f*******e
发帖数: 354 | 1 买了个signosis的single cell real time PCR kit, 但是你面的东东实在太少了，做一
次预实验就消耗了不少，不知道大家有没有用另外的DNA polymerase, 不至于有CDNA但
是没有聚合酶做PCR啊
看了takara的 LA taq， EX taq，都是用来扩增长片段的，没有提到可以用于扩增非常
少的cDNA。
谁做过的推荐下，非常感谢！ |
s*********s
发帖数: 110 | 2 phusion@finnzyme
15-30 s/kb
超级牛b,很好用
现在NEB也有卖
http://www.finnzymes.fi/pcr/phusion_products.html
做一
【在 f*******e 的大作中提到】
: 买了个signosis的single cell real time PCR kit, 但是你面的东东实在太少了，做一
: 次预实验就消耗了不少，不知道大家有没有用另外的DNA polymerase, 不至于有CDNA但
: 是没有聚合酶做PCR啊
: 看了takara的 LA taq， EX taq，都是用来扩增长片段的，没有提到可以用于扩增非常
: 少的cDNA。
: 谁做过的推荐下，非常感谢！
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f*******e
发帖数: 354 | 3 只是提到快和fidelity啊，不知道是不是同样可以理解为效率高 比如极少量的模板也能
高效扩增
【在 s*********s 的大作中提到】
: phusion@finnzyme
: 15-30 s/kb
: 超级牛b,很好用
: 现在NEB也有卖
: http://www.finnzymes.fi/pcr/phusion_products.html
:
: 做一
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a****d
发帖数: 1919 | 4 LZ要扩多大的片段，能不能直接合成？
做一
【在 f*******e 的大作中提到】
: 买了个signosis的single cell real time PCR kit, 但是你面的东东实在太少了，做一
: 次预实验就消耗了不少，不知道大家有没有用另外的DNA polymerase, 不至于有CDNA但
: 是没有聚合酶做PCR啊
: 看了takara的 LA taq， EX taq，都是用来扩增长片段的，没有提到可以用于扩增非常
: 少的cDNA。
: 谁做过的推荐下，非常感谢！
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f*******e
发帖数: 354 | 5 我不是要扩增长片段 我只是要做single cell或极少量RNA RT来的PCR，就是常规的RTp
cr 但是模板量极少。kit里都有带的DNA polymerase 但是都非常少 很快就用完了 但是
还剩下很多的cDNA和RNA 用自己的普通taq酶好像不怎么灵 所以请教大家有没有用过什
么NB的酶 很多公司的牛酶都是宣称长片段 高保真 但是没有说高效率（灵敏）的
【在 a****d 的大作中提到】
: LZ要扩多大的片段，能不能直接合成？
:
: 做一
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L******s
发帖数: 2349 | 6 和别的没比过，但相对于Taq、Vent之类，Phusion的效率绝对高的多。我从cDNA libra
ry里扩增某些gene的cDNA，taq做不出来的，换Phusion就全做出来了，而且cDNA libra
ry的用量可以减到用taq时的1/10，可能再低也行，不过没有去试。
RTp
但是
【在 f*******e 的大作中提到】
: 我不是要扩增长片段 我只是要做single cell或极少量RNA RT来的PCR，就是常规的RTp
: cr 但是模板量极少。kit里都有带的DNA polymerase 但是都非常少 很快就用完了 但是
: 还剩下很多的cDNA和RNA 用自己的普通taq酶好像不怎么灵 所以请教大家有没有用过什
: 么NB的酶 很多公司的牛酶都是宣称长片段 高保真 但是没有说高效率（灵敏）的
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c**********6
发帖数: 1173 | 7 Herculase 和phusion比怎么样？
我做的Herculase的产量是最高的。当然啦，我的PCR的底物浓度很高的那种。
【在 s*********s 的大作中提到】
: phusion@finnzyme
: 15-30 s/kb
: 超级牛b,很好用
: 现在NEB也有卖
: http://www.finnzymes.fi/pcr/phusion_products.html
:
: 做一
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