s*****a
发帖数: 1022 | 1 ☆─────────────────────────────────────☆
halcyon (花褪残红青杏小。 燕子飞时，绿水人家绕。) 于 (Tue Oct 27 21:38:35 2009, 美东) 提到:
今天公司培训，觉得有孩子的好像很有必要办will和RLT.回来后和LD商量，领导觉得
一个简单的“爱老虎油will”就够了，没必要RLT。公司这次请的律师比上次好，将的
很清楚，又有针对性。我问了价：initial consultation free. will+RLT $2500-3000
. 印象中“爱老虎油will”好像便宜的多，<$1000的样子。这里的父母们办了哪个？我
知道肯定有人说不办，个人觉得有备无患，就当“咒一咒，十年旺”！
还有这个guardian 的问题,今天听说如果选 over-sea guardian,孩子需要回国。这里
没有亲戚的怎么办哪？LD觉得孩子回国也挺好的，我觉得上了中学以后可能不宜回国吧。
希望大家帮忙讨论一下！
☆─────────────────────────────────────☆
rcf (*_*☆T2的不淡 |
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p****e
发帖数: 3548 | 2 不知对不，欢迎测试
// Type your C++ code and click the "Run Code" button!
// Your code output will be shown on the left.
// Click on the "Show input" button to enter input data to be read
#include
using namespace std;
int findnotsubarray(vector &rlt, vector &temp, int &X, int a[],
int &length, int start)
{
if(start>=length) return 0;
for(int t=0; t<=X; ++t)
{
int i = start;
for(; i
{
if(t==a[i])
{
... 阅读全帖 |
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p****e
发帖数: 3548 | 3 参考了redcrab的，改了一下，再发
class Solution {
public:
vector > fourSum(vector &num, int target) {
// Start typing your C/C++ solution below
// DO NOT write int main() function
int depth = 0;
int size = num.size();
sort(num.begin(), num.end());
vector > rlt;
for(int i = 0; i < size - 3; i++)
{
int itempsum = num[i];
if(itempsum > target/4.) break;
for(int j = i+1; j < size - 2; j... 阅读全帖 |
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o****o
发帖数: 1398 | 4 如果没有准备过，估计很多人面试遇到位运算的题目都会头疼，包括我自己，所以在此
总结一下位运算相关题目吧，从leetcode,careercup还有本版学到的，留个纪念：
1. Toggle 5th-8th bit of a 32bit Integer 这是我自己编的题，不过对于理解XOR操
作有帮助
Ans: a = a ^ 0x000000F0;
2. 交换第i与第j位
这个思路是直接：抠出第i位和第j位，交换之后再置位，可是实现比较麻烦啊，分情况
考虑比较好：
（1）如果第i位和第j位相同，不用换
（2）如果不同，用题1的方法，来个掩码，仅toggle第i位和第j位
Ans:
//Assume i,j start from 0
int exchange(int a, int i, int j) {
if( ((a>>i)&1) != ((a>>j)&1) ) {
a = a ^ ((1<
}
return a;
}
3. Turn off the rightmost 1-bit
Ans: x = x & (x-1)... 阅读全帖 |
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p****e
发帖数: 3548 | 5 string convert(string s, int nRows) {
// Start typing your C/C++ solution below
// DO NOT write int main() function
if(nRows <= 1) return s;
int size = s.length();
if(size <=nRows) return s;
int direction = 1;
int row = 0;
int period = 2*nRows-2;
string * ret = new string[nRows];
for(int i = 0; i < size; i++)
{
ret[row].push_back(s[i]);
int modi = i%period;
if(modi =... 阅读全帖 |
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W***u
发帖数: 81 | 6 用一个stack 扫一遍， 把不valid的 符号存里面，最后再筛一次。 O(n) + O(n)
我理解对了么？
String balance(String par) {
if (par.length() < 1)
return null;
String rlt = "";
Stack upSt = new Stack();
for (int i = 0; i < par.length(); i++) {
char c = par.charAt(i);
if (c == '(' || c == ')') {
if (upSt.isEmpty()) {
upSt.push(i);
} else {
char topChar = par.charAt(upSt.peek()... 阅读全帖 |
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k**********s
发帖数: 6409 | 8 话说这个冬天主要靠Rat-L-Trap，一直不停地上鱼。可是到了3月份的时候，草都死掉
了，但温度还是在50度以下，RLT就不好使了。
先是想试试到处都说好的Red Eye Shad，不同大小的买了几个，结果没有一个走正的。
网上搜搜“go true”、“run true”，发现这问题早就存在而且普遍存在。KVD在N年
前的采访中承认了这个问题，说厂家会改进，看来N年过后还是没有任何改进。
也试过其它的一些被吹上天的lipless，比如One Knocker，都没效果。
在Walmart看到Jointed Shad Rap，感觉应该适合现在的冷水。不大，才2寸长，也不像
一般的crankbait那样宽。潜水深，6-13尺。重量合适，1/4盎司，能甩得比较远。不浮
也不沉(实际是很缓慢地上浮），可以像suspending jerkbait那样慢慢地走甚至停住。
尾巴很灵活，很慢地收线也有很好的action，这点是jerkbait、lipless和普通
crankbait都无法企及的。
先是试了红色的虾图案，因为我们这确实有红红的草虾。但是试了很多地方、很多次都
没效果。都准备放弃了，结果... 阅读全帖 |
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k**********s
发帖数: 6409 | 9 我也很想试试2 3/4的，能甩的更远，可能能搞到更大更多，但是店子里没有。
我感觉到，如果当地店子里没有的，可能在本地区不怎么好使。饵这东西，好使的话，
人们肯定会再买，就会卖的很好。这些店子都是卖了几十年了，继续卖的应该是好使的
；不再卖的，可能不好使。所以我现在尽量买店子里有的饵，不到网上订；订了几次，
确实不好使都退回去了。
另外论坛和评阅里有不少人提到，最好使的是2寸。
我在想再整一个1寸半的，看能不能把Crappie给整上来。但是甩的更不远了，可能需要
加一个铅坠（离饵一、两尺远）。
在Youtube里面找到了几个视频，难得，注意到不少上钩后又跑掉的。我现在还没有跑
掉一个，RLT也从来没跑掉过。可能跟我用的钩子有关系，我一律都换上6#的，钩尖不
是直的，而是弯曲的，模仿老鹰爪子的那种，抓上了就不容易跑掉。这钩子3个爪里有
一个比较遁，而且太往里弯，我都用钳子往外掰一点，让它和其它两个爪看齐。可惜
Walmart最近不再卖这个钩子了，所以我下次试试直钩尖的。
我们这绝大多数的人是钓trout，其次是salmon，钓其它鱼的非常少，所以店子里的饵
主要都是针对trout和sal... 阅读全帖 |
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k**********s
发帖数: 6409 | 10 绝不止那几条，至少打2015年起就是这样的了，冬天草还没死的时候就只认RLT，偶尔
也咬senko，其它的饵我和我的朋友冬天都试过无效。这是一个不小的湖，我们州的大
嘴记录就是出自这里。只是没有船，在岸边被局限住了，不过远处的鱼会陆续过来填补
，所以永远都不会只是那几条而已。
今天先是往左边甩了3竿没动静，于是改往右边甩，一竿下去那头就立马一沉，上来了
这一条，3磅的样子，非常的健康状硕，没有被钓过的痕迹。
然后就下雨了，回家的路上雨停了，刚好经过另一个塘子，就顺便试试。甩了几竿，没
效果。决定换jerking的收法，没抖几下就觉得有小鱼咬钩的那种动静，set hook，还
真的是条小鱼，trout。想起很多用户说，用这个饵你永远不知道下一个上来的是啥，
还真是。这么小的鱼都爱它啊！
今天用的是前天新买的一个，也是perch，我们这没有yellow perch的卖。看来这个芬
兰设计、爱沙尼亚组装的东西品控不错，个个好样的，走起来都正正的。我总共就两个
，RLT和Jerkbait等也都是两个，一个备份。
今天钩子是直钩尖的，钩的很牢。看来跑鱼的主要原因还是那些人用的竿太硬，我用硬
竿的... 阅读全帖 |
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s********l
发帖数: 334 | 11 总结一下,虽然还没查出原因,希望能对别人有点用处.
刚开始发现狗不对,担心是bloat,后来发现是嘴巴疼,右眼下面肿.于是约兽医.几天后见
兽医时,眼肿已经快看不出来.因为疼,狗不肯张大嘴,所以上麻药,嘴巴内未见异常,同时
X光显示牙齿没问题.给了点止疼药,被要求回家观察.
回家后发现右眼眼白充血,所以没给吃止疼药,第二天重返诊所. 兽医怀疑是
retrobulbar abscess. 同时检查眼压,两眼略有不同.兽医很担心,要求立刻找
specalist做CT检查.
回家后找Dr. Google,发现症状确实和retrobulbar abscess一模一样, 嘴巴疼,眼睛充
血, 开始紧张.
specalist的医院其实是个大学,本星期仪器全book了,所以直接带狗进了emergency.
specalist其实是个漂亮的Dr. Rotating Intern.笑容满面的污蔑我的兽医水平低下(混
过职场的对美国人笑眯眯的说人坏话的习惯应该不陌生). Dr. Rotating Intern的
point是,如果是retrobulbar abscess, 那么X光就应该看见异物.没看见要... 阅读全帖 |
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c********d
发帖数: 75 | 12 RLT里头记得要有fresh 2-ME，sorting过程中RLT用4度水浴,sorting完了如果不是马上提
rna，转移过程中管子要放dry ice上然后-80度保存。提rna时快速室温水浴解冻，注意
观察冰块一
旦快融尽，迅速转移到冰上操作。提出的rna取两三个微升做质检，剩下的就赶紧冻起
来，运输过程也
都保证冰冻状态。总之尽量保证全过程的低温和快速。
用RNAlater对低温的要求不高，就是多一步离心，会有一些细胞的损失。两万细胞剩下
的应该也够做
一个chip了。 |
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h****k
发帖数: 182 | 13 使用的是tissue, 书上写的是不要超过30mg, 30mg看起来是个3mm的小方块。过量使用
tissue后效果会怎样？另外加了RLT buffer之后RNase还会降解RNA吗？ 书上写的是RLT
buffer含有guanidine thiocyanate. |
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s******y
发帖数: 28562 | 14 关于用量，没有那么严格的。多一点少一点组织无所谓，关键是你得确认所有组织都被
溶掉了，否则就一方面堵树脂，另外一方面带入过多污染物。
你可以多加点裂解液，多处理一回，然后视需要全部倒进一个小管或者分成几个
管。
RNase一般比较皮实，所以没人能保证RLT buffer一定能灭活，该注意的地方还是要注
意的。
RLT |
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w*********g
发帖数: 30882 | 15 你绝对想不到 看德国媒体怎样用镜头嘲讽台湾和香港
文章来源: 凯迪 于 2012-04-27 11:25:56 - 新闻取自各大新闻媒体，新闻内容并不代
表本网立场！
打印本新闻 (被阅读 26670 次)
德国电视中的台湾和香港
身在异乡，不自觉地会对故乡多加关注，这种关注甚至已经扩大到了亚洲区域。可惜因
为德国的电视涉及中国大陆的内容少之又少，加之以人权和民主为题材的负面新闻为主
，所以想看到一些不同的内容真的不容易。
最近偶然间从两档不同的真人秀节目中看到涉及台湾和香港的部分，颇有感触，于是便
想把感想同大家一起分享。
那套关于台湾的节目，以“半纪录片”的形式展开，说它是“半纪录片”，因为有太多
摆拍的痕迹，显得太做作，和太具引导性。故事讲的是一个德国女孩如何在台湾开始自
己的实习和工作生涯的。除了讲述主人公本身的故事，还对他们眼中的台湾进行了描述。
片中着重强调了两个场景。第一个是，台湾的摩托车，也就是所谓的机车，在低矮的楼
群和杂乱的街道中横冲直撞、左右穿插。女孩最后的结论是，她没有勇气在台湾开车
第二个场景，她的德国男老板带她去台湾的夜市。第一个动作不出我所料：拉长镜头，
... 阅读全帖 |
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S*********g
发帖数: 24893 | 16 【 以下文字转载自 Stock 讨论区 】
发信人: StephenKing (金博士), 信区: Stock
标 题: 市面上流通1358种电子货币，包括ByteCoin
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Dec 15 00:59:47 2017, 美东)
# Name Symbol Market Cap Price Circulating Supply Volume (
24h) % 1h % 24h % 7d
1
Bitcoin BTC $290,617,804,480 $17,358.40 16,742,200 $15,
825,500,000 -0.36% 5.62% 3.15%
2
Ethereum ETH $63,827,563,522 $662.47 96,348,146 $3,723,
910,000 -0.48% -10.50% 52.62%
3
Bitc... 阅读全帖 |
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M****J
发帖数: 2908 | 17 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: wayofflying (小破熊), 信区: Military
标 题: “民主”了别人就把你当盘菜？来看湾湾和轰孔的杯具
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Apr 30 08:23:49 2012, 美东)
你绝对想不到 看德国媒体怎样用镜头嘲讽台湾和香港
文章来源: 凯迪 于 2012-04-27 11:25:56 - 新闻取自各大新闻媒体，新闻内容并不代
表本网立场！
打印本新闻 (被阅读 26670 次)
德国电视中的台湾和香港
身在异乡，不自觉地会对故乡多加关注，这种关注甚至已经扩大到了亚洲区域。可惜因
为德国的电视涉及中国大陆的内容少之又少，加之以人权和民主为题材的负面新闻为主
，所以想看到一些不同的内容真的不容易。
最近偶然间从两档不同的真人秀节目中看到涉及台湾和香港的部分，颇有感触，于是便
想把感想同大家一起分享。
那套关于台湾的节目，以“半纪录片”的形式展开，说它是“半纪录片”，因为有太多
摆拍的痕迹，显得太做作，和太具引导性。故事讲的是一个德国女孩如何在台湾开始自
己的实习和工作生涯的。除了讲述主人... 阅读全帖 |
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l*****a
发帖数: 14598 | 18 rlt += ret[i];
这东西放在循环中，好像效率很差得样子 |
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S*********g
发帖数: 24893 | 19 【 以下文字转载自 Stock 讨论区 】
发信人: StephenKing (金博士), 信区: Stock
标 题: 市面上流通1358种电子货币，包括ByteCoin
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Dec 15 00:59:47 2017, 美东)
# Name Symbol Market Cap Price Circulating Supply Volume (
24h) % 1h % 24h % 7d
1
Bitcoin BTC $290,617,804,480 $17,358.40 16,742,200 $15,
825,500,000 -0.36% 5.62% 3.15%
2
Ethereum ETH $63,827,563,522 $662.47 96,348,146 $3,723,
910,000 -0.48% -10.50% 52.62%
3
Bitc... 阅读全帖 |
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S*********g
发帖数: 24893 | 21 # Name Symbol Market Cap Price Circulating Supply Volume (
24h) % 1h % 24h % 7d
1
Bitcoin BTC $290,617,804,480 $17,358.40 16,742,200 $15,
825,500,000 -0.36% 5.62% 3.15%
2
Ethereum ETH $63,827,563,522 $662.47 96,348,146 $3,723,
910,000 -0.48% -10.50% 52.62%
3
Bitcoin Cash BCH $29,779,262,625 $1,766.66 16,856,250 $2
,532,880,000 -1.05% -5.14% 21.33%
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Ripple ... 阅读全帖 |
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O******e
发帖数: 2834 | 22 请教可真不敢当；我才钓几天鱼，不要被大家笑话才好。我就给老巴斯汇报下去年带鱼
的经过：
刚开始，用小mullet，现打；刚开始挂嘴，后来发现带鱼很凶，直接攻击小鱼内脏，经
常是一口把bait咬成两端，就开始挂背鳍下。
期间还用过软饵，例如Zoom® Soft Plastic Baits - Super Fluke；可惜脱钩很
厉害，lure都被咬断还挂不上。
某次夜钓，某位“渔神”，专用spoon，往光暗的交界处扔，效果很好；当时情况下要
比bait有效。
最后一次，是某天夜里，刮风下雨，我用Rat-L-Trap，绿背，红眼，银色肚子，非常有
效。不过当时是9月份好像。
今年我准备了spoon， RLT，挨个试，哈哈 |
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k**********s
发帖数: 6409 | 24 我用RLT成功的都是在某一个湖边，清辙见底。水冷又混的地方，我还没钓着过一次，
各种饵都试遍了。 |
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k**********s
发帖数: 6409 | 25 水那么冷又浅，不skunked已经是非常不容易了，不信你下次先试试RLT或别的饵，多半
没戏。然后换JSR，多半能上一条，不过也就一条。除非你是在有些州比如明尼苏达、
佛罗里达，一条接一条地上大嘴是不可能的事。我们这一天能搞到一条就烧高香了，
trout、crappie、bluegill和pike才能有批量。比如我昨天在一个新塘子意外碰到
trout，1小时咬了10多次的钩，可惜带的都是钓大嘴的大饵，除了一条，其它的都没咬
住。 |
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c*********r
发帖数: 1312 | 27 好像Qiagen的RNA提取的试剂盒就可以，隐约记得说明书上有说把RNA binding之后的溶
液可以留着做蛋白提取。
Appendix F: Acetone Precipitation of Protein from Buffer RLT Lysates 72
http://www.google.com/url?sa=t&source=web&cd=1&sqi=2&ved=0CBMQF
不过“The precipitated, denatured protein is suitable for applications such
as SDS-PAGE, western blotting, and 2D gel electrophoresis.”不知道是否时候MS
。但PAGE之后还是可以MS的吧。 |
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T**********r
发帖数: 287 | 28 从组织里分离细胞，之后FACS，直接sort到RLT裂解液里（from Qiagen RNeasy plus
mini kit),
获得cell 数量约20000，之后用RNeasy kit提取RNA，获得的RNA送去gene-profiling,
总是说质量
不好。
求有经验的同学给些建议，感激不尽。 |
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n********k
发帖数: 2818 | 29 more buffer and complete and fast lysis will do it...For a beginner, do
yourself a favor and NEVER try to save on buffer---the key is complete
lysis with enough buffer...then it can last fairly long, as long as it is fully lysed, no worry about RNase until the column step...if in doubt, use
RNAlater...it is fantastic...
RLT |
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o*****a
发帖数: 2335 | 30 230nm的问题据说是RLT buffer没弄干净，网上的经验是RPE洗的时候把柱子来回颠倒几
次，连lid都要洗到，还有除RPE的时候离心两次，第二次离心时把柱子转个方向 |
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z**********8
发帖数: 766 | 31 谢谢各位回复！
问过我们的facility，没有MagNA，老板不可能现在去买 ：（
细胞离心后的沉淀已经冻存在-80，当时没有加lysis buffer或RNAlater，现在只能抽
提RNA前立即放在干冰上加RLT buffer。
有人有qiagen kit的经验吗？是不是用RNAeasy只抽RNA会比抽DNA和RNA更好？ |
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s******y
发帖数: 28562 | 33 Polysome purification and fractionation
(Based on Davies & Abe, 1995, Methods in Cell Biology, Vol 50, Chapter 15)
1. Prepare 4.6ml 15-60% sucrose gradients in 5ml polyallomer tubes (Beckman
#326819) by
pipetting 2.3ml of 60% sucrose in buffer B followed by 2.3ml of 15% sucrose
in buffer B
(slowly, drop by drop, against the wall). Cap the tubes with rubber stoppers
and lay tubes
horizontally for 3h @RT for sucrose to diffuse (or for 2h if making 10-40%
gradient). Place the
tubes again vertically... 阅读全帖 |
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r*m
发帖数: 16380 | 34 组织切出来后直接扔进液氮，然后加buffer RLT homogenize。。。
要sorting的话，那个过程无论如何对基因表达有影响，测到的是细胞在sorting这种非
自然的环境下的stress response。。。 |
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