l***d
发帖数: 1828 | 1 送交者: 南泥湾 2007年10月08日22:54:13 于 [教育与学术]http://www.bbsland.com
基因打靶技术---从2007年诺贝尔医学奖谈起
作者：南泥湾
今天传来的消息，美国科学家马里奥-卡佩奇(Mario R. Capecchi)和奥利弗-史密西斯(
Oliver Smithies)、英国科学家马丁-埃文斯(Martin J. Evans)，分享2007年诺贝尔生
理学或医学奖，他们在小鼠基因打靶技术方面做出了卓越的贡献。
鉴于小鼠基因打靶技术的专业性比较强，为了方便大家的理解，这里我简单做个介绍。
1.何谓小鼠基因打靶（Gene targeting)?
大家已经知道，生物的性状基本由生物体内体内的遗传物质决定，如同家庭是社会的基
本组成单位，基因是体内遗传物质的基本单位。
基因打靶就是定点突变小鼠胚胎干细胞的某个特定基因（例如生长因子基因），使之发
育成为稳定携带这个突变基因的小鼠品系的一种基因转移和改造技术。
虽然基因转移和改造技术对多数人来说还比较陌生，但其成果已经渗透到我们日常生活
的许多领域，例如转基因食品，生物工程药物等都是，基因打靶技术也是 |
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H****h
发帖数: 1037 | 2 【 以下文字转载自 ChinaNews 讨论区 】
【 原文由 solchang 所发表 】
摘自：中央电视台 （这条新闻已经被阅读了9次）
上海东方肝胆外科医院最近传出消息：以这家医院的分子肿瘤学
研究中心主任殷正丰教授为首的研究小组将基因打靶技术应用于凝血
调节机制的研究，建立了蛋白质Z缺失和凝血因子突变的动物模型，
解决了科学难题，标志着我国科学家掌握了先进的基因打靶技术。
蛋白质Z是一种早在70年代就被提纯的维生素K依赖性血浆蛋白，
在人体血液中含量很高。然而，蛋白质Z的生理功用，多年来却一直
是个迷。殷正丰教授应用普通基因删除和条件性基因替代技术，培育
出具备蛋白质Z缺乏和凝血因子突变特征的遗传工程小鼠。经过2年多
时间的探索，发现凝血因子的突变体会使人体内的凝血酶增加，导致
血栓，而血栓的表型严重性会随着蛋白质Z的缺乏而逐步增加。同时
，体外研究发现，人血浆凝血反应随着蛋白质Z浓度的降低而减弱。
进一步研究还表明，蛋白质Z与活化凝血因子在磷脂表面形成了
钙离子依赖性复合物，并在"蛋白质Z依赖性蛋白酶抑制剂"的作用下
，抑制活化凝血因子的活性 |
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b****r
发帖数: 17995 | 3 基因打靶和干细胞有毛关系啊，怎么能打靶就没干细胞了，应该是打靶容易了，干细胞
更容易上临床才对 |
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n****3
发帖数: 543 | 4 感觉传统的基因打靶 （长短臂加正负筛选的哪种）就要被现在时髦的方法取代了，大
家觉得新方法的脱靶能最终克服吗 |
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l**********k
发帖数: 189 | 5 自从ZFN（后来的TALEN, CRISPR)开始应用以来，大家一直在找一种好的办法做基因敲
进。以大鼠为例，如果没有一系列的CRE工具鼠，大家就不会去做条件性基因敲除。但
除了小片段（或ODN)以外，大片段的基因敲进一直没有成功的报道。
这几年我自己也一直在想如何能够在这方面做点事情。做公司跟做科研不一样。科研实
验室里对效率不是很关心。比如可以通过注射几百上千的受精卵，最后只要有成功的就
算成功，然后发文章。而做公司更关心的是技术的稳定性，也就是除了高效率，还要重
复性好。所以我们就组建了一个研发团队，专门做大鼠的基因敲进研究。
经过一年多的摸索，最后终于找到了一种通过受精卵注射做基因敲进的方法。这个方法
的原理是通过利用ZFN/TALEN/或CRISPR先在染色体上切一刀，然后让带有同源臂的打靶
载体在切割位点进行同源重组。我们先在细胞系上进行摸索，最后得到了一个很有效的
基因组编辑系统。然后我们就看这个系统是不是可以在大鼠上用。因为信心比较大，我
们就直接进行双基因敲进实验了。分别是在大鼠CD4基因后面加上DsRed，在FoxP3后面
加上 IRES-DTR-2A-EGFP-p... 阅读全帖 |
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l**********k
发帖数: 189 | 6 稍微回答一下各位的问题。就象我讲的，公司做科研跟科研机构做科研不是一会事。从
很多回复来看，许多朋友可能知道ZFN/Talen/Crispr这些技术，也知道很多文章出来，
但实际上可能并不了解这些方法在基因敲进／条件性敲除方面的应用现状。
其实不管是ZFN, Talen还是Crispr，技术一出来大家就开始在想利用这些方法在没有ES
细胞的物种（比如大鼠）上做基因敲进和条件性基因敲除了，算算已经有至少5年了（
我记得2009年我去圣路易斯的Sigma公司的时候，他们就已经用ZFN做了很多敲除大鼠了
）。比如模式大鼠，为什么没有得到大范围的应用？ 实际上很多做神经研究的人都想
用基因敲进大鼠（比如加Reporter的），和条件性基因敲除大鼠。就是因为目前的所谓
ZFN／Talen/Crispr＋打靶载体注射受精卵的效率太低，没有哪家公司能够真正规模化
的提供稳定的技术服务。
我们用Jaenish文章里的方法也做不出来，但我听说他们有非常好的显微注射高手，所
以我们怀疑可能是我们公司的注射手艺还不够好。但不管好不好，总要把这个项目做起
来呀。所以我们一直在研发新方法。而这种方法我们觉得效率... 阅读全帖 |
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i*****s
发帖数: 15215 | 7 克隆服务员星美-451醒来发现，眼前的这个世界将基因改造的克隆人视作机器
情节波澜壮阔的电影《云图》
电影《云图》改编自大卫·米切尔的同名小说，其中一段故事讲述了星美-451在醒
来之后，面对未来工业化世界的恐惧。
新浪科技讯 北京时间10月30日消息，在情节波澜壮阔的电影《云图》(Cloud
Atlas)里面，基因改造的克隆人撑起了一个反乌托邦社会，成为影片一大亮点。对今天
的观众来说，这样的构想或许还遥不可及，毕竟世界上还有不少反对人类克隆和基因改
造的政治声音，但科学明显走得比大多数人想象的还要远。
《云图》的故事中，一个名为“星美-451”的克隆人，同其他数百万在“子宫银行
”里成长起来的遗传工程克隆“产品”一样，从一出生就注定了被奴役的命运。这些克
隆人需要从事几乎各种人力的服务性工作，充当士兵和妓女，甚至作为“活的娃娃”，
供未来社会内索国“纯血”阶层的儿童玩耍。内索国像是未来版的韩国，占据了亚洲的
大部分地区。
“当然，任何技术都有可能被滥用，但像《云图》里描写的那种噩梦般的场景，不
可能是人类生殖细胞基因改造的必然结果。”英国阿伯泰邓迪大学的生物伦理学家凯文
·史密斯如... 阅读全帖 |
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b********e
发帖数: 50 | 8 这是本版名ID微博上的一段话。这几年Talen和Cas9很火，想知道这个技术现在到什么
地步了？ 会不会最终完全取代胚胎干细胞方法呢？ 有没有牛人评一下？
“这两天真是太兴奋了。基于EGE系统的大片段基因敲进成功了，使基因敲进和条件性
基因敲除动物制备过程缩短到两三个月，成本也大大降低，使得模式动物能够走入几乎
所有实验室。同时，我们实现了在两个不同基因位点实现同时敲进，使得在动物体内研
究基因相互作用变得更容易。而且，可做物种更多了”。 |
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y***i
发帖数: 11639 | 9 去他的微博看了一下，好像是他们公司自己发展出来的技术
“我们用Extreme Genome Editing (EGE)系统通过基因敲进的方式，分别跟ACTB（细胞
骨架）和LMNB1（核蛋白）加上GFP标签。可以看到其效率比CRISPR/Cas9高很多倍。而
且，通过各种检测，发现90％以上是同源重组，随机插入很少。现在我们正在做多基因
敲进，这对于研究细胞内蛋白相互作用非常有帮助。”
“这是在两个不同基因上分别敲进了DsRed和DTR-EGFP，并做成融合蛋白。这次敲进不
是用ODN, 而是比较大的DNA片段敲进。看来我们的EGE系统真的非常好用。是不是应该
发一篇文章。” |
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j******i
发帖数: 939 | 11 看开点吧，就是提高了效率的而已，用的都是现有的技术，学术意义上进步不大，上
nature methods, nature biotech很难。这个crispr+同源重组插入大片段，已经发了
在cell老鼠的文章，效率10-30%。Genome Research上也发了crispr＋非同源重组在
Zerbrafish插入长基因。 |
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l**********k
发帖数: 189 | 12 谢谢楼上各位新老朋友。胖头兄弟帮着我做广告了:-)
在过去一两年里，有好几个回国创业的朋友跟我见面时都说我几年前在这个版
上发的帖子给了他们鼓励，我想我的目的达到了。
国内现在虽然说时大众创业、万众创新，但实际上水平高点的创业还是太少。
我也鼓励这里有技术有知识、同时又想创业的朋友能够跳出来。关于人脉，我同意人脉
非常重要，但人脉需要咱们自己慢慢建立。建立人脉也像是交朋友，即使别人介绍之后
双方也不一定能成为朋友，交朋友还是要靠自己靠缘分，想在哪里建人脉首先自己要走
到哪里去。
有些朋友觉得自己的技术和产品是不是应用领域太小，天花板太低。创业是做
一、看二、想三的这么一个过程。 我们做基因打靶，纯手工活，其实也面临天花板问
题。但是随着我们基因打靶服务站稳了一些，2013年我就开始想做一个动物中心，专门
繁殖公司自主研发的模式动物，其实也是为基因打靶服务增加附加值。于是我们在江苏
海门建了一个很大的动物房，在海门建动物房最大的原因是距离上海苏州等地非常近。
海门这个动物房已经开始启用了。大家可能也想像到了，有了动物房，我们其实可以用
动物... 阅读全帖 |
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D*****r
发帖数: 1239 | 13 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: longwoodwalk (长木行走), 信区: Biology
标 题: 讲讲我的生物创业过程
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Apr 8 09:21:11 2013, 美东)
我因为最近一直在中国，所以来这里很少了。这次回美国来再到这个版，读帖子觉
得非常亲切，不管是积极的还是消极的，都还是那样熟悉。一时心血来潮就想写点自己
的经历，希望对学生物的朋友有点帮助，或者至少知道还有别的路可以试试。没想到会
有这么多的网友读了，并得到了这么多的祝福与鼓励。非常感谢大家。尤其是好多朋友
还给了非常具体的建议，包括知识产权建议（这些我们已经意识到并跟一个知识产权律
师事务所签订了服务协议）、公司运作方法建议、未来公司应该发展的方向等等。这些
都让我受益匪浅。现在不是我的帖子给大家鼓励了，而是我从大家的回复中获得了很多
的灵感，这对我后面把公司做好非常有益处。
本来在这里是写着玩儿的，以我以前的经验来看，读者应该不过几百人或最多1、2
千人。现在看到这么多人来读，并已经有人把这个帖子转到了国内微博上，我还真有... 阅读全帖 |
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a****y
发帖数: 1035 | 14 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: longwoodwalk (长木行走), 信区: Biology
标 题: 讲讲我的生物创业过程
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Apr 8 09:21:11 2013, 美东)
我因为最近一直在中国，所以来这里很少了。这次回美国来再到这个版，读帖子觉
得非常亲切，不管是积极的还是消极的，都还是那样熟悉。一时心血来潮就想写点自己
的经历，希望对学生物的朋友有点帮助，或者至少知道还有别的路可以试试。没想到会
有这么多的网友读了，并得到了这么多的祝福与鼓励。非常感谢大家。尤其是好多朋友
还给了非常具体的建议，包括知识产权建议（这些我们已经意识到并跟一个知识产权律
师事务所签订了服务协议）、公司运作方法建议、未来公司应该发展的方向等等。这些
都让我受益匪浅。现在不是我的帖子给大家鼓励了，而是我从大家的回复中获得了很多
的灵感，这对我后面把公司做好非常有益处。
本来在这里是写着玩儿的，以我以前的经验来看，读者应该不过几百人或最多1、2
千人。现在看到这么多人来读，并已经有人把这个帖子转到了国内微博上，我还真有... 阅读全帖 |
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a***s
发帖数: 12296 | 15 3月15日报道 境外媒体称，广州生物医药与健康研究院遗传学家声称，他们已成功培育出两只基因改造的比格犬，全身的肌肉是正常比格犬的两倍。此次是用比格犬的胚胎进行实验，也是首次成功培育出基改比格犬。
据台湾东森ETtoday新闻云3月15日援引美国哥伦比亚广播公司的报道称，遗传学家赖良学表示："我们找到了迫使比格犬在发育时期停止生长肌肉的基因，并成功将它剔除，小狗的肌肉生长没有得到限制，因而开始变得更加强壮。我认为，对我们研究的所有指责都是不公平的，我们所做的一切都是为了人类的福祉。我觉得，在所有伦理问题得到解决之前，我们不应做临床实验。"
另据俄罗斯卫星新闻网3月15日报道，赖良学表示，他的实验室首次成功培育出转基因狗，其肌肉状况得到了明显改变。实验室用英国小猎犬——比格犬的胚胎进行实验，比格犬目前常被用于在机场寻找爆炸物。
此次试验已引起中国媒体和当地动物权益保护者的批评，他们认为，这些遗传学家培育转基因比格犬是为了出售，而非出于科研目的。
赖良学对此表示反对，称他的团队培育出这种转基因狗是为了研究帕金森氏症和其他有关神经系统和肌肉的疾病。
相关阅读
广州生物院等建立世界首个基因敲除狗... 阅读全帖 |
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l**********k
发帖数: 189 | 16 不知道能不能发，如果版主觉得不合适，就删了吧。谢谢。
媒体上关于创业的文章大部分都是有关互联网的。而生物医药相关的创业文章
则很少，可能是因为生物医药类创业很难一夜暴富，没有什么抓眼球的戏剧化题材。生
物医药创业跟互联网创业不同，它有自己的规律，其价值（估值）的增长跟互联网创业
也不可同日而语。生物医药创业是一个非常漫长、需要耐得住寂寞的过程，需要我们静
下心来，认真地做。
自从我于2008年6月在美国Massachusetts州成立的Biocytogen公司，2009年11
月注册成立北京百奥赛图基因生物技术有限公司，转眼7年多了。 有人说公司已经过了
初创期了，但我觉得我们还处在创业期，离成功还很远。总有人问我一些关于创业的感
受，比如压力什么的，我的答案是“比做博士后轻松多了”。我说的是真的，回答也是
认真的，当然也许创业比做博士后更适合我。因为我经常想，如果现在我还在做博士后
，是梦想做教授还是去创业？我现在会毫不犹豫地回答选择创业。在创立百奥赛图之前
，我自己没有在任何公司工作的经历，大家可以想像，创业过程中该遇到的坑，我几乎
都遇到了。在我读《创... 阅读全帖 |
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b********e
发帖数: 50 | 17
者。
这里都是做科研的人。做广告没有什么，但不能靠忽悠。以下是你的信息：
上站次数：5次，
发文数：4次。
下面是你的4次发文。是赛业的人也没有关系，告诉大家一些实在的东西比较好吧。
发信人: lovebiology (lovebiology), 信区: Biology
标 题: Re: 一两百万启动经费在小地方做老鼠模型是不是不可行？
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Oct 26 19:28:28 2013, 美东)
赛业在转基因，基因敲除模式动物方面做的相当出色，其主要技术骨干均是留学归国人
员，他们帮Stanford, UCSF等科研机构制备了大量的转基因，基因敲除小鼠。
发信人: lovebiology (lovebiology), 信区: Biology
标 题: Re: 海归博士养鼠一对售价18万 销遍近百家实验室(图) (转载)
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Dec 6 11:34:05 2013, 美东)
据我所知广州的那家公司的质量和可靠性都非常好，老鼠运回美国的话海关也没有问题
。不过基因打靶KO小鼠八九万可能下不来，十万出头吧，也已经很便... 阅读全帖 |
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n****3
发帖数: 543 | 18 想利用polyA trap 做基因打靶：long arm-PGK-neo-ires-EGFPFlpe-SD-short arm ，
target 细胞以前整合有Frt-stop-Frt RFP表达盒，平时不表达RFP. 如果转染FLPE表达
质粒，可以切掉stop片段而表达红色萤光。现在想利用polyA trap打靶方法将PGK-neo-
ires-EGFPFlpe－SD片段knockin到目的基因的内含子内. 如果打靶成功，该细胞将可以
表达双荧光，我想尽量减少我筛选打靶事件的工作
转入的片段尽管没有polyA,但启动子和融合蛋白的编码区是完整的，
questions: 那随机整合或瞬时转染会不会也能转录出mRNA(缺少polyA)？如能转录
，这个缺失polyA的mRNA会不会翻译出有功能的EGFPFlpe融合蛋白，并有可能激活红色
荧光蛋白的表达呢？ |
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d****n
发帖数: 10034 | 19 人民网消息，11月26日，来自中国深圳的科学家贺建奎宣布，一对名为露露和娜娜的基
因编辑婴儿于11月在中国健康诞生。这对双胞胎的一个基因经过修改，使她们出生后即
能天然抵抗艾滋病。当天，贺建奎正在香港参加第二届国际人类基因组编辑峰会。
这是世界首例免疫艾滋病的基因编辑婴儿，也意味着中国在基因编辑技术用于疾病预防
领域实现历史性突破。
但是，这则科学成果的报道只带来了短暂兴奋，很快便引发了公众对人类基因编辑的伦
理、安全担忧。
基因编辑用于人类生殖细胞是科学界的禁区，就像克隆技术不能用于人身上一样，在各
国都有一条不可随意逾越的伦理红线。
“真的感觉这个太冒进了。”中国科学院遗传与发育生物学研究所研究员朱桢告诉《财
经》记者，这次科研完全可以用其他灵长类动物，以其作为抗艾滋病动物模型。你能用
基因编辑人作艾滋病攻毒对象吗？！可以说从实验设计和科学目标上，追求的即是新闻
性，而不是实验总体的完整性；突破的不是科学前沿，而是伦理学的底线，造成人们对
生物技术的恐惧和抵制。
难避伦理追问
基因编辑婴儿诞生的消息传出，被科普作家、生物化学博士方舟子称为，“关键是一开
始就错了”，科学界最关心的莫... 阅读全帖 |
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d****n
发帖数: 10034 | 20 新京报讯 中国基因编辑婴儿事件不断发酵。11月26日上午，即第二届国际人类基因组
编辑峰会开始的前一天，来自中国深圳的贺建奎教授宣布，一对名为露露和娜娜的基因
编辑婴儿于11月在中国健康诞生。这对双胞胎的一个基因经过修改，使她们出生后即能
天然抵抗艾滋病。这是世界首例免疫艾滋病的基因编辑婴儿。
远在香港的翟晓梅昨天上午得知这一基因编辑实验后，感到“非常震惊”。翟晓梅是中
国医学科学院人文学院院长、生命伦理学研究中心执行主任，也是此次峰会学术委员会
委员。
昨天下午，峰会召开了紧急会议，其中有一个部分专门讨论贺建奎基因编辑实验的问题
，直到昨晚，“国内外专家意见出奇得一致”，商讨出了一份相关的声明，翟晓梅表示
将会在会上公布。
贺建奎在邮件中设置的自动回复是在香港，但对于贺建奎本人的行踪，她并不清楚，“
昨天他的房间一直没有人，打电话过去一直没人接，我其实想当面和他核实一些问题”。
其实就在上个月，峰会在美国加州召开了一次预备会，翟晓梅作为学术委员会委员，和
其他委员一起研究参加者的名单，“当时开会确定与会者名单的时候还没有他，因为当
时每一个要发言的人我们都仔细审过”。
然而短短一个月... 阅读全帖 |
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l**********k
发帖数: 189 | 21 生物版见证了我创业从零至今的整个过程。创业到现在一晃8年了，做了一个
小总结，发在了微信朋友圈和科学网博客。本来想先发在这里，又担心有广告嫌疑一直
犹豫。还是鼓起勇气发在这里吧。如果版主觉得不妥，麻烦删掉吧。谢谢。
百奥赛图是2008年6月在美国成立的，到现在8年了。一是感觉这8年像是过了24
年，二是感觉8年前就在昨天。做这个公司之前，我从来没有设计过自己的人生，随大
流基本上是我的性格。我不曾记得创业前读过什么鸡汤文章，农村娃天真地以为只要进
了大学，读了博士，进了好实验室，前途就会是一片光明。从来没有担心过自己的前途
，好像自己就是一辆铁轨上的列车，“一直跑下去”就是我的宿命。而到了2008年，又
好像是一个扳道工将我前方的轨道扳动了一下，从此我的人生方向就完全变了，是一条
到现在都没有准备好的方向，关于前方是什么样的，我一直处在思考、想象、焦虑和兴
奋中。
现在我也经常不停地想，如果8年前能够找到一份工作，现在会是什么样子？我
估计自己还是一事无成，这是由我的性格决定的。我虽然对技术比较着迷，但经常东一
榔头西一杠子，我这样的性格估计... 阅读全帖 |
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w*********g
发帖数: 30882 | 22 听说过基因打靶么？
这种研究现在到处都搞，做滥了 |
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h****n
发帖数: 2552 | 23 小破熊满口胡言，还尼玛基因打靶生物武器。发生物版去估计连批你兴趣的人都找不到
。别到处丢人了，洗洗睡吧 |
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a*******a
发帖数: 4233 | 24 转基因和转BT是两码事。
至于问题1，2
最基本的分子克隆和基因打靶操作 |
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w*********g
发帖数: 30882 | 25
上次我贴了几篇基因打靶的帖子，你就说我是学生物的。我说我不是，你死活不信。
现在我贴了几篇激光3D打印的帖子，你又说我是搞激光的。你能不能靠谱一点？ |
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p*****m
发帖数: 7030 | 27 最近10年的奖不太多有Nobel paper发在所谓名不见经传的小杂志了吧 当然咱们只讨论
非医
学成就的。生物科学早年的英雄时代已经过去了
09年的端粒是3篇Cell 两个mm一起发两篇解决了telomerase问题，Jack后来一篇解决了
端粒转基因问题
08年HIV最早是80年一片Science吧 发现AIDS病毒
07年基因打靶Capecchi最早1Cell 另外两个太久远 不清楚。。
06年RNAi 一片98年Nature
04年嗅觉 一片91年Cell
02年线虫 包括一系列革命性的genetics/dev bio/etc paper； 但是Horvitz的最大贡献
关于PCD pathway是发在Cell上
01年细胞周期 发现cdc mutant最早发在PNAS和Science，cdc2的文章发的到处都是 cyc
lin的也是。 |
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s********r
发帖数: 312 | 31 还是不能做conditional啊nn［在 notch3 (notch3) 的大作中提到：］n :ZFN,
TALENs or CRISPRn n[发自未名空间iPhone版] |
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a***y
发帖数: 19743 | 32 隔壁实验室在用
我感觉很时髦
TALE被发现的首个主要报告我当时在场，其实当时没有想到这么快就这么有应用价值了。 |
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o**i
发帖数: 1165 | 33 新方法因为新 有很多问题 拓跋是个问题
但不影响做实验发paper 问题越多 课题 paper越多
传统的方法能work 但是效率低 这么多gene 差不多都ko ki了
有必要用新方法把gene在从新ko ki一遍么？
但新方法效率高 我觉得hope还是invivo上 |
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n****3
发帖数: 543 | 34 我就是觉得off－target 不能保证，公司来讲座总是去避开这个问题，认为几率很低，
要不不会有很多人用。 |
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z*******o
发帖数: 1794 | 35 新的方法对于knockin效率高不高？做过的人能否说说。这边有用Zinc Finger做
knockin的，效率惨不忍睹。 |
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l*********y
发帖数: 12 | 37 据我所知广州的那家公司的质量和可靠性都非常好，老鼠运回美国的话海关也没有问题
。不过基因打靶KO小鼠八九万可能下不来，十万出头吧，也已经很便宜了。他们也用新
的技术TALEN及Cas9做KO小鼠，几万就行。 |
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w***a
发帖数: 4361 | 38 这个先申请专利吧，发了文章被别的公司抢注专利，回头不让你原创作者用了。。。 |
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j******i
发帖数: 939 | 39 什么原理，我原来以为是依赖非同源重组机制，不过看来还是靠同源重组。效率提高很
诱人啊。可以发个nature methods 或 nature biotech吧。 |
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b********e
发帖数: 50 | 40 应该发个文章，怎么着对公司也是一个正面宣传吧。比如华大。 |
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j******i
发帖数: 939 | 42 你可以边申请专利边投的吧。
同源重组的效率在primary cell里边比cell line里边低不少。你们的这个技术细节我
不知道，看起来好像还是同源重组，但是利用了某种方法，使效率提高了很多。这个是
很令人兴奋的。我不是做老鼠的，但是ZFN, TALEN, CRISPR都在使用，一直苦于没有办
法提高同源重组的效率。
你们这个技术跟这遍cell应该类似吧？Cell. 2013 Sep 12;154(6):1370-9. doi: 10.
1016/j.cell.2013.08.022. Epub 2013 Aug 29. |
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j******i
发帖数: 939 | 43 你可以边申请专利边投的吧。
同源重组的效率在primary cell里边比cell line里边低不少。你们的这个技术细节我
不知道，看起来好像还是同源重组，但是利用了某种方法，使效率提高了很多。这个是
很令人兴奋的。我不是做老鼠的，但是ZFN, TALEN, CRISPR都在使用，一直苦于没有办
法提高同源重组的效率。
你们这个技术跟这遍cell应该类似吧？Cell. 2013 Sep 12;154(6):1370-9. doi: 10.
1016/j.cell.2013.08.022. Epub 2013 Aug 29. |
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l**********k
发帖数: 189 | 44 我们用的不是他们用的方法，而是开发了一个新方法。 |
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T****u
发帖数: 424 | 45 你需要先申请专利，再发表paper。
另外，还得确定你做的改进能够被patent
如果你是在别人的patented technology上做了改进，你得先license。
最好咨询real patent lawyer
另外你的client用了EGE genenrated mice是否在文章中reveal the details about
generating mice/rat? otherwise they need a paper or patent to refer to. |
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T****u
发帖数: 424 | 46 我非常理解你的难处。
也许就是简单的组分的改变。
类比于drug discovery industry
发现了某个OTC FDA approved drug可以治疗另外一种疾病。
要不要申请专利其实是很头疼的问题。
因为即使申请了，你也没有办法限制其他研究者，医生使用这个compound.
但if you do not publish with paper or patent, the validity of the mice or
the data produced with the mice/rat with be challenged by the scientific
community or the reviewer, which might finally affect your market and
potential clients.
Just my 2 cents |
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w***r
发帖数: 709 | 47 申请专利是王道，发文章对你公司有啥用？发方法类文章，技术细节是一定要公布的，
要不然不就成了商业广告。 |
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w***r
发帖数: 709 | 48 就说用crispr做的，不就完事了吗，
其实直接注射卵核，即使没有crispr,同源重组率也是极高的 |
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T****u
发帖数: 424 | 49 。。。。currently Genome editing generates KO mice without going through ES
cell stage.
You are talking different things such as hES based therapy. |
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k*****o
发帖数: 148 | 50 你们的技术重组的效率比Jaenish lab的方法高大概多少？ |
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