有竞争优势。而且基因碱基的多态性太
普遍，PCR克隆到的基因蛋白编码序列不一定会是客户所想要的。暂时无意开展这种类
型的克隆服务。
在基因表达细胞株的筛选与建立方面，... 阅读全帖 |
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d********f
发帖数: 43471 | 45 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: mahmet (里约大冒险), 信区: Biology
标 题: 知识分子独家专访：面对质疑的韩春雨
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Oct 17 21:05:25 2016, 美东)
独家专访：面对质疑的韩春雨
原创2016-10-18 陈晓雪、李晓明 知识分子
►韩春雨任教的河北科技大学门口。摄影：陈晓雪
内文提要：
独家专访：面对质疑的韩春雨
韩春雨NgAgo论文可重复性争议考验科学界
编者按：
5月初，《知识分子》以国际科学媒体的标准，第一时间报道依据国际科学同行
评议的学术刊物上发表的韩春雨论文以及当时多位科学家评论，并说明其是发展了荷兰
科学家的工作。此后，国内媒体和单位纷纷跟进，因为没有新的工作进展，《知识分子
》未继续报道。从网上开始有声音质疑韩春雨文章结果，《知识分子》一直保持追踪国
内外学术界最新的动态，但不依据私下匿名来源为主作报道，直到13位中国科学家公开
实名发言后，《知识分子》才有可以较为完整、公开的事实可以报道。
NgAgo实验的可重复性争议历经数月之... 阅读全帖 |
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w*****d
发帖数: 57 | 46 http://china.caixin.com/2016-03-03/100915256.html
继鲁白打破沉默，直指张生家夺占其研究课题之后，张生家也投文财新网，坚称磁遗传
学是其研究组的成果。北大、清华校方至今未公布学术调查结果
【编者按】五个月前的一篇有关磁遗传学的论文，引发中国两所顶尖大学清华和北大的
三位研究人员间的论战。两方阵营一方指对方“抢发论文”“夺占课题”，另一方回应
对方“抢夺成果”。遗憾的是，北大、清华校方在进行学术调查后，至今未公布学术调
查结论。
2015年9月15日，中国科学院主办双周刊《科学通报》英文版发表了一篇关于动物磁感
应受体蛋白方面的论文，通讯作者为北京大学-清华大学生命科学联合中心学术带头人
张生家。然而，这篇论文的刊发引发了巨大争议。
北京大学生命科学学院学者谢灿认为，张生家违背了学术道德，在谢灿发现磁感应
蛋白（MagR）的原始论文尚未发表之时，用从谢灿处获得的MagR，未经同意私自“抢发
”了有关MagR应用的论文，并未给自己以合理的作者署名。
10月16日，清华停止了张生家入职的手续办理。张生家表示，没有调查结论就解聘
对他来说是不公正... 阅读全帖 |
|
w*****d
发帖数: 57 | 47 http://china.caixin.com/2016-03-03/100915256.html
继鲁白打破沉默，直指张生家夺占其研究课题之后，张生家也投文财新网，坚称磁遗传
学是其研究组的成果。北大、清华校方至今未公布学术调查结果
【编者按】五个月前的一篇有关磁遗传学的论文，引发中国两所顶尖大学清华和北大的
三位研究人员间的论战。两方阵营一方指对方“抢发论文”“夺占课题”，另一方回应
对方“抢夺成果”。遗憾的是，北大、清华校方在进行学术调查后，至今未公布学术调
查结论。
2015年9月15日，中国科学院主办双周刊《科学通报》英文版发表了一篇关于动物磁感
应受体蛋白方面的论文，通讯作者为北京大学-清华大学生命科学联合中心学术带头人
张生家。然而，这篇论文的刊发引发了巨大争议。
北京大学生命科学学院学者谢灿认为，张生家违背了学术道德，在谢灿发现磁感应
蛋白（MagR）的原始论文尚未发表之时，用从谢灿处获得的MagR，未经同意私自“抢发
”了有关MagR应用的论文，并未给自己以合理的作者署名。
10月16日，清华停止了张生家入职的手续办理。张生家表示，没有调查结论就解聘
对他来说是不公正... 阅读全帖 |
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w*****d
发帖数: 57 | 48 http://china.caixin.com/2016-03-03/100915256.html
继鲁白打破沉默，直指张生家夺占其研究课题之后，张生家也投文财新网，坚称磁遗传
学是其研究组的成果。北大、清华校方至今未公布学术调查结果
【编者按】五个月前的一篇有关磁遗传学的论文，引发中国两所顶尖大学清华和北大的
三位研究人员间的论战。两方阵营一方指对方“抢发论文”“夺占课题”，另一方回应
对方“抢夺成果”。遗憾的是，北大、清华校方在进行学术调查后，至今未公布学术调
查结论。
2015年9月15日，中国科学院主办双周刊《科学通报》英文版发表了一篇关于动物磁感
应受体蛋白方面的论文，通讯作者为北京大学-清华大学生命科学联合中心学术带头人
张生家。然而，这篇论文的刊发引发了巨大争议。
北京大学生命科学学院学者谢灿认为，张生家违背了学术道德，在谢灿发现磁感应
蛋白（MagR）的原始论文尚未发表之时，用从谢灿处获得的MagR，未经同意私自“抢发
”了有关MagR应用的论文，并未给自己以合理的作者署名。
10月16日，清华停止了张生家入职的手续办理。张生家表示，没有调查结论就解聘
对他来说是不公正... 阅读全帖 |
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w*****d
发帖数: 57 | 49 http://china.caixin.com/2016-03-03/100915256.html
继鲁白打破沉默，直指张生家夺占其研究课题之后，张生家也投文财新网，坚称磁遗传
学是其研究组的成果。北大、清华校方至今未公布学术调查结果
【编者按】五个月前的一篇有关磁遗传学的论文，引发中国两所顶尖大学清华和北大的
三位研究人员间的论战。两方阵营一方指对方“抢发论文”“夺占课题”，另一方回应
对方“抢夺成果”。遗憾的是，北大、清华校方在进行学术调查后，至今未公布学术调
查结论。
2015年9月15日，中国科学院主办双周刊《科学通报》英文版发表了一篇关于动物磁感
应受体蛋白方面的论文，通讯作者为北京大学-清华大学生命科学联合中心学术带头人
张生家。然而，这篇论文的刊发引发了巨大争议。
北京大学生命科学学院学者谢灿认为，张生家违背了学术道德，在谢灿发现磁感应
蛋白（MagR）的原始论文尚未发表之时，用从谢灿处获得的MagR，未经同意私自“抢发
”了有关MagR应用的论文，并未给自己以合理的作者署名。
10月16日，清华停止了张生家入职的手续办理。张生家表示，没有调查结论就解聘
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t****p
发帖数: 1504 | 50 最近想在一个比较原始的细胞上建个大的突变库，发现在这个物种上转质粒随机
integrate到genome上的效率大概为1/2000。按这个效率，我需要转上千次才能达到我
要求的库容量。
我怎么记得人的细胞转病毒的话转化率可以高到90%以上？如果是质粒transient
tranfection的话，效率有多高呢？我在想这个原始细胞又没有细胞壁，大小也跟人的
培养细胞差不多，转化效率的上限是否能跟人的细胞差不多。哪怕是转化效率提高几倍
，也能大大减少我的工作量。
OK，问题是：
１：人的培养细胞的转化效率有多高？
２：一般情况下，提高转化效率可以从改变哪几个方面的参数入手？（我用电转，不排
斥其他方法）
３：有一点不太明白，比如人的细胞共同转几个质粒（比如产生ｉｐｓ的时候就共同转
了２４个病毒质粒），为什么转化效率不会大大下降？有人提出说质粒可以缠绕在一起
，一起转化，我很难接受这样的理论。
哪位达人解惑一下。 |
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