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Biology版 - 求教:RNA-seq数据分析的疑惑
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话题: rna话题: read话题: seq话题: quality话题: 数据分析
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l*******i
发帖数: 153
1
请问版里做bioinfo的牛人:
RNA-seq数据做QC时通用的标准是怎样的?因课题需要,我们在重新分析GEO里的一批数
据,用FastQC评估该批数据,发现几乎所有read后半部分的score偏低(见下图)。像
这种情况,应该怎样处理比较合理?
1)Filter by quality: quality cut-off设定为20,90%,结果一半左右的reads会被
扔掉。而文章中宣称其可保留85%以上的read。是我这种filter设定参数有问题吗?一
般的标准是怎样的?
2)Trim:把每个read后30碱基去掉。这样做可行否?理由是什么?
3)针对这种情况,更合理、准确的的方法是什么?
谢谢!
c********e
发帖数: 598
2

1)If the quality score is 20, what is the average read length?
Can you show us the original sra files?

【在 l*******i 的大作中提到】
: 请问版里做bioinfo的牛人:
: RNA-seq数据做QC时通用的标准是怎样的?因课题需要,我们在重新分析GEO里的一批数
: 据,用FastQC评估该批数据,发现几乎所有read后半部分的score偏低(见下图)。像
: 这种情况,应该怎样处理比较合理?
: 1)Filter by quality: quality cut-off设定为20,90%,结果一半左右的reads会被
: 扔掉。而文章中宣称其可保留85%以上的read。是我这种filter设定参数有问题吗?一
: 般的标准是怎样的?
: 2)Trim:把每个read后30碱基去掉。这样做可行否?理由是什么?
: 3)针对这种情况,更合理、准确的的方法是什么?
: 谢谢!

l*******i
发帖数: 153
3
谢谢回复!
read length is 100.

【在 c********e 的大作中提到】
:
: 1)If the quality score is 20, what is the average read length?
: Can you show us the original sra files?

M*P
发帖数: 6456
4
直接切掉后面30bp试试吧,这个数据貌似很老吧,illumina新一些的机器都没这么差了。

★ 发自iPhone App: ChineseWeb 7.8

【在 l*******i 的大作中提到】
: 请问版里做bioinfo的牛人:
: RNA-seq数据做QC时通用的标准是怎样的?因课题需要,我们在重新分析GEO里的一批数
: 据,用FastQC评估该批数据,发现几乎所有read后半部分的score偏低(见下图)。像
: 这种情况,应该怎样处理比较合理?
: 1)Filter by quality: quality cut-off设定为20,90%,结果一半左右的reads会被
: 扔掉。而文章中宣称其可保留85%以上的read。是我这种filter设定参数有问题吗?一
: 般的标准是怎样的?
: 2)Trim:把每个read后30碱基去掉。这样做可行否?理由是什么?
: 3)针对这种情况,更合理、准确的的方法是什么?
: 谢谢!

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