a***y 发帖数: 19743 | 1 别人的实验数据帮分析。
有三个replicate的control,用来作为基数算实验组fold change的
有些时间point,replicate之间Ct差异较大。如果efficiency是1,1 Ct是大约2倍,那
么有些时间段内
9个(3 x 3)Ct值的range差异可以有常常大于2-3,有个时间段range有4-5。
这个control还能用么?这个实验数据还能发表么?
相比之下各个实验组内的数据Ct差异都很小。
我感觉这个control差异这么大,作为基数很problematic,而且差异这么大的Ct值做算
术平均数距离真实值差异也太大了,必须换一个算法。(以前版上有人求excel表格,
还有没有啊?)
谢谢了!发包子感谢回答的。 |
a***y 发帖数: 19743 | 2 up一下
【在 a***y 的大作中提到】 : 别人的实验数据帮分析。 : 有三个replicate的control,用来作为基数算实验组fold change的 : 有些时间point,replicate之间Ct差异较大。如果efficiency是1,1 Ct是大约2倍,那 : 么有些时间段内 : 9个(3 x 3)Ct值的range差异可以有常常大于2-3,有个时间段range有4-5。 : 这个control还能用么?这个实验数据还能发表么? : 相比之下各个实验组内的数据Ct差异都很小。 : 我感觉这个control差异这么大,作为基数很problematic,而且差异这么大的Ct值做算 : 术平均数距离真实值差异也太大了,必须换一个算法。(以前版上有人求excel表格, : 还有没有啊?)
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A*******e 发帖数: 284 | 3 如果是我 这个数据就直接扔掉,control的ct差异这么大,那整个东西我都不信了。
我也遇到过这样的,都是core facility的那帮人加样太马虎,所以重复不好,我直接
丢了。 |
a***y 发帖数: 19743 | 4 谢谢。给你发包子了。
补充说明一下
这个是三个biological replicate
然后跑qPCR的时候有每个biological replicate有三个tech rep
qPCR tech rep之间差异很小,所以不是loading的问题
biological rep之间Ct差异很大。作为control,我觉得有这么大的差异,使得数据分
析和结果分析几乎不可能……除非接受平均值是可信的。
还有谁能给点意见?
谢谢!
【在 A*******e 的大作中提到】 : 如果是我 这个数据就直接扔掉,control的ct差异这么大,那整个东西我都不信了。 : 我也遇到过这样的,都是core facility的那帮人加样太马虎,所以重复不好,我直接 : 丢了。
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b*******n 发帖数: 8420 | 5 据说这很常见。
【在 a***y 的大作中提到】 : 谢谢。给你发包子了。 : 补充说明一下 : 这个是三个biological replicate : 然后跑qPCR的时候有每个biological replicate有三个tech rep : qPCR tech rep之间差异很小,所以不是loading的问题 : biological rep之间Ct差异很大。作为control,我觉得有这么大的差异,使得数据分 : 析和结果分析几乎不可能……除非接受平均值是可信的。 : 还有谁能给点意见? : 谢谢!
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a***y 发帖数: 19743 | 6 treatment group没有这个问题
control有
不正常啊。
【在 b*******n 的大作中提到】 : 据说这很常见。
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