关于腺病毒表达系统的问题。 - Biology版 - 未名存档

本页内容为未名空间相应帖子的节选和存档，一周内的贴子最多显示50字，超过一周显示500字访问原贴

Biology版 - 关于腺病毒表达系统的问题。

相关主题
● 请教一个非常规实验（大载体连接）手段是否可行	● pAAV-EF1a-double floxed-EYFP-WPRE-HGHpA 可以直接线性化了用于稳转mES cell么？
● 请问各位cloning高手	● 问一个基本的质粒电泳的问题
● 1包子求助各位大侠用PCR扩增整个质粒的问题?	● 应该用什么基因做腺病毒感染组织的对照，先谢了。
● 做腺病毒，哪个公司好，一般多少钱	● 克隆郁闷了
● 整合质粒的疑问	● realtime PCR sample配好以后能等一个小时再run吗？
● 大质粒单酶切，非特异性带问题	● 问一个简单的引物分装的问题
● 问个分子克隆的问题，求助大拿...	● 请教genotyping的问题
● 基因插入基因组	● 克隆失败了

相关话题的讨论汇总
话题: 腺病毒话题: pcr话题: 病毒话题: cdna话题: 检测

进入Biology版参与讨论

1

(共1页)

w*****t 发帖数: 179	1 问个腺病毒的问题，用的是PAD EASY 系统。将CDNA 克隆进PSHUTTLE后，Q-PCR 和WB都可以检测到，但是包装病毒后，可以测到滴度。但是再感染细胞却检测不到表达，再取少量病毒煮沸后PCR全长CDNA，也检测不到。但是的确有病毒，不知道问题再那里？特地请教有经验的大侠，非常感谢。
j****x 发帖数: 1704	2 说明你的目的基因可能就没重组到pAD那个大质粒里面去。PCR检测一下你重组之后的那个需要线性化的质粒，看看片段在不在【在 w*****t 的大作中提到】 : 问个腺病毒的问题，用的是PAD EASY 系统。将CDNA 克隆进PSHUTTLE后，Q-PCR 和WB都 : 可以检测到，但是包装病毒后，可以测到滴度。但是再感染细胞却检测不到表达，再取 : 少量病毒煮沸后PCR全长CDNA，也检测不到。但是的确有病毒，不知道问题再那里？特 : 地请教有经验的大侠，非常感谢。
w********r 发帖数: 1431	3 用的什么感染条件？我们通常用293A扩增腺病毒，等293A全漂起来或者全都变圆之后，把细胞和medium都收起来，-80/37水浴冻融三次，离心去掉293A细胞碎片后，取适量（取决于病毒的滴度）上清直接感染细胞（不要再掺 medium），3-6个小时候换回正常的培养细胞的medium就可以了。

1

(共1页)

进入Biology版参与讨论

相关主题
● 克隆失败了	● 整合质粒的疑问
● 求助 RNA in vitro transcription	● 大质粒单酶切，非特异性带问题
● 讲个牛人做实验的事	● 问个分子克隆的问题，求助大拿...
● 问个关于overexpress pri-和pre-miRNA质粒构建的问题	● 基因插入基因组
● 请教一个非常规实验（大载体连接）手段是否可行	● pAAV-EF1a-double floxed-EYFP-WPRE-HGHpA 可以直接线性化了用于稳转mES cell么？
● 请问各位cloning高手	● 问一个基本的质粒电泳的问题
● 1包子求助各位大侠用PCR扩增整个质粒的问题?	● 应该用什么基因做腺病毒感染组织的对照，先谢了。
● 做腺病毒，哪个公司好，一般多少钱	● 克隆郁闷了

相关话题的讨论汇总
话题: 腺病毒话题: pcr话题: 病毒话题: cdna话题: 检测

未名新帖统计// 7月16日

#	版面	帖数(主题数)
-	全站	4871 (796)
1	Military	3777 (569)
2	Stock	341 (51)
3	Joke	117 (17)
4	History	116 (3)
5	Automobile	100 (9)
6	USANews	55 (9)
7	Midlife	45 (1)
8	Headline	41 (41)
9	Dreamer	33 (13)
10	FleaMarket	32 (20)
11	Living	30 (7)

* 这里只显示发帖超过25的版面，努力灌水吧:-)