由买买提看人间百态

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全部话题 - 话题: bsa
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s****r
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1
来自主题: GunsAndGears版 - 赞一下BSA 的sweet 22 3-9x40 的镜子
差点下单了。。。
又看了一眼, 重量19.4盎司。。。 太沉了:(
C*******r
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2
来自主题: GunsAndGears版 - 赞一下BSA 的sweet 22 3-9x40 的镜子
好的镜子都沉,Nightforce都是30oz以上。当然沉的不一定都好。
d*******s
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3
来自主题: GunsAndGears版 - 赞一下BSA 的sweet 22 3-9x40 的镜子
好像simmons都不是很重

好的镜子都沉,Nightforce都是30oz以上。当然沉的不一定都好。
★ Sent from iPhone App: iReader Mitbbs Lite 7.56
d*******s
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4
来自主题: GunsAndGears版 - 新手求推荐 Ruger 10/22 镜子和其它
你可以看看walmart或者你们当地有没有什么sports店
我就是用的walmart那个tasco的3-9x40镜子,三十多刀。清晰度似乎没有simmons好,
但亮度还算不错,室内靶场也能看得清楚。
记得政委曾经推荐过BSA的那个sweet镜子,等着看其他人的评价呢。
反正simmons基本算是公认的物超所值的,amazon有个simmons的3-9x32mm镜子,好像也
还行。
Tasco我用的也还不错,还有bushnell的banner评价也挺好。
.22没什么后坐力,所以除了气枪镜子(我怀疑那个也能用)应该都可以。.22设计的话
一般分划都是根据.22优化过的,像那个一百多的带侧调焦,而且有根据不同重量弹头
设计的turret
C*******r
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5
来自主题: GunsAndGears版 - .22在50米(55码)的精确度问题
俺自从给Mossberg 151K (1952年产,没有序列号!)装了BSA的Sweet 22镜子以后,这
个周末终于有时间又去靶场试了一次,用的是Federal 550发装bulk的.22弹药,镀铜铅
弹头,36格林。
俺在55码射了80发,试试精度,用的是哪种步枪校准纸靶。发现最好的一组5发打在一
个一寸的方块内,但是大多数时候,会有一两发差的很远,偏到瞄准的2寸以外去了。
原因可能有:
1. 控制扳机水平差。这种60年的老枪,扳机都比较重,所以控制扳机可能不好。
2. Federal bulk ammo的精度一般,这个也有可能。这种弹药本身不是打精度用的。
3. 受风的影响。毕竟是野外,而且昨天降温,风有时比较大。
俺对.22步枪射击不太在行,所以请教本版大佬们,.22在50米受风的影响大吗?要是想
测精度,用什么样的,哪个牌子的.22弹药比较好?
还是要赞扬一下Federal的bulk ammo,用过上千发,只出现过一次不能击发,而且
Mossberg 151K
这个老枪很reliable,从没卡过一次弹。
C*******r
发帖数: 10345
6
来自主题: GunsAndGears版 - .22在50米(55码)的精确度问题
俺自从给Mossberg 151K (1952年产,没有序列号!)装了BSA的Sweet 22镜子以后,这
个周末终于有时间又去靶场试了一次,用的是Federal 550发装bulk的.22弹药,镀铜铅
弹头,36格林。
俺在55码射了80发,试试精度,用的是哪种步枪校准纸靶。发现最好的一组5发打在一
个一寸的方块内,但是大多数时候,会有一两发差的很远,偏到瞄准的2寸以外去了。
原因可能有:
1. 控制扳机水平差。这种60年的老枪,扳机都比较重,所以控制扳机可能不好。
2. Federal bulk ammo的精度一般,这个也有可能。这种弹药本身不是打精度用的。
3. 受风的影响。毕竟是野外,而且昨天降温,风有时比较大。
俺对.22步枪射击不太在行,所以请教本版大佬们,.22在50米受风的影响大吗?要是想
测精度,用什么样的,哪个牌子的.22弹药比较好?
还是要赞扬一下Federal的bulk ammo,用过上千发,只出现过一次不能击发,而且
Mossberg 151K
这个老枪很reliable,从没卡过一次弹。
D**N
发帖数: 1440
p*x
发帖数: 961
8
来自主题: GunsAndGears版 - CZ 452 到手试玩
我拿到的BSA see-thru更像是这个图上的,跟amazon一个review里写的差不多。T形see
-thru,螺丝数目也一样。其中一个ring底部有孔,刚刚查了一下,据说是vertical
scope(recoil) stop pin.哪位给科普一下,这东西有啥用处?
b******o
发帖数: 5644
9
来自主题: GunsAndGears版 - 请教老大,Sig Sauer的红点怎么样?
模样上看和BSA,bushnell这类的差不多。镜子一下半下没事,不急,好的铁瞄也值小
两百呢,
f*********r
发帖数: 234
10
来自主题: GunsAndGears版 - [BSSD]整天打猎,还有完没完!!!
检讨一下我自己,最近老琢磨我的枪和松鼠,花了很多心思。但是,家里的事还是要做
的。前两天又花$41买了一个BSA scope ring for laser, which is on the way.
消消气。让你老公向我看齐。
w*****o
发帖数: 1806
11
来自主题: GunsAndGears版 - 求推荐适合AR的镜子和镜环
记得以前hertzer老大似乎推荐过叫sweet 22的?那这个sweet 223怎么样?
http://swfa.com/BSA-Sweet-223-Riflescopes-C49.aspx
6-18 VS 3-12哪个好呢?
d*******s
发帖数: 15155
12
来自主题: GunsAndGears版 - 给MP5订了一个4x镜子
HK的订单被cancel了,就剩下GSG了。
给GSG的MP5订了一个4x的镜子,BSA的,今天到了。
http://www.amazon.com/gp/product/B002KCZ61O/ref=oh_details_o04_
看评价很好,定了一个今天到了。做工还不错,全金属,外置的旋钮调整很方便。定倍
镜的亮度,即使便宜货也很亮啊。而且里面带了一个SKS的mount和一个AR提把的mount
,虽然我用不到。
不好的地方就是背光的时候目镜会反光(4 inch的eye relief)
d*******s
发帖数: 15155
13
来自主题: GunsAndGears版 - 给MP5订了一个4x镜子
bsa的amazon评价不错,其它的差评都比较多
d*******s
发帖数: 15155
14
来自主题: GunsAndGears版 - 56半作业图
不错,镜子是BSA那个4x吧?我刚买一个,做工很好。
PS,有一张帅锅还犹抱琵琶半遮面啊,只露半张脸,lol
j**b
发帖数: 29
15
来自主题: GunsAndGears版 - 新手上来冒个泡
谢谢!那个我查了一下发现bsa sweet 22好像不错,有人用吗,重不重呢?
r***6
发帖数: 401
16
来自主题: GunsAndGears版 - New ruger 10/22 takedown.
With BSA 4x30 scope
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 7.8
H****r
发帖数: 16240
17
来自主题: GunsAndGears版 - 还看到一个.22镜子可惜现在找不到了
BSA的玻璃、机械等等都是很差的。
H****r
发帖数: 16240
18
来自主题: GunsAndGears版 - 还看到一个.22镜子可惜现在找不到了
一分价钱一分货么
百元以下镜子BSA sweet 22还是不错的
d*******s
发帖数: 15155
19
来自主题: GunsAndGears版 - 新枪托不错
换了HK方式的顶轨(原配机匣盖顶的不牢固太晃了),调好以后hold zero很好,BSA
4x镜子也对得起价格了。
另外之前Amazon进的GSG的伸缩枪托,结果晃得厉害,因为backplate是塑料的,即使伸
缩臂是金属也不好用。果断退了
后来在hkspecialiststore看到了这个,GSG自己做的第二代,除了抵肩的pad外全是金
属。昨天试射以后,很不错。
http://www.hkspecialiststore.com/product_detail.php?Category=30
最好的也是最小的改动就是push pin了。以前的两个螺丝对拧狠蛋疼。换了一套HK的
push pin,从外观到拆卸方便都好了很多
精度方面,跟10/22差不多。散布略大不过应该是4x镜子的原因,10/22上是3-9x。我打
10/22铁瞄的散步更大
h*******e
发帖数: 879
20
来自主题: GunsAndGears版 - 新型瞄具:Laser Holographic Sight
网上看到06年的资料:
http://119.97.200.244/huangpi/showdoc.asp?docid=351&classname=%
“公司是世界最大的民用枪瞄准镜生产企业,为世界三大枪瞄经营商Bushnell公司、
Meade公司、BSA公司等提供高、中、低档300多个品种的民用枪瞄。”
核心模组厂商Aotk的网站如下:
http://www.aotk.com/
Chrome浏览器竟说这网站有恶意软件。但从IE打开又完全没问题。
O**e
发帖数: 246
21
来自主题: GunsAndGears版 - CZ452 trainer 镜环选择
我用的是BSA rings加sweet 22 scope. 唯一不好之处是40mm的物镜会把铁瞄的视野遮
住。32mm 物镜应该好些。如果不打算用铁瞄就没什么纠结的了。还有套高的ring -
BKL 257据说不错
k**0
发帖数: 19737
22
说得不错,上次打枪的时候惊讶地发现nikon还没有我那50块的BSA镜子亮
H*V
发帖数: 2770
23
来自主题: GunsAndGears版 - 买支气步枪联系射击如何,.177 or .22?
谢谢,就入一支 Ruger 10/22 semi rimfire rifle with 3-9x40 BSA scope combo at
cabelas, currently on sale for $269.99.
弹夹 Ruger BX-25 magzine-two pack for $39.99
话说子弹可以用 .223的吧

选择
T**r
发帖数: 7016
24
来自主题: GunsAndGears版 - 求推荐AR15 Scope
看了一下VX-2的REVIEW,好像和VX1没有什么巨大的区别,透光率从vx1 92%增加到vx2
的94%,
Nikon的prostaff宣称的透光98%,:D,我们是不是都被忽悠了。
网上另一个说法是,除了US Optics还有极少数的一两个厂外,几乎所有市面上的镜子
的镜片都来自说天朝极其周边国家,贵一点的600+镜片来自日本。。。也就是说,
leupold/nikon/vortex的片子可能和UTG,BSA,TABSCO的片子来自同一个工厂,做的
好的卖给刘婆,质量有小问题的卖给tabsco。
y******n
发帖数: 8667
25
来自主题: Soccer版 - Bsa现在还好啊
比以前倒脚促睡眠好多了。除了那个常常满地打滚的。
f*******j
发帖数: 185
26
来自主题: Travel版 - 南美交通问题
both rio and bsas worth more than 2 days. san paulo can be skipped
F*********k
发帖数: 11739
27
这个时候是开发孩子创造力塑造性格的好时机,学习固然重要但是不是唯一,我身边就有abc小学学习很差,读了个一般般大学gpa不到3的,但是人家现在在大公司做senior BSA,年薪20万,同样一个abc从小培养,琴棋书画各种球类样样好,拿了奖学金去全美前五大大学,毕业在一个小startup做事的。同是abc,性格思维创造力都差很多。所以啊,培养是王道,但是要看怎么养。
不过我未婚没孩,意见都是看身边的人的想法,可能真的为人父母想法也会有变,所以仅供参考吧。
f*********r
发帖数: 175
28
这两个都很极端啊,我的孩子,估计中庸的类型吧

就有abc小学学习很差,读了个一般般大学gpa不到3的,但是人家现在在大公司做
senior BSA,年薪20万,同样一个abc从小培养,琴棋书画各种球类样样好,拿了奖学
金去全美前五大大学,毕业在一个小startup做事的。同是abc,性格思维创造力都差很
多。所以啊,培养是王道,但是要看怎么养。
以仅供参考吧。
l****z
发帖数: 29846
29
来自主题: WaterWorld版 - Boy Scouts Reaffirm Ban on Homosexuality
By DAVID CRARY, Associated Press
July 18, 2012
NEW YORK (AP) - After a confidential two-year review, the Boy Scouts of
America on Tuesday emphatically reaffirmed its policy of excluding gays,
angering critics who hoped that relentless protest campaigns might lead to
change.
The Scouts cited support from parents as a key reason for keeping the policy
and expressed hope that the prolonged debate over it might now subside.
Bitter reactions from gay-rights activists suggested that result was
unlikel... 阅读全帖
e***n
发帖数: 3441
30
http://health.people.com.cn/GB/26466/70809/4802066.html
酸奶比牛奶好,但最好的是豆浆,尤其对于中国人!
牛奶是“上帝”给小牛准备的,连成年的牛也不能很好吸收,何况成人呢。成人连
人奶都吸收不好,何况牛奶呢!事实上,人类是唯一长大以后仍然喝奶的动物。
牛奶中含有乳糖,需要乳糖酶分解吸收。而世界上超过三分之二的人缺乏乳糖酶,
我们中国人更有80%以上缺乏乳糖酶。地球上只有居住在阿尔卑斯山以北的荷兰人、丹
麦人和瑞典人等民族有充足的乳糖酶,因为这个地区的人缺乏日照,因而缺乏维生素D
,影响钙的吸收。为了避免软骨病,他们的祖先通过喝牛奶,用乳糖代替维生素D来吸
收奶中的钙。中国有充足的光照,更有富含钙的大豆和深绿色多叶蔬菜,所以我们的祖
先没有通过喝牛奶获得钙的压力。正因为如此,中国(汉族)传统食谱中几乎没有乳制
品。
把牛奶发酵制成酸奶,部分乳糖分解成半乳糖或葡萄糖,所以酸奶的血糖指数(36
)比牛奶的(27)高。但是酸奶的吸收率比牛奶高,尤其对于那些缺乏乳糖酶的人。和
牛奶相比,酸奶中的钙没有减少,另外多了乳酸菌。乳酸菌既可以帮助奶中... 阅读全帖
e***n
发帖数: 3441
31
来自主题: WaterWorld版 - 中国人为什么不能喝牛奶(z)
http://health.people.com.cn/GB/26466/70809/4802066.html
酸奶比牛奶好,但最好的是豆浆,尤其对于中国人!
牛奶是“上帝”给小牛准备的,连成年的牛也不能很好吸收,何况成人呢。成人连
人奶都吸收不好,何况牛奶呢!事实上,人类是唯一长大以后仍然喝奶的动物。
牛奶中含有乳糖,需要乳糖酶分解吸收。而世界上超过三分之二的人缺乏乳糖酶,
我们中国人更有80%以上缺乏乳糖酶。地球上只有居住在阿尔卑斯山以北的荷兰人、丹
麦人和瑞典人等民族有充足的乳糖酶,因为这个地区的人缺乏日照,因而缺乏维生素D
,影响钙的吸收。为了避免软骨病,他们的祖先通过喝牛奶,用乳糖代替维生素D来吸
收奶中的钙。中国有充足的光照,更有富含钙的大豆和深绿色多叶蔬菜,所以我们的祖
先没有通过喝牛奶获得钙的压力。正因为如此,中国(汉族)传统食谱中几乎没有乳制
品。
把牛奶发酵制成酸奶,部分乳糖分解成半乳糖或葡萄糖,所以酸奶的血糖指数(36
)比牛奶的(27)高。但是酸奶的吸收率比牛奶高,尤其对于那些缺乏乳糖酶的人。和
牛奶相比,酸奶中的钙没有减少,另外多了乳酸菌。乳酸菌既可以帮助奶中... 阅读全帖
E*****m
发帖数: 25615
32
来自主题: TrustInJesus版 - 【原譯】給基督教國家的一封信 (二)
http://en.wikipedia.org/wiki/File:Bsa-religion-question.svg
看這個, 歐洲基督教已經過了死亡交叉, 一路向下。
也許可以做個 linear regression 看看哪一年會絕跡。
不過也沒什麼好高興, 更邪惡的伊斯蘭還在上升呢。
E*****m
发帖数: 25615
33
来自主题: TrustInJesus版 - 卡森《宽容的不宽容》

BSA 的主要問題就是又要政府補助,又要歧視部分納稅人。
s****r
发帖数: 160
34
来自主题: HUST版 - 鱼眼阿根廷
昨天凌晨的时候飞机飞过哥伦比亚,越过了赤道,我终于又回到了北半球。又听到了英
语,回到了高效的美国机场。10天在阿根廷的日子经历了焦虑,不知所措,想家,绝望
,最后竟又是习惯。我在机场等飞机的时候在日记上写到,“南美这片土地,又重新神
秘起来。。。”
(一)我来了。
小时候看唐师曾,其中一节是采访卡扎菲的手记,我一直记得他在结尾中写道,他躺在
卡扎菲专机的沙发床上,耳边回荡着红袍恺撒的一句名言,“我来了,我看到了,我赢
了。”
来到阿根廷首都布宜诺斯艾利斯,第一个见到的是Hostel派来接我的司机。当初我为了
定便宜机票,飞机是辗转智利首都圣地亚哥机场,然后再转乘阿根廷航空到Buenos
Aires的。省钱的结果是无法和旅友们同时到达,她俩只好单独给我定了一个司机,然
后在旅馆会合。我刚出海关,就看到一个阿根廷光头手里拿着一张写着中国人名字的纸
,但是那张纸上却不是我的名字,而是约好在BsAs见面的Rao。我上前去攀谈,那老头
却连一个字的英语也不会讲,我费了九牛二虎之力,找了两个蹩脚翻译,才终于让他明
白他要接的是我,而Rao已经在旅馆等我了。
话说有无穷多的游记说南美人热情奔放,我
B******u
发帖数: 23763
35
一直以为做到不错的,
结果,汇报上去,
说很差。
上个周五说是买的也就100mg磁珠链上400ug的BSA,
俺兴冲冲的告诉他,
我的链上了150-200ug了,
结果,人家告诉俺,买的是20mg就链上1mg的。
nnd.
d**********u
发帖数: 4124
36
师兄呀,上司对员工的工作不满意正常啦

一直以为做到不错的,
结果,汇报上去,
说很差。
上个周五说是买的也就100mg磁珠链上400ug的BSA,
俺兴冲冲的告诉他,
我的链上了150-200ug了,
结果,人家告诉俺,买的是20mg就链上1mg的。
nnd.
t****7
发帖数: 471
37
在学校用bt下matlab,然后学校发来了邮件要和我面谈,错大了...
The nature of the complaint is that the computer you used to connect to the
VPN
appeared to be providing/serving copyrighted material. The copyrighted
material
was
Mathworks.Matlab.R2008a.UNIX.DVD.ISO-TBE
as reported by BSA.
请问这种情况应该怎么处理呢,这几天学校会有专人联系我,该怎么说好呢? 大家有没有类似经历或者听说过类似案例阿
,多谢指教~
f********e
发帖数: 33
38
来自主题: CS版 - Sr. BSA position in Richmond, VA
Post for a friend's company:
Position Description: Sr. Business Systems Analyst
Company: Youncl Corp.
Location: Richmond, VA
Posted on: Tue, Feb.9, 2010
Position type: Full time
Work permit: We sponsor H1B VISA
Contact: A*******[email protected]
Details:
l*s
发帖数: 783
39
这个不应该是马公的问题。应该是BSA的问题。 over
z*******3
发帖数: 13709
40
idc的数据可能算是拿钱发帖的一个典型了
wikipedia上都专门有一段写这个问题
链接直接点进去就可以看到了
看得懂英语的话,自己看
http://en.wikipedia.org/wiki/International_Data_Corporation
Criticism [edit]
Various IDC reports and forecasts were criticized for deficiencies in
methodology. Notable cases include:
Yearly joint BSA/IDC studies on software piracy [3][4][5]
IDC comparison of TCO of Linux vs Windows 2000 [6]
IDC forecasts on Itanium sales [7]
IDC forecasts of the marketshare of Windows Phone.[8]
http://www.theregister.co.uk/2002/12/03/windows_co... 阅读全帖
t****7
发帖数: 471
41
来自主题: Software版 - [求助]在学校用bt被通知了 ...
在学校用bt下matlab,然后学校发来了邮件要和我面谈,错大了...
The nature of the complaint is that the computer you used to connect to the
VPN
appeared to be providing/serving copyrighted material. The copyrighted
material
was
Mathworks.Matlab.R2008a.UNIX.DVD.ISO-TBE
as reported by BSA.
请问这种情况应该怎么处理呢,这几天学校会有专人联系我,该怎么说好呢? 大家有没有
类似经历或者听说过类似案例阿
,多谢指教~
s*******l
发帖数: 9
42
I got BSA in 2006, and then worked as a staff accountant(bookkeeper) in a
company for about 1 year, and I got MSA in this year. is this ok? thanks.

friend
L***M
发帖数: 396
43
个人认为如果没有在美国读过会计学位,或者读过相应会计课程,单读个TAX不一定是最
好的选择.考CPA的条件也很难满足,MS TAX是给会计本科想做TAX的人读MASTER的一个很
好的选择,因为BSA/MSA基本读的东西差不多,没什么人本科读会计,硕士还读会计,要么同一学校连读,省了GMAT,又赚了150学分....有了会计背景读个TAX MASTER那对进FIRM
做TAX来说是锦上添花.但没有会计背景的人读个TAX,出来选择范围就很小,如果FIRM不
成,那么能从哪里开始呢? 进CORPORATE做TAX一般不会要FRESH GRADUATE,因为本来CORPORATE里比起ACCOUNTING来做TAX的人很少很少...原来学LAW会对读TAX可能有些帮助,但中国的LAW还是很大不一样的吧,不知道具体能有什么帮助.
n*******e
发帖数: 27
44
来自主题: Biology版 - Re: help on ligation problem!
use NEBuffer2+BSA, digest enough amount of PCR product O/N. i do not know
if you add some nucleotides for buffer purpose. if it is for mutagenesis,
or expression of certain gene, maybe difficult. however, check with BioLab
for Hind3, even 12bp sequence (6bp as buffer flanking) could not be completely
digested O/N. for Xho, it is better, about 75%. so the 1st thing you should
do is to check your design, order new primers if necessary. they are so
cheap nowadays. actually, since it is only 150bp.
r****o
发帖数: 105
45
来自主题: Biology版 - Re: help me with cyclin D1 western
做科学要讲究严谨和逻辑性。你这样问问题不明不白,什么
背景也没有,很难让人帮你分析。
先问你几个问题:
(1) 你的一抗是单抗还是多抗?
(2)你有无对照证明二抗没有坏?
(3)你的阳性对照( 100KD)是Whole Cell lysate 还是纯的Cyclin D1?
(4)你用的是何种封闭剂?non-fat dry milk?BSA? Gelatin?
(5)你有没有做较长时间exposure,确定另一个样品和对照根本没有
36KD的带?

建议你首先找一个非常肯定的阳性对照,用没坏的一抗二抗试一遍,
然后再做样品。
r****o
发帖数: 105
46
来自主题: Biology版 - Re: 请问一个关于保存酶的问题
BSA这里起类似与分子伴侣的作用,主要是防止酶蛋白发生
由疏水相互作用引起的聚合和沉淀。也有可能起避免残存
蛋白酶分解酶蛋白的作用。不管怎么样,主要是为了稳定酶了。
别的添加物比较常见还有:
(1)甘油:也是避免疏水作用引起的蛋白质聚合。尤其可以保护酶
在溶解/冷冻时得活性。
(2)EDTA:可能是为了消除少量protease 的活性,从而使酶蛋白不
会被分解吧。
(3)DTT/BME: 还原剂。防止形成蛋白质分子之间非天然的二硫键。从
而防止蛋白发生聚合。
(4)Sodium Azide: 毒药。抑制微生物生长。如果长期保存蛋白,加
这个会有帮助。
(5) 其他比较常见的盐或者温和的去垢剂:帮助蛋白保持可溶状态。
f***r
发帖数: 204
47
与western作战了个多月,得到本版很多热心大虾的帮助,最后经过结合多方经验,也挖
了文献出来,终于攻克乐我那个低丰度蛋白PVDF检测堡垒。fever是bench work比较弱的
,这么个小case瞎搞了一个月才搞定,但还是敝帚自珍的总结一下,牛虾们不要笑话,和
偶一样的菜菜们可以吸取俺的教训以后少走弯路。
1. 实验碰到问题,查文献很重要,我最后的关键步骤全部按照查到的方法改进,果然奏
效。动不动跑到这里来撒娇,真是偏劳各位善良的筒子了……
2. 大虾们对PVDF的总结很正确,结合力强,所以也容易提高背景,有效控制背景,主要
是尽量控制一抗的浓度,宁可用最少的一抗4度过夜,不要使用太低的稀释比。(我用的
和大部分文献建议的一样,是1:1000。)二抗在适当的浓度下,温育不要太长,室温1小
时应该足以应付general的需要。
3. 电转膜时间不要over,否则条带可能会有损失(这是偶老板说的,是否为了防止偶在
等转膜期间失踪,则不得而知:)。
4. blocking BSA没有必要用,奶粉就好,像某位大虾说的,又便宜又好用,何乐不为。
5.
tween20可以从头用到尾,但如果用
l*****k
发帖数: 587
48
pre-absorption might help you, just use tumore sample without GFP to
pre-absorb your antibody before you use it on the real tissues.
you can also increase the stringency of your experimental condition, like
increase BSA concentration or Tween concentration, wash more rigorously.
I once made affinity-purified anti-RAD51 myself, however, I can't use it for
anything since it binds to a lot of other tissues. Wish you good luck
p*****n
发帖数: 981
49
来自主题: Biology版 - [合集] 奇怪的内切酶问题
☆─────────────────────────────────────☆
tataat (tataat) 于 (Sat Jan 20 23:34:03 2007) 提到:
我用SalI+NotI切一个片断(from a vector). 加了buffer 3和BSA. 结果发现之切了一
刀。于是作了个对照:+SalI only ; +NotI only; +SalI+NotI; +NdeI +NcoI(他们正
好在salI 和 NotI 的外侧,只差十几个bp).
结果:NdeI+NcoI: 切成了两个片断(3+0.4kb),size都对。所以片断连进去了(pcr+
pgemt,0.4+3.0kb)
+SalI: linearized, only one band(3.4kb)
+NotI: linearized, only one band (3.4)
+SalI+NotI: linearied, only one band (3.4)
实在想不通,难道salI不能和notI混和吗?以前好像也这么干过,没问题的。
☆────────
s******y
发帖数: 28562
50
来自主题: Biology版 - 到底怎么抽提全细胞蛋白呀?
你的方法没有问题,大部分实验室都这么做的。但是我不建议你和老板顶牛,你最好是
要分清矛盾的主次,不要为了这种小事情和他翻脸。
用RIPA buffer 并不能保证所有蛋白都溶解,而且里面的detergent 会干扰
Bradford protein assay,这个在大部分bradford assay的技术说明书里会提到。
你可以拿一个已知浓度的蛋白(such as BSA),一半溶在PBS, 一般溶在RIPA buffer,
然后做这个Bradford assay, 体会一下,
你会发现溶在RIPA buffer 里的蛋白的数值和PBS里的不一样,而且仪器上
读出来的数值不稳定,每次重复测量读出来的数值都大大的不同。
注意先不要告诉老板!先自己偷偷做一个,心里有数,然后再跟老板讨论,装作
谦虚的说你听说RIPA buffer 有这个问题,然后建议你们作这个实验,然后
再当面重新作一次给他看. 注意这个顺序不能颠倒!一定要自己先做一次,知道
结果了,然后才装着和他讨论装着你是第一次做这个实验。
千万千万不要直接第一次就作给他看!否则万一你们的蛋白有问题,
或者你们的UV spec 有问
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