z********8
发帖数: 818 | 1 打算用Hela 细胞稳定表达某个基因。我需要先挑一个hela 细胞单克隆，然后用这个单
克隆长出来的细胞再transfection我的基因，挑选稳定细胞株吗？
谢谢！ |
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W*****n
发帖数: 21 | 2 试着整理了一下.
刚开始有人在Google论坛上说阿狗切不了内源DNA,也切不了转入DNA,自己太衰了,请高
手指点一下.结果有一群人都说阿狗切不动.
突然有个印度小哥debo说阿狗神勇,一试就灵. 与阿狗共转染的GFP质粒表达GFP蛋白明
显下降, 暗示GFP质粒DNA被阿狗切段, Fig 3C 被重复. 众人一追问,debo小哥说没做
DNA实验.看似印度小哥对T7E1实验不太熟. 众人讨论GFP蛋白表达下降也许是由于其他
因素,诸如导向DNA影响转译, 或是GFP质粒DNA转染效率本身在试验组和对照组中就有差
异.也就说对照不严格, 是个假对照. 过了几天, 印度小哥debo悄悄发贴说DNA实验结果
为阴性. 阿狗没有切DNA.
与此同时,更多的人表示Fig4 无法重复. 有人说实验是在293细胞中做的, 也许在HeLa
细胞中会有不同结果. 也有人明确说在HeLa中也不行. 无任何DNA被切证据.
突然又有个澳洲老哥Gaetan Burgio发推特说阿狗神勇,在受精卵中大切内源DNA, 效率
惊人, 而且这次是DNA证据. 有图有真相. 不过老哥好象挺粗心, 图也标错了,引起... 阅读全帖 |
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s*****i
发帖数: 315 | 3 韩的质粒虽然不带tag，但是c端多出来几个氨基酸
我当时做实验时从头合成了NgAgo，并且有C端完全没有加入任何多余氨基酸残基的质粒
版本。按着韩的转染protocol，用survyor assay看不到阳性结果。
他用lipofectamine 2000 瞬时转染hela cell都能有很好的结果，实在太可疑了。
lipofectamine 2000 转hela基本上达不到很高的效率，能有20%不错了
Ago
Ago |
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c********n
发帖数: 225 | 4 第四类“重复” 验证实验信息：实名, 网络、论坛发布
- 重复、拓展验证实验不能支持NgAgo基因组编辑功能
- 包含有具体实验信息（eg实验材料，步骤，etc）以及发布方具体信
息的发布报告
共计13则
细节请参见
Date：2016年10月10日
Title：13位科学家实名呼吁对韩春雨启动调查：为了中国学界的名声
Link：
http://www.thepaper.cn/newsDetail_forward_1541143_1
增加实验细节请参见：
Date：2016年10月11日
Title：【赛先生】13个课题组实名声明：无法重复韩春雨实验
Link:
http://chuansong.me/n/943170546756
其中， 根据一些实验室数据推论，“NgAgo或许不具备双链DNA切割活性”
“北京大学生物动态光学成像中心研究员孙育杰的实验室专长荧光成像。。。。孙育杰
进一步解释：端粒有一个特点，它有数千个重复片段，如果用CRISPR或者TALEN这样的
技术去target（靶向）端粒的重复片段的话，由于它有上千次重复，数百、上千个
CRISPR或TALE会富... 阅读全帖 |
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c********n
发帖数: 225 | 5 第四类“重复” 验证实验信息：实名, 网络、论坛发布
- 重复、拓展验证实验不能支持NgAgo基因组编辑功能
- 包含有具体实验信息（eg实验材料，步骤，etc）以及发布方具体信
息的发布报告
共计13则
细节请参见
Date：2016年10月10日
Title：13位科学家实名呼吁对韩春雨启动调查：为了中国学界的名声
Link：
http://www.thepaper.cn/newsDetail_forward_1541143_1
增加实验细节请参见：
Date：2016年10月11日
Title：【赛先生】13个课题组实名声明：无法重复韩春雨实验
Link:
http://chuansong.me/n/943170546756
其中， 根据一些实验室数据推论，“NgAgo或许不具备双链DNA切割活性”
“北京大学生物动态光学成像中心研究员孙育杰的实验室专长荧光成像。。。。孙育杰
进一步解释：端粒有一个特点，它有数千个重复片段，如果用CRISPR或者TALEN这样的
技术去target（靶向）端粒的重复片段的话，由于它有上千次重复，数百、上千个
CRISPR或TALE会富... 阅读全帖 |
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c********n
发帖数: 225 | 6 对于韩春雨NBT文章无法重复的问题
需要从Figure 1 开始一步步看
作者的contributions
1. C.H. conceived the study and designed the experiments.
文章 “Story” “Idea” 的设计与发起人
2. X.Z.S. provided intellectual advice on the project and experimental
design.
实验设计， “One guide-faithful” -Figure 2d？
3. C.H. performed mammalian genome editing.
（Figure 4,5）
文章里让科研界最感兴趣的结果，也是无法被重复验证的主要问题
4. F.G. performed the BLAST search and the in vitro cleavage experiments.
（Figure 1, supplementary figure 2）
大肠杆菌E coli 表达的蛋白
NgAgo 基因编辑功能的初步 in vitro 数据支持
注... 阅读全帖 |
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c********n
发帖数: 225 | 7 【再贴一次】
对于韩春雨NBT文章无法重复的问题
需要从Figure 1 开始一步步看
作者的contributions
1. C.H. conceived the study and designed the experiments.
文章 “Story” “Idea” 的设计与发起人
2. X.Z.S. provided intellectual advice on the project and experimental
design.
实验设计， “One guide-faithful” -Figure 2d？
3. C.H. performed mammalian genome editing.
（Figure 4,5）
文章里让科研界最感兴趣的结果，也是无法被重复验证的主要问题
4. F.G. performed the BLAST search and the in vitro cleavage experiments.
（Figure 1, Figure 2？，Figure 3a，supplementary figure 2）
大肠杆菌E coli 表达的蛋白
NgAg... 阅读全帖 |
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s**d
发帖数: 764 | 8 脑炎病毒还能在高温下生长扩增呀
莫非你往注射液里加入了vera,hela细胞不成？
现在山西疫苗所有已有的原因性问题就是乙肝疫苗部分批次受高温
其它问题不是绝对没有
但是要证据
从整个山西，大跨度的找70个疑似病例（只访问了三十个）。再天马行空的跟高温事件
建立联系，就开始鸣放了。这比文革大字报功力强多了 |
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O*******d
发帖数: 20343 | 9 癌细胞就是长生不老的。 最有名的Hela Cell, 就是1951年从一个女人的子宫颈癌上取
得的。 直到现在还活在实验室的培养皿里，一代一代生生不息。 |
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O*******d
发帖数: 20343 | 10 这是那个女人的照片， 她叫Henrietta Lacks，所以她的细胞叫Hela。 |
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D**s
发帖数: 6361 | 11 来源：科学网丁广进博客、BioArt微信公众号
引言：《韩非子·喻老》一文中曾有言曰：“楚庄王莅政三年，无令发，无政为也。右
司马御座而与王隐曰：“有鸟止南方之阜，三年不翅，不飞不鸣，嘿然无声，此为何名
？”王曰：“三年不翅，将以长羽翼；不飞不鸣，将以观民则。虽无飞，飞必冲天；虽
无鸣，鸣必惊人。”
5月2日，Nature系列顶级刊物Nature Biotechnology在线发表了来自河北科技大学生物
科学与工程学院青年教师韩春雨副教授题为“DNA-guided genome editing using the
Natronobacterium gregoryi Argonaute”的重大原创性成果。文章甫一发表，瞬间刷
爆微信朋友圈，这里面有两层原因，其一，该项新的基因编辑手段对目前热火朝天的
CAS9技术提出了挑战；其二，领导该项研究的青年老师所在的单位和个人基本上籍籍无
名（抱歉，请允许我用了这个词）。
“不鸣则已，一鸣惊人”韩春雨老师在Nature？Biotech上发表诺奖级原创成果
Nature Biotechnology文章截图
小编先引用河北科技大学生物科学与工程学院官... 阅读全帖 |
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f**o
发帖数: 12685 | 12 应该有人吼出科研工作者心中的苦闷了！ 精选
已有 11665 次阅读 2016-5-19 00:49 |系统分类:观点评述
说明：本文可能有令各位感觉不适的内容，读前要慎重。本人只从事过生物医学基础科
研，对物理、化学等其他基础学科状况并不甚了解，不知道本文观点是否适用。本文一
开始题目是：《应该有人吼出（生物）科研工作者心中的苦闷了！》后来不同的人或评
论或私信告诉我他们的学科也有这种状况，因此就把生物二字去掉了。
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前言：本文并非是为了灌输负能量，而是希望指出现行科研模式的一些弊端，引起有关
方面的重视，仅属一家之言。并非为了严格论述证明某件事，只希望读到的朋友体会一
下自己或身边的人是否也有这类经历，这类感觉，与大家交流一下。另外，很多博友也
指出了数学的重要性。我也想说，数学、计算机、和统计应该是现代自然科学研究人员
的必备技能。然而可惜的是，除了一些顶尖大学，大多数国内985高校的生物系（不知
道其他学科是否也是），仅开设了两个学期的微积分。这对于现代... 阅读全帖 |
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z*m
发帖数: 3227 | 14 韩春雨被曝代笔博士论文收费七千 欲让学生买论文
发表“新一代基因编辑技术”NgAgo论文的河北科技大学副教授韩春雨，因发表一
年多仍未有机构实现“重复实验”而在2017年8月主动向期刊撤回论文。2018年8月31日
，河北科技大学官网公布于2017年8月启动的学术评议及相关程序的结果，称撤稿论文
已不再具备重新发表的基础，同时未发现韩春雨团队有“主观造假情况”。
澎湃新闻掌握的材料则显示，韩春雨自曝曾通过代写学位论文牟利，意图组织学生
进行学位论文买卖活动，并欲以版面费为条件换取其妻子在他人论文中的署名。
2016年5月在《自然-生物技术》杂志发表“新一代基因编辑技术”NgAgo论文后，
“非知名学者”身份、“世界级科学发现”，这一巨大的反差让河北科技大学副教授韩
春雨立刻受到了热捧，一度被视为中国冉冉升起的科学新星。
根据韩春雨论文描述，NgAgo是一项和目前主流的“基因魔剪”CRISPR拥有同样效
率的基因编辑技术，能高效地实现对特定DNA片段的敲除、加入。然而，1年多过去后，
作为一项方法学的生物技术，全球没有一家实验室宣布能完整重复韩春雨的NgAgo实验。
2017年8月3日，... 阅读全帖 |
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x********e
发帖数: 35261 | 15 91年的工作，从一个EPO基因开始，先dissect出应答氧浓度的enhancer sequence，然
后用这个sequence为饵过了几百升HeLa细胞悬液，终于拿到几微克HIF蛋白，拿去做质
谱获得部分蛋白序列，倒推出HIF部分dna序列，用这个probe再去钓整个HIF基因。这tm
只是一个一作而已……纯搬砖工作。
那个时候估计都没有yeast 2 hybrid这种东西，更不要说各种omics了 |
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S*******l
发帖数: 4637 | 16 妈的造谣动动嘴，辟谣跑断腿。
老子去找了武汉所原文：已经做了entry mode test, 猪这个冠状病毒不用感染人的几
个受体，和这次新冠状病毒用ACE2做entry完全不一样。
Nature
Letter
Published: 04 April 2018
Fatal swine acute diarrhoea syndrome caused by an HKU2-related coronavirus
of bat origin
Peng Zhou, Hang Fan, […]Jing-Yun Ma
Nature volume 556, pages255–258(2018)Cite this article
Known coronavirus host cell receptors include angiotensin-converting enzyme
2 (ACE2) for SARS-related CoV, aminopeptidase N (APN) for certain
alphacoronaviruses, such as human (... 阅读全帖 |
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c******e
发帖数: 1351 | 17 国内论坛上的千老有发帖子，看上去像回事儿，版上的内行可以鉴定一下（以下转载）：
昨晚收到的消息，中科院石正丽教授组发现武汉冠状病毒最高同源度蝙蝠亲本株，算是
重大突破，特此刊文。
中科院石正丽教授是从事国内蝙蝠冠状病毒长期研究工作的科学家，其在蝙蝠冠状病毒
领域发文权威性目前业内最高，早前SARS病毒亲本蝙蝠株溯源也是由该组最早完成的。
这次获得的蝙蝠亲本株同源性极高，DNA相似度达到96%以上，可以基本确认这次武汉冠
状病毒来源于中华果蝠，样本分离于云南，具体传播路径，宿主来源有待进一步研究，
需要对传播链条上周边所有蝙蝠及相关动物进行采样，建构完成传播链。
蛇作为中间宿主的研究因为北大组研究方法有问题，导师下了任务，我这边在重复北大
组的实验结果，扩大研究样本，近日会发布，北大组结果可能会被推翻。
接下来看文章，文章标题：
《Discovery of a novel coronavirus associated with the recent pneumonia
outbreak in humans and its potential bat origin》
发表于预印本，原文链接... 阅读全帖 |
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S*******l
发帖数: 4637 | 18 妈的造谣动动嘴，辟谣跑断腿。
老子去找了武汉所原文：已经做了entry mode test, 猪这个冠状病毒不用感染人的几
个受体，和这次新冠状病毒用ACE2做entry完全不一样。
Nature
Letter
Published: 04 April 2018
Fatal swine acute diarrhoea syndrome caused by an HKU2-related coronavirus
of bat origin
Peng Zhou, Hang Fan, […]Jing-Yun Ma
Nature volume 556, pages255–258(2018)Cite this article
Known coronavirus host cell receptors include angiotensin-converting enzyme
2 (ACE2) for SARS-related CoV, aminopeptidase N (APN) for certain
alphacoronaviruses, such as human (... 阅读全帖 |
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S*******l
发帖数: 4637 | 19 新冠不感染老鼠。新冠不能感染表达老鼠ACE2的hela cells. 石正丽最新的自然文章里
做过。
所以，老鼠不会是最后宿主。 |
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S*******l
发帖数: 4637 | 20 一种可能性RatG13, 穿山甲Cov祖先和新冠都有PRRA， 后来蝙蝠和山甲把PRRA丢了,依
然保有infectivity。新冠一直没丢。
而且，可能这个PRRA对新冠致病性根本不重要。石正丽把这个敲掉去感染Hela
expressing hACE2看看就知道了。 |
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H**********5
发帖数: 2012 | 21 I dont think you can tried skip by lucky.
years ago when I moved to Fremont,my landlord said gov in Fremont is hela
POOR and adviced me drive carefully in Fremont in case for being captured by
FI |
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T*P
发帖数: 2697 | 22 kao,别提冠西同志了，到现在Q同学的具体情况都被雪藏了，要搞定冠西同志的其他
资料，只有靠hela同学出马了。
泡泡同志，独乐乐不如众乐乐
冠西同学就很大公无私吗
牺牲他一个造福全人类
我党的口号是啥
实践是检验真理的唯一标准
您只说不发布
我们怎么知道总理和克林顿的差别呢
且， |
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h**a
发帖数: 28 | 23 hela同学只能说
冠西同志虽然很大胆，但是丢了全体中国男性的脸啊
哎，深谈一口气
我们只能指望我党的下一代了啊 |
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l******o
发帖数: 279 | 24 新手上路,头一回申请一个DARPA的项目。其他都写好了,最后关头被这个Priced Bill-
of-Material (BOM)折磨得够呛! 我的背景是工程的，因为项目的内容要用到基本的
cell culture（HeLa cell）, antibodies, immunoassay reagents等等，所以打算预
算 $15K 的材料费。独立以前用得很少，从来没有自己买过这些东西，都是合作实验室
的人提供现成的。现在要提供这些东西的价格明细，供应商，用量等等细节，实在头大。
Annoucement上的要求是这样说的, NSF/NIH 没有要求这么详细的，说一下大概多少就
行。DARPA管得太细了吧？！
A priced Bill-of-Material (BOM) clearly identifying, for each item proposed,
the quantity, unit price, the source of the unit price (i.e., vendor quote,
engineering estimate, etc.), the type o... 阅读全帖 |
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p*****n
发帖数: 1415 | 25 研究：癌细胞可分泌使杀手细胞卸甲物质
【中央社╱台北十日电】 2008.05.11 03:15 am
台北荣总妇产部主治医师王鹏惠、台大医院妇产部主治医师许博钦今天发表一项研究报
告，研究发现，癌细胞会分泌一种代号「物质甲」分泌物，使体内的自然杀手细胞功能
下降，形同卸甲，研究团队同时也发现一种唾液（酉每），可让杀手细胞恢复作用，但
相关机转仍待进一步研究。
台北荣总、台大医院今天发表两院合作教学研究一年的成果，王鹏惠、许博钦联名发表
「子宫颈癌细包株Hela对成人周边血自然杀手细胞功能之抑制作用」初步研究报告，结
果发现癌细胞能躲过体内杀手细胞追杀，的确有特殊方法。
王鹏惠表示，自然杀手细胞是人体体内第一线防卫系统，作用类似人类的军警系统，可
以将侵入体内的不明细胞、病毒杀掉，但癌细胞却可以在不知不觉中在体内滋长、散布
，以致被发现时常常已到难以医治境地，研究团队怀疑癌细胞会分泌一些物质干扰自然
杀手细胞作用。
研究团队将子宫颈癌细胞与自然杀手细胞一起培养，结果发现癌细胞某些酵素的分泌增
加（研究团队给予代号「物质甲」），使得自然杀手细胞的某些配糖体无法发挥作用，
形同被卸甲， |
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t*******y
发帖数: 10477 | 27 Var forsiktigt hela tiden |
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m*****u
发帖数: 19562 | 28 ☆─────────────────────────────────────☆
Paulina (勇敢的心) 于 (Thu Mar 10 07:05:14 2011, 美东) 提到:
【 以下文字转载自 O2 俱乐部 】
发信人: Paulina (勇敢的心), 信区: O2
标 题: 俺怎么越看越嚼着应该是“母后戊”鼎
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Mar 10 07:04:57 2011, 美东)
发信人: pixie (pixie), 信区: ebiz
标 题: 俺怎么越看越嚼着应该是“母后戊”鼎
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Mar 10 03:01:49 2011, 美东)
http://news.sina.com.cn/s/2011-03-10/153122088978.shtml
☆─────────────────────────────────────☆
techsavvy (海阔天空) 于 (Thu Mar 10 11:58:46 2011, 美东) 提到:
勇敢的心
☆──────────────────────────... 阅读全帖 |
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b*****l
发帖数: 9499 | 30 构成我们身体的细胞在不断的衰老，死亡。我们能够活下去，是靠细胞分裂生成新的细
胞来更新和替代死亡的细胞。而细胞的 DNA 在分裂的过程中会被“磨损”，直到起到保
护作用的 DNA 部分（端粒）被磨光，细胞就不能再分裂了 -- 否则，基因编码会开始被
磨掉。DNA 磨损所导致的细胞分裂次数的极限，叫做 Hayflick 极限。我们会衰老，并
最终死亡，很大程度上，就是由于 Hayflick 极限。
要想研究一种细胞，最基本的手段，就是把它从机体上“卸”下来，在体外长期培养 -
- 这样，才可能重复地在同一种细胞上做实验，各实验室在不同时期的实验结果才能互
相参照。这种可以在体外一代代不断培养的细胞，叫做 cell line。
为了研究癌症，科学家们梦寐以求的就是一株癌细胞的 Cell line。但所有的尝试都失
败了 -- 由于 Hayflick 极限，人体的肿瘤细胞无法在体外长期存活。
五十多年前，51年二月一日，有个普普通通的 31 岁的家庭主妇，Henrietta Lacks，在
John Hopkins Hospital 的一次普通检查时，被发现宫颈癌晚期。
这次，医院的组织培养 |
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l***y
发帖数: 4671 | 31 得看是啥癌细胞。hela 我估摸着应该信春哥了。但是现在挺热门的 cancer stem cell
的核心概念只一就是普通癌细胞还是有寿命的。至于 immortalized cells 信不信春
哥，还有待时间检验，反正也挺常见到 n 代之后性状开始加速变异的。
说到 stem cell，其实我们每个人都是理论上永生的啊，都是远古时那第一个细胞的后
代。而我们的某些细胞也会在下一代继续活下去，理论上，子子孙孙，无穷尽也。 |
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l***y
发帖数: 4671 | 32 得看是啥癌细胞。hela 我估摸着应该信春哥了。但是现在挺热门的 cancer stem cell
的核心概念只一就是普通癌细胞还是有寿命的。至于 immortalized cells 信不信春
哥，还有待时间检验，反正也挺常见到 n 代之后性状开始加速变异的。
说到 stem cell，其实我们每个人都是理论上永生的啊，都是远古时那第一个细胞的后
代。而我们的某些细胞也会在下一代继续活下去，理论上，子子孙孙，无穷尽也。 |
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kx
发帖数: 16384 | 33 你们只觉得这是一个很有意思的想法？
作为一个民科
我还以为大家都是这么想的呢，因为我是独自想出这个解释的，所以以为大家也都很容
易想到这个思路，
所以基于这个思路，我前段时间才会想起来问，癌细胞是不是寿命无限
然后河马提到的那个hela更坚定了我的这个民科想法。 |
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n**t
发帖数: 45 | 34 【 以下文字转载自 Biology 讨论区,原文如下 】
发信人: royluo ( 罗马情结), 信区: Biology
标 题: 从纯化到星辰---CSH蛋白质纯化课侧记（十）
发信站: Unknown Space - 未名空间 (Wed May 11 20:43:26 2005) WWW-POST
本文献给YL
（十） 永远的转录因子
第一个模块的实验结束以后，我们进入第二个模块的实验。这个实验的指导教授叫Al Courey。
这个模块的实验主要是要从Hela细胞里纯化AP-1。AP-1是一种很重要的sequence specific转录因
子，在很多生理过程里都有作用。AP-1其实不是一种均一的蛋白质，实际上一种二聚体结构，要么
是Jun-Jun 或者是Jun-Fos dimer。Jun和Fos都是alpha helix的结构。Helix的一边有很多Leu,和
另一个helix形成Leucine Zipper的结构，而helix另一边就是碱性的氨基酸居多，所以可以和DNA
结合。这个转录因子看起来就象一双筷子夹着DNA。
sequence spec |
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a***o
发帖数: 129 | 35 Try that alternative protocol in current protocols in molecular biology which
use BES instead of HEPES.I got much higher efficiency than with HEPES, and I
didn't find any obvious toxicity.
Toxicity may also be cell type specific. Regular HEK293 and Hela cell which I
used seem all right with CaP
is |
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r****o
发帖数: 105 | 36 本文献给YL
（十） 永远的转录因子
第一个模块的实验结束以后，我们进入第二个模块的实验。这个实验的指导教授叫Al Courey。
这个模块的实验主要是要从Hela细胞里纯化AP-1。AP-1是一种很重要的sequence specific转录因
子，在很多生理过程里都有作用。AP-1其实不是一种均一的蛋白质，实际上一种二聚体结构，要么
是Jun-Jun 或者是Jun-Fos dimer。Jun和Fos都是alpha helix的结构。Helix的一边有很多Leu,和
另一个helix形成Leucine Zipper的结构，而helix另一边就是碱性的氨基酸居多，所以可以和DNA
结合。这个转录因子看起来就象一双筷子夹着DNA。
sequence specific转录因子是极其重要的一类蛋白质，真核生物的基因有5~10%是用来编码
这种蛋白的。这个模块涉及的一些实验是最经典的一些分离转录因子的方法，所以很有用。
怎么才能分离纯化呢？首先要确定要纯化什么因子，换句话说就是要决定纯化跟什么特异DNA
序列相结合的转录因子。决定了这个，才能有一个活性检测系 |
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d****e
发帖数: 10 | 37 总体评价是：
1。 同义的cSNP可能导致蛋白质结构变化不是新idea。
2。没有证实C3435T导致的reduced codon usage(from 47% to 35%)直接引起蛋白质结
构变化。
3。提醒大家在自己的研究中不能忽视同义cSNP。
讨论会上，对这篇文章最大的质问就是该文发表的研究数据并没有证实文章标题所说的：
A silent polymorphism in the MDR1 gene changes substrate specificity.
原文一开始就说
"The functions of P-gp for all single polymorphism plasmids as well as for
wild-type MDR1, as
measured by intracellular accumulation or by efflux of fluorescent compounds
, were not distinguishable
under standard conditions. HeLa cells expressiing double |
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s*r
发帖数: 2757 | 38 NPR this noon talked that the hela cell was taken from the black lady
without her knowledge and her family found out that 25 years after her death
.
it is a nice coincidence. |
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l******g
发帖数: 83 | 39 3T3 用Nocodazole synchronization 的效果是不太好，我以前做的时候，几个cell
line， 3T3 treat后变圆的比例最少。用在Hela 还有293 上效果很好。
%, |
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h***e
发帖数: 146 | 40 What about Hela or NIH343? |
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h******u
发帖数: 602 | 41 从培养的细胞里面提，比如Hela, MCF-7等等。 |
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z********i
发帖数: 610 | 42 没有接触过virus infection。
转染后24小时换液，24后收virus（2ml)，因为没有超速离心机，所以没法浓缩。测试
的时候用hela，60mmdish +200ulvirus,通过GFP判断infection效率相当高。
然后用1ml/well virus 感染mouse ES cell（6 well)，发现根本没有GFP
pgk promoter，6 ug/ml polybrene
不知道那位大侠能给点意见？
谢了先 |
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p*****y
发帖数: 44 | 43 测试的时候用hela，60mmdish +200ulvirus,通过GFP判断infection效率相当高。
Check GFP in 2-3 days after infection. The GFP you observed might be GFP
debirs. |
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S******G
发帖数: 965 | 44 http://en.wikipedia.org/wiki/Cell_culture
我以前做的project就研究小分子的cycotoxicity以及他们对不同的cell line的选择性
。常用的cell line有breast cancer cell line， HeLa， Jurkat。通常用normal
breast cell line做对照。
在intro screen里面，据我所知，有很多小分子药物对于某些正常细胞没有毒性，但是
对某些cancer cell line的IC５０可以达到nM级别。 |
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s******y
发帖数: 28562 | 45 MEF, REF, HEK293T,Hela, PTK2, B16F10, eptherial cells... |
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F*Q
发帖数: 3259 | 46 本人（没有细胞生物学的背景）得到一些人体细胞（Hela)内的一些有趣的结构现象，
但是很难和典型的细胞器联系起来，有没有细胞生物学的牛人愿意帮我看看那些东西是
什么？
愿意帮忙的清站内联系。多谢！ |
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s******y
发帖数: 28562 | 47 It's better you post the photo on the board.
Most likely the things you saw in the Hela cells are some cellular vesicles
or mitochondria |
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R*****w
发帖数: 447 | 48 最近在做用mammalian cell 表达蛋白，贴壁培养还是不太方便。请问那些哺乳动物细
胞可以悬浮培养？（可以用spinner flask）
我试过293T细胞，可是在spinner flask长的很差。听说HeLa 可以悬浮培养，是吗？
悬浮培养应该注意些什么：
1，培养基一样吗？
2，FBS浓度还是用10％吗？
多谢！ |
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a****k
发帖数: 1130 | 49 HeLa可以
我们没有自己养过，都是从NCCC买的，他们用的growth medium是Joklik's modified
MEM supplemented with 5% newborn calf serum |
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a*****n
发帖数: 2835 | 50 要专门的293T或者专门的一种HeLa
查一下ATCC 和INVITROGEN |
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