l*****m
发帖数: 98 | 1 RT-PCR后酶切,产物2.3kb,跑胶后提纯,浓度很低(5ng/ul).载体酶切,跑胶后提纯(15ng/
ul).连接一个小时,转化.有两个菌.其中一个菌不对.另外一个有一个突变.pcr产物测序
没有问题.请问怎么解决?谢谢. | z*******o
发帖数: 1794 | 2 看看你的模板质粒是不是也是这个突变了，见过好几次，更本不是PCR的问题。
如果懒得重新连接，做回复突变吧，貌似不是很大。 | d***y
发帖数: 8536 | 3 跑胶后提纯。。。看胶的时候UV light对DNA会有损伤的。直接purify后，测序试试看 | l*****m
发帖数: 98 | 4 我的摸板质粒是有一个突变.Pcr产物是好的.
【在 z*******o 的大作中提到】
: 看看你的模板质粒是不是也是这个突变了，见过好几次，更本不是PCR的问题。
: 如果懒得重新连接，做回复突变吧，貌似不是很大。
|
|
