t*****P
发帖数: 36 | 1 原来师兄用过的质粒，我拿出来重新mini extract后，转HEK293都不表达了。
把分子片段酶切下来，重新连接也还是不行。
请教怎么回事？谢谢大家！祝大家新年快乐！ | s*******e
发帖数: 1010 | 2 重连测序都不行的话，你师兄以前数据的问题更大一些。 | e****s
发帖数: 1125 | 3 测序是王道啊
【在 t*****P 的大作中提到】
: 原来师兄用过的质粒，我拿出来重新mini extract后，转HEK293都不表达了。
: 把分子片段酶切下来，重新连接也还是不行。
: 请教怎么回事？谢谢大家！祝大家新年快乐！
| x*****o
发帖数: 441 | 4 我之前也是用一个师兄留下的质粒,在ecoli里面怎么也不表达,测序也是对的.
后来就酶切,发现那个质粒很小,不是普通的,在ecoli里面用得pET. 后来我就把那个片
段切下来,连到pET上面,再筛选,就表达了.
不过你切下来又连的也不行应该跟我的问题不一样. 测序试试吧.
有的人走之前就是会留下很多烂东西.........
【在 t*****P 的大作中提到】
: 原来师兄用过的质粒，我拿出来重新mini extract后，转HEK293都不表达了。
: 把分子片段酶切下来，重新连接也还是不行。
: 请教怎么回事？谢谢大家！祝大家新年快乐！
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