h****k
发帖数: 182 | 1 使用的是tissue, 书上写的是不要超过30mg, 30mg看起来是个3mm的小方块。过量使用
tissue后效果会怎样？另外加了RLT buffer之后RNase还会降解RNA吗？ 书上写的是RLT
buffer含有guanidine thiocyanate. | s******y
发帖数: 28562 | 2 关于用量，没有那么严格的。多一点少一点组织无所谓，关键是你得确认所有组织都被
溶掉了，否则就一方面堵树脂，另外一方面带入过多污染物。
你可以多加点裂解液，多处理一回，然后视需要全部倒进一个小管或者分成几个
管。
RNase一般比较皮实，所以没人能保证RLT buffer一定能灭活，该注意的地方还是要注
意的。
RLT
【在 h****k 的大作中提到】
: 使用的是tissue, 书上写的是不要超过30mg, 30mg看起来是个3mm的小方块。过量使用
: tissue后效果会怎样？另外加了RLT buffer之后RNase还会降解RNA吗？ 书上写的是RLT
: buffer含有guanidine thiocyanate.
| n********k
发帖数: 2818 | 3 more buffer and complete and fast lysis will do it...For a beginner, do
yourself a favor and NEVER try to save on buffer---the key is complete
lysis with enough buffer...then it can last fairly long, as long as it is fully lysed, no worry about RNase until the column step...if in doubt, use
RNAlater...it is fantastic...
RLT
【在 h****k 的大作中提到】
: 使用的是tissue, 书上写的是不要超过30mg, 30mg看起来是个3mm的小方块。过量使用
: tissue后效果会怎样？另外加了RLT buffer之后RNase还会降解RNA吗？ 书上写的是RLT
: buffer含有guanidine thiocyanate.
| c********b
发帖数: 363 | 4 it will reduce the quality and yield of RNA. For beginner, never try to be
greedy. More is not always good.
【在 s******y 的大作中提到】
: 关于用量，没有那么严格的。多一点少一点组织无所谓，关键是你得确认所有组织都被
: 溶掉了，否则就一方面堵树脂，另外一方面带入过多污染物。
: 你可以多加点裂解液，多处理一回，然后视需要全部倒进一个小管或者分成几个
: 管。
: RNase一般比较皮实，所以没人能保证RLT buffer一定能灭活，该注意的地方还是要注
: 意的。
:
: RLT
| h****k
发帖数: 182 | 5 really good suggestions. thanks! |
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