V******t
发帖数: 444 | |
o**4
发帖数: 35028 | 2 许田弄出piggybac，这个牛逼大了，
不能要求他动不动就有这个级别的成果吧 |
V******t
发帖数: 444 | 3 那个没用了吧
【在 o**4 的大作中提到】
: 许田弄出piggybac，这个牛逼大了，
: 不能要求他动不动就有这个级别的成果吧
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a*****n
发帖数: 2835 | 4 现在CRISPR技术更为先进了
【在 V******t 的大作中提到】
: 那个没用了吧
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f****y
发帖数: 104 | |
K**4
发帖数: 1015 | |
l*******i
发帖数: 153 | 7 Piggybac作为gene delivery tool还是不错的，但是不能应用于基因治疗，是一个大的
缺陷。
许田的主要问题还是他的那个用piggybac制作基因敲除小鼠的宏大项目。好几年前就听
说复旦给许田一栋楼，养上万只小鼠，就是为了这个项目。谁知CRISPR技术这么快就出
来了，直接砸了许多人的“饭碗”，许田也算其中一个“受害者”了。
非病毒类整合性载体，比如piggybac，sleeping beauty在基因治疗方面还是有很大优
势的。目前，在欧美都有sleeping beauty的基因治疗临床试验在开展. |
o**4
发帖数: 35028 | 8 还是很有用的，
作为基因表达载体也是很不错的
【在 V******t 的大作中提到】
: 那个没用了吧
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a*****n
发帖数: 2835 | 9 这个作为基因表达载体的优势具体在什么地方啊？
是否转到细胞里能够稳定表达跟内源性接近的水平？
【在 o**4 的大作中提到】
: 还是很有用的，
: 作为基因表达载体也是很不错的
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o**4
发帖数: 35028 | 10 具体机理不清楚，
不过我们几个大基因，用别的系统都不行，只有piggybac非常好使
【在 a*****n 的大作中提到】
: 这个作为基因表达载体的优势具体在什么地方啊？
: 是否转到细胞里能够稳定表达跟内源性接近的水平？
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a*****n
发帖数: 2835 | 11 请问你们是转染细胞吗？有没有文献或者protocol资料可以参考？
我现在研究的一个基因，knockdown或者crispr knockout在细胞里的表型一致，但是都
不能被rescue，我怀疑rescue的方法是过量表达，表达太多蛋白导致不能正常发挥功能
，我想找到一个能够表达尽量低的载体，也比较容易做的
多谢！
【在 o**4 的大作中提到】
: 具体机理不清楚，
: 不过我们几个大基因，用别的系统都不行，只有piggybac非常好使
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o**4
发帖数: 35028 | 12 就是正常转染piggybac载体，就会整合到基因组稳定表达
【在 a*****n 的大作中提到】
: 请问你们是转染细胞吗？有没有文献或者protocol资料可以参考？
: 我现在研究的一个基因，knockdown或者crispr knockout在细胞里的表型一致，但是都
: 不能被rescue，我怀疑rescue的方法是过量表达，表达太多蛋白导致不能正常发挥功能
: ，我想找到一个能够表达尽量低的载体，也比较容易做的
: 多谢！
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a*****n
发帖数: 2835 | 13 这个克隆和转染难做吗？
【在 o**4 的大作中提到】
: 就是正常转染piggybac载体，就会整合到基因组稳定表达
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j******i
发帖数: 939 | 14 piggybac用plasmid表达的话很容易多拷贝 所以表达量不会低 当然 也可以用极低量的
PB transpoase 然后多筛选几个单拷贝克隆 其中有的克隆表达量会低
【在 a*****n 的大作中提到】
: 请问你们是转染细胞吗？有没有文献或者protocol资料可以参考？
: 我现在研究的一个基因，knockdown或者crispr knockout在细胞里的表型一致，但是都
: 不能被rescue，我怀疑rescue的方法是过量表达，表达太多蛋白导致不能正常发挥功能
: ，我想找到一个能够表达尽量低的载体，也比较容易做的
: 多谢！
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o**4
发帖数: 35028 | 15 不难，
就是普通的克隆跟转染
【在 a*****n 的大作中提到】
: 这个克隆和转染难做吗？
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L*********y
发帖数: 322 | 16 参加过许田的 seminar，许的报告很精彩，其英语表达能力极强，显的很 smart。他的
专长是遗传，不可能象搞生化和结构的那样大批量生产文章。但是许的文章很有分量，
象在果蝇里广泛应用的Genetic mosaic技术，就是许完善发展来的。
【在 V******t 的大作中提到】
: 好像消失了
: 跟管坤良王晓东的差距越来越大了。
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s******s
发帖数: 13035 | 17 许田phd做的FRT／FLP这个就够超重量级的工作了。这种级别的多做几个估计就能碰上
诺贝尔奖了。大家expectation太高。
【在 L*********y 的大作中提到】
: 参加过许田的 seminar，许的报告很精彩，其英语表达能力极强，显的很 smart。他的
: 专长是遗传，不可能象搞生化和结构的那样大批量生产文章。但是许的文章很有分量，
: 象在果蝇里广泛应用的Genetic mosaic技术，就是许完善发展来的。
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D*********5
发帖数: 59 | 18 http://www.jbc.org/content/279/31/32824.long
This retracted article, the first author Weiquan Li,is now working with Feng
Liu at Second XiangYa Hospital, Changsha, Hunan
【在 K**4 的大作中提到】
: 刚看到管最近有两篇文章retracted了
: http://retractionwatch.com/2015/06/18/macarthur-awardee-retract
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S**********e
发帖数: 620 | 19 这个JBC的文章也撤回
怎么个说法？
为了憋出来个大的?还是保证学术纯洁？
【在 K**4 的大作中提到】
: 刚看到管最近有两篇文章retracted了
: http://retractionwatch.com/2015/06/18/macarthur-awardee-retract
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a*****n
发帖数: 2835 | 20 为什么JBC就不能撤回？不懂你的逻辑
【在 S**********e 的大作中提到】
: 这个JBC的文章也撤回
: 怎么个说法？
: 为了憋出来个大的?还是保证学术纯洁？
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S**********e
发帖数: 620 | 21 大文章多数迫于压力撤回修改
小文章为啥费劲折腾？
【在 a*****n 的大作中提到】
: 为什么JBC就不能撤回？不懂你的逻辑
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a*****n
发帖数: 2835 | 22 不一定是折腾，也不需要迫于压力啊，好的科学家发现自己之前的文章有问题会主动撤
回的，这个很正常的吧
【在 S**********e 的大作中提到】
: 大文章多数迫于压力撤回修改
: 小文章为啥费劲折腾？
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S**********e
发帖数: 620 | 23 所以我说他是为了保持学术纯洁啊
【在 a*****n 的大作中提到】
: 不一定是折腾，也不需要迫于压力啊，好的科学家发现自己之前的文章有问题会主动撤
: 回的，这个很正常的吧
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a*****n
发帖数: 2835 | 24 是啊，只是感觉你对JBC不是很客气啊，我刚投了一篇JBC，有点敏感，呵呵
【在 S**********e 的大作中提到】
: 所以我说他是为了保持学术纯洁啊
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S**********e
发帖数: 620 | 25 不是我看不上，是我觉得guan看不上，发了也罢，还要撤，挺逗的
【在 a*****n 的大作中提到】
: 是啊，只是感觉你对JBC不是很客气啊，我刚投了一篇JBC，有点敏感，呵呵
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l*******e
发帖数: 170 | |
