l***s
发帖数: 841 | 1 这几天在考虑用老鼠做siRNA in vivo delivery。联系了几个实验室，他们有些现成的
技术： 1） liposome; 2) Ad病毒； 3）细胞受体结合（试过peptide, toxin,
nanoparticle, 但没试过RNA)。 我有几年没关注这个领域了。同学们有些什么好的建
议？ |
w***a
发帖数: 4361 | 2 关键是你要deliver到哪里。
方法很多，靠谱的没有。
【在 l***s 的大作中提到】
: 这几天在考虑用老鼠做siRNA in vivo delivery。联系了几个实验室，他们有些现成的
: 技术： 1） liposome; 2) Ad病毒； 3）细胞受体结合（试过peptide, toxin,
: nanoparticle, 但没试过RNA)。 我有几年没关注这个领域了。同学们有些什么好的建
: 议？
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z********8
发帖数: 818 | 3
【在 w***a 的大作中提到】
: 关键是你要deliver到哪里。
: 方法很多，靠谱的没有。
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l***s
发帖数: 841 | 4 到哪里还没定，可以先用liver试一下，因为容易些。好像这几年大家对此有些绝望。
我有同学以前在pharma专做这个，试过各种liposome方法，但现在也都放弃了。 所以
我想多试几种方法。但不知道是不是会在浪费时间。
【在 w***a 的大作中提到】
: 关键是你要deliver到哪里。
: 方法很多，靠谱的没有。
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g*****n
发帖数: 250 | |
w***a
发帖数: 4361 | 6 那你的课题到底是干啥？
如果就是siRNA in vivo delivery，
各种Pharma和biotech已经试了有十年了吧。
pubmed里相关的paper也是成千上万。
如果你就是要在liver或者别的tissue knockdown基因表达，
那还有别的方法，比如AAV。
【在 l***s 的大作中提到】
: 到哪里还没定，可以先用liver试一下，因为容易些。好像这几年大家对此有些绝望。
: 我有同学以前在pharma专做这个，试过各种liposome方法，但现在也都放弃了。 所以
: 我想多试几种方法。但不知道是不是会在浪费时间。
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l***s
发帖数: 841 | 7 我们设计了一种全新的siRNA，想看看体内是否有效。一个Ad病毒大拿对此很感兴趣，
主动拿去建载体了。这个病毒和AAV很相似。本来也联系了一个AAV实验室，因为决定先
试试Ad, 就算了。 另一个做receptor delivery的实验室也提出想试试。 虽然他们都
说得很好听，但我不放心，想同时试试别的方法。 我还是想试试liposome，虽然大家
都对这个方法觉得没希望。所以我也很矛盾，怕是白白浪费时间。
【在 w***a 的大作中提到】
: 那你的课题到底是干啥？
: 如果就是siRNA in vivo delivery，
: 各种Pharma和biotech已经试了有十年了吧。
: pubmed里相关的paper也是成千上万。
: 如果你就是要在liver或者别的tissue knockdown基因表达，
: 那还有别的方法，比如AAV。
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z********8
发帖数: 818 | |
g*****n
发帖数: 250 | 9 如果你细想一下liposome的作用原理，就会发现用于in vivo是没戏的。病毒载体是唯
一可以考虑的工具,如果你不想做转基因。 |
z********8
发帖数: 818 | 10
对于liver siRNA knockdown，目前最好的是invitrogen的lipofectamin，比
Adenovirus还
要好。 而且好像他们的试剂还可以用到brain里面，不过我没有试过。
【在 g*****n 的大作中提到】
: 如果你细想一下liposome的作用原理，就会发现用于in vivo是没戏的。病毒载体是唯
: 一可以考虑的工具,如果你不想做转基因。
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l***s
发帖数: 841 | 11 但我听说Lipofectamin体内毒性较高？你们试过吗？ 我倒可以先试试看，比较方便。
实验室一直用lifofectamin做cell culture。
【在 z********8 的大作中提到】
:
: 对于liver siRNA knockdown，目前最好的是invitrogen的lipofectamin，比
: Adenovirus还
: 要好。 而且好像他们的试剂还可以用到brain里面，不过我没有试过。
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z********8
发帖数: 818 | 12
。
invivofectamine 2.0 very good 就是有点贵而已。
【在 l***s 的大作中提到】
: 但我听说Lipofectamin体内毒性较高？你们试过吗？ 我倒可以先试试看，比较方便。
: 实验室一直用lifofectamin做cell culture。
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