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Biology版 - 长片段PCR
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j*********o
发帖数: 237
1
要扩一个5K左右的片段,做鉴定用,不用很精确,能扩出来就行,有没有比较推荐的
taq酶啊?以前在国内一直用takara的La-taq,不知道有没有更好的?
s*********s
发帖数: 110
2
phusion

【在 j*********o 的大作中提到】
: 要扩一个5K左右的片段,做鉴定用,不用很精确,能扩出来就行,有没有比较推荐的
: taq酶啊?以前在国内一直用takara的La-taq,不知道有没有更好的?

J******r
发帖数: 2806
3
try Jeffrey's PCR buffer
enzyme is not important...
s********n
发帖数: 2939
4
5 kb不算长吧,如果只是鉴定用的话用一般的Taq应该没问题的,Fermentas的DreamTaq
便宜量又足,manual说可以扩增genome 6kb片段和viral的20 kb片段。我用来检测过3
kb片段。
C*******e
发帖数: 4348
5
5 kb不长
随便扩扩基本上都能出来啦
当然模板特别难扩那是例外
Takara的LA-Taq是好,不过拿来扩5kb的实在有点大材小用
我用它扩>10kb的
A*****O
发帖数: 394
6
try Roche's Expand Long Range dNTPack,
should work very well for 5-10k,

【在 j*********o 的大作中提到】
: 要扩一个5K左右的片段,做鉴定用,不用很精确,能扩出来就行,有没有比较推荐的
: taq酶啊?以前在国内一直用takara的La-taq,不知道有没有更好的?

A*****O
发帖数: 394
7
if you use human genomic DNA as template,
not easy as you think....
别什么都“随便”,这本身就不是做science的词汇。

【在 C*******e 的大作中提到】
: 5 kb不长
: 随便扩扩基本上都能出来啦
: 当然模板特别难扩那是例外
: Takara的LA-Taq是好,不过拿来扩5kb的实在有点大材小用
: 我用它扩>10kb的

C*******e
发帖数: 4348
8
呵呵,没有别的意思
如果觉得听着不舒服那我倒个歉
我只是觉得批长片段的时候模板的质量比用什么DNA polymerase重要

【在 A*****O 的大作中提到】
: if you use human genomic DNA as template,
: not easy as you think....
: 别什么都“随便”,这本身就不是做science的词汇。

j*********o
发帖数: 237
9
我用的是mouse ES cell genomic DNA
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