M*****n
发帖数: 16729 | 1 这个用DMSO配成多少浓度的stock solution？
要不要aliquote 之后freeze at -20?
反复冻融是不是不好？
在室温下，rapamycin是不是不稳定?
谢谢 |
v*********d
发帖数: 382 | 2 DMSO 比ethanol 好，50mM stock，aliquote，－20
其实还算比较稳定的
【在 M*****n 的大作中提到】
: 这个用DMSO配成多少浓度的stock solution？
: 要不要aliquote 之后freeze at -20?
: 反复冻融是不是不好？
: 在室温下，rapamycin是不是不稳定?
: 谢谢
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M*****n
发帖数: 16729 | 3 多谢.
你们一般用多少浓度的?
文献里面的浓度是300nM
【在 v*********d 的大作中提到】
: DMSO 比ethanol 好，50mM stock，aliquote，－20
: 其实还算比较稳定的
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v*********d
发帖数: 382 | 4 这个要看用途了，300nM好像多用在long term culture 杀细胞。如果autophagy的话，
2uM，要半小时见效可以提高到10uM
【在 M*****n 的大作中提到】
: 多谢.
: 你们一般用多少浓度的?
: 文献里面的浓度是300nM
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M*****n
发帖数: 16729 | 5 thanks a lot.
如果是300nM，培养液多久换一次?
【在 v*********d 的大作中提到】
: 这个要看用途了，300nM好像多用在long term culture 杀细胞。如果autophagy的话，
: 2uM，要半小时见效可以提高到10uM
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D***y
发帖数: 693 | 6 我用20 nM.培养液3天一换
【在 M*****n 的大作中提到】
: thanks a lot.
: 如果是300nM，培养液多久换一次?
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M*****n
发帖数: 16729 | 7 thanks.
【在 D***y 的大作中提到】
: 我用20 nM.培养液3天一换
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s********s
发帖数: 67 | 8 我用来给老鼠打针，用DMSO配成100mg/ml储存液。我们处理细胞用100nm。 |
V***b
发帖数: 3419 | 9 20 nM is more than enough to inhibit TORC1. Stock solution 20 uM in DMSO;
make small aliquote and keep in -80; freeze-thaw cycle does not severely
impair its function, but not recommended.
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: 这个用DMSO配成多少浓度的stock solution？
: 要不要aliquote 之后freeze at -20?
: 反复冻融是不是不好？
: 在室温下，rapamycin是不是不稳定?
: 谢谢
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s********s
发帖数: 67 | 10 高浓度的rapamycin抑制mtorc2原因搞清楚了吗？谢谢!
【在 V***b 的大作中提到】
: 20 nM is more than enough to inhibit TORC1. Stock solution 20 uM in DMSO;
: make small aliquote and keep in -80; freeze-thaw cycle does not severely
: impair its function, but not recommended.
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b******e
发帖数: 3348 | 11 为什么dmso比ethanol好？
【在 v*********d 的大作中提到】
: DMSO 比ethanol 好，50mM stock，aliquote，－20
: 其实还算比较稳定的
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V***b
发帖数: 3419 | 12 The reason that rapamycin inhibits mTorc2 is that long-term treatment with
rapamycin, overnight for example (concentration doesn't matter), inhibits
mTorc2 complex assembly, but rather inhibits its kinase activity directly.
【在 s********s 的大作中提到】
: 高浓度的rapamycin抑制mtorc2原因搞清楚了吗？谢谢!
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