t*****t
发帖数: 773 | 1 有没有类似 RT-PCR引物库 一样的网站？ 收集一些研究结果和甲基化PCR引物的网站？
谢谢 |
s******s
发帖数: 13035 | 2 不知道。
这玩意儿自己设计不就行了
【在 t*****t 的大作中提到】
: 有没有类似 RT-PCR引物库 一样的网站？ 收集一些研究结果和甲基化PCR引物的网站？
: 谢谢
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t*****t
发帖数: 773 | 3 自己设计的连续三对引物都失败了。所以想看看有没有别的参考。搜索文献，也没有找
到
【在 s******s 的大作中提到】
: 不知道。
: 这玩意儿自己设计不就行了
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s******s
发帖数: 13035 | 4 你咋设计的
给你几个hint
1.不要设计在CpG的地方，这个你应该知道
2.不要像普通PCR一样按照两条链设计，必须按照一条链设计
3.不要太长，200－300足够了
4.用Hifi Taq，普通酶和phusion有时候不work
【在 t*****t 的大作中提到】
: 自己设计的连续三对引物都失败了。所以想看看有没有别的参考。搜索文献，也没有找
: 到
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t*****t
发帖数: 773 | 5 对，这些我考虑到了，我用的是亚硫酸盐转化后进行PCR的方法，
可以试试你说的4
【在 s******s 的大作中提到】
: 你咋设计的
: 给你几个hint
: 1.不要设计在CpG的地方，这个你应该知道
: 2.不要像普通PCR一样按照两条链设计，必须按照一条链设计
: 3.不要太长，200－300足够了
: 4.用Hifi Taq，普通酶和phusion有时候不work
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E*********s
发帖数: 93 | |
t*****t
发帖数: 773 | 7 谢谢，谢谢！
看你的昵称，你是做表观遗传的老法师了。 呵呵
【在 E*********s 的大作中提到】
: 用这个http://www.urogene.org/methprimer/index1.html
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t*****2
发帖数: 213 | 8 He did not even say which kind of method he is using. bi-sequencing or MSP...
how do you know it's bisulfate sequencing, instead of MSP?
It's still not clear by now. if it's MSP, the first hint you gave was
completely wrong.
【在 s******s 的大作中提到】
: 你咋设计的
: 给你几个hint
: 1.不要设计在CpG的地方，这个你应该知道
: 2.不要像普通PCR一样按照两条链设计，必须按照一条链设计
: 3.不要太长，200－300足够了
: 4.用Hifi Taq，普通酶和phusion有时候不work
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y*******4
发帖数: 487 | |
