请教一个建高表达细胞系的问题 - Biology版 - 未名存档

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Biology版 - 请教一个建高表达细胞系的问题

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l******3 发帖数: 25	1 请教各位一个问题我之前转了特定的shRNA，然后建了一个基因knockdown的细胞系。现在我需要在这个细胞系上转同一个基因的一个mutation，但是之前的shRNA应该会对这个mutation有影响吧，是不是要先把这个mutation先做个突变然后再转？有类似经验的朋友吗？请指教多谢有好建议的朋友注定有好运：-）
s********r 发帖数: 312	2 如果你的shRNA是target CDS的话，再转那个基因就要把位点突变掉，如果是target UTR的话问题不大。
l******3 发帖数: 25	3 是靶向UTR的，确定不用突变就可以直接转吗？谢谢楼上的朋友
l******3 发帖数: 25	4 我的shRNA是靶向3'UTR的，但是我发现我做过表达要转的质粒也含有这段3'UTR 这样是不是不能直接转了？必须先做突变
s********r 发帖数: 312	5 我们做的转的基因都是直接克隆cDNA序列，不带UTR的。你这个情况可能要突变吧

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