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Biology版 - 磷酸化WB,二抗里能加奶粉么
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L*****t
发帖数: 56
1
第一次做磷酸化蛋白,一抗封闭用5% BSA没问题。但是二抗(CST 7074)要求稀释时加
5%脱脂奶(尝试换成BSA/明胶的复方出了很多杂带), 这个对结果是否有影响?
I*****y
发帖数: 6402
2
二抗也用BSA,奶粉里可能有phosphatase

【在 L*****t 的大作中提到】
: 第一次做磷酸化蛋白,一抗封闭用5% BSA没问题。但是二抗(CST 7074)要求稀释时加
: 5%脱脂奶(尝试换成BSA/明胶的复方出了很多杂带), 这个对结果是否有影响?

t******k
发帖数: 5617
3
可以加牛奶。一抗如果是单抗一般使用BSA,多抗一般用脱脂牛奶,二抗统一用脱脂牛
奶。

【在 L*****t 的大作中提到】
: 第一次做磷酸化蛋白,一抗封闭用5% BSA没问题。但是二抗(CST 7074)要求稀释时加
: 5%脱脂奶(尝试换成BSA/明胶的复方出了很多杂带), 这个对结果是否有影响?

a******8
发帖数: 56
4
most of the time, it is not a problem for me. I know some others also try
adding serum to block non-specific
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