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Biology版 - 有人做过PCR array么?几个小白问题
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a******7
发帖数: 7936
1
是一个96孔板只能做一个样品么?
老板给我的盒子里就两个板啊,一个做control一个做处理的,就没了。。。。没有重复
实验室只有abcam的Sybr Green,能用么?还是要另外定 SYBR Green mastermix?
cDNA的浓度有没有要求?mRNA reverse transcript以后一般是稀释10倍就可以了么?
谢谢!~
k****o
发帖数: 589
2
有产品的说明吗?一般还是按厂家推荐的来比较好,因为是实验确认过的。cDNA浓度你
可以用普通的qPCR摸摸范围,一般Ct在20-35这个区间比较好。但是据我经验,Biorad
的机器15-35都没啥问题。
个人觉得不宜用PCR array下结论。这东西更适合作为一个筛选工具。何况要做下去你
也得重复验证才行。这点和microarray比较像。
E*******2
发帖数: 131
3
我没做过,听大家讨论的时候教授说这个实验的ct要控制在30以下,而不是35。具体理
由没能说服我,忘了。同意你说的这只适合做筛选,我导师被一外援教授忽悠买了好几
套板了,结果重复性比较差。

Biorad

【在 k****o 的大作中提到】
: 有产品的说明吗?一般还是按厂家推荐的来比较好,因为是实验确认过的。cDNA浓度你
: 可以用普通的qPCR摸摸范围,一般Ct在20-35这个区间比较好。但是据我经验,Biorad
: 的机器15-35都没啥问题。
: 个人觉得不宜用PCR array下结论。这东西更适合作为一个筛选工具。何况要做下去你
: 也得重复验证才行。这点和microarray比较像。

a******7
发帖数: 7936
4
当然是筛选工具了,一块板好贵的说
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