f****e
发帖数: 679 | 1 no, blocking with BSA will only make the background dirtier. But you can put
your primary ab in BSA (After blocking the membrane with milk) to boost the
signal. |
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h*****G
发帖数: 113 | 2 hello,
最近需要用cell surface marker 细胞染色，sort positive 的细胞，然后重新plate
培养。每次sort完细胞，重新plate以后，细胞总是大量死亡。希望大家有什么建议。
下面是我的protocol
Trypsin cells. Stop reaction. collect cells. Wash once with PBS+0.2% BSA.
Staining cells in the dark at RT for 25 min. Staining buffer: PBS (w/o Ca2+
Mg2+) + 0.2% BSA+ 0.09% NaN3.
Wash three twice. (500gX5 min every time)
Resuspend cells in Staining buffer. Sort cells..
Replate positive cells. |
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b******n
发帖数: 4225 | 3 1. 抗体的选择
对于国内的大多数实验室来讲，做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很
简单，买进口抗体捉襟见肘，买国产抗体得需要大无畏的勇气，对于我所在的兰州地区
的实验者而言，感触尤深。在 这五年的western blot实验历程里，我先后用过进口抗
体，进口抗体国内分装包装，国产抗体，质量良莠不齐。
进口抗体一般不会出现闪失：abcam品种全，质量过硬，但价高（3400元/100微升），
而且说是100微升，但至多能吸出来90微升；Sigma的 价最贵；比较有性价比的是CST的
抗体，现在好像是2200元/100微升，我前后用过二十几种， 1:1000的稀释比下，还没
有失过手，100微升通常能完成所有的免疫组化和western blot实验，还有一个优点是
通常量比100微升多出来10微升，唯一的不足是CST的品种实在不多。Santa的多克隆抗
体质量可以，但是选用 Santa的单抗还是有风险，估计这也是业界共识了吧。
进口抗体国内分装包装我也用过不少，呵呵，毕竟是穷人（420元/100微升），大概好
抗体的比例约为50%，如果能做出来，也存在一个问题，就是... 阅读全帖 |
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i****g
发帖数: 3896 | 4 写得比较有意思，但是不太实用，可能实验条件相差太大。precast gel比自己制的gel
效果要好很多，结果也容易重复。antibody要看运气的，呵呵。
1. 抗体的选择
对于国内的大多数实验室来讲，做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很
简单，买进口抗体捉襟见肘，买国产抗体得需要大无畏的勇气，对于我所在的兰州地区
的实验者而言，感触尤深。在 这五年的western blot实验历程里，我先后用过进口抗
体，进口抗体国内分装包装，国产抗体，质量良莠不齐。
进口抗体一般不会出现闪失：abcam品种全，质量过硬，但价高（3400元/100微升），
而且说是100微升，但至多能吸出来90微升；Sigma的 价最贵；比较有性价比的是CST的
抗体，现在好像是2200元/100微升，我前后用过二十几种， 1:1000的稀释比下，还没
有失过手，100微升通常能完成所有的免疫组化和western blot实验，还有一个优点是
通常量比100微升多出来10微升，唯一的不足是CST的品种实在不多。Santa的多克隆抗
体质量可以，但是选用 Santa的单抗还是有风险，估计这... 阅读全帖 |
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g********0
发帖数: 6201 | 5 抗体不怕反复冻融。
抗体的腐败反而是由于它的亲密战友-所谓工作液里起降背景的脱脂奶粉或BSA的快速腐败而
导致的。
我一向不认为脱脂奶粉或BSA能起多大的所谓降背景的作用。
我用抗体直接稀释在TBST或PBST里，含点triton就行了，我一抗里连叠氮钠都不加的。而如果有奶粉的话，加叠氮钠也没用，该臭就臭。
用完就冻起来，反复用几个月都没有问题。
总之，配抗体的buffer里除了抗体本身不要有其他蛋白，这样保质期就长了。 |
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i*****g
发帖数: 11893 | 6 很久没有用了，GST Ab 很好做的
V5 以前用的invitrogen，确实好用
还有，用抗体，可以用BSA-TBS 溶液 配，用non fat milk特别容易坏
后来为了省抗体，还用过一招
桌面上，saran wrap 上面，放blot，然后用最低量滴上blot，能看见液面鼓起来就可
以了，然后用盖子盖上，2小时后，做下一步，挺好用的
如果抗体specific很好，可以用TBS-BSA solution，加一点点Ab，就可以了，
可以省不少Ab |
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L*****t
发帖数: 56 | 7 第一次做磷酸化蛋白，一抗封闭用5% BSA没问题。但是二抗（CST 7074）要求稀释时加
5%脱脂奶（尝试换成BSA/明胶的复方出了很多杂带）, 这个对结果是否有影响？ |
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d****i
发帖数: 2346 | 8 Warning: BSA and dry milk may contain IgG which will react with this
antibody. Use of BSA and/or dry milk to block or dilute this antibody may
increase background and/or reduce secondary antibody titer.
http://www.jacksonimmuno.com/catalog/CatPages/rblc.asp |
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s*******g
发帖数: 36 | 9 想把protein immobilized到sensor chip上，用biacore或者octet Red做screen。。。
可是问题是我label的蛋白一直load不上去，load到的信号非常低。。。。 我用了
maleimide-PEG4-biotin 去label cysteine，结果一直不好。信号就是很低的时候就达
到平衡了，很奇怪。 之后我换成NHS-LS-biotin，这个大家用的比较多，结果load的信
号更低。。 我都有BSA去test labeling，都信号很低。。
我现在的问题是，蛋白肯定是label了，30%左右，我用的1 biotin： 1 protein的
ratio做的labeling，因为不想over label multiple sites on one protein. 都做了
两个月了，快绝望了。。。什么条件都试了，Octet red的信号就是不行！
另外，有人说BSA 不好label，想问问别人有用其他蛋白label的吗，我想做个positive
control， 说明是蛋白的问题，还是label的方法的问题
有经验的人指点一下吧。谢谢了！ |
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n********e
发帖数: 1630 | 10 多谢。终于找到明白人了。我dialysis没有那么多 。我用500x 1h Twice. 这个可能真
的不够。可能有free biotin在 。 下次我一定试试你的dialysis的方法。我octet 信
号才3-4 nm 有的时候更低。就是很低就饱和了。确实说明binding site没了。
另外我是label 4°C 过夜。这样就成了三天时间label一次了。。。
另外我用的是maleimide-PEG2-BIOTIN 50mM HEPES buffer. 标记SH group
另外我也有NHS -LC-BIOTIN... 本来想用BSA 去label做个control 结果bsa也load不
上去
听了你说的。我感觉真的要用更多的dialysis
待会私信再问你。谢谢啊。。。
hours |
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k*****n
发帖数: 323 | 11 try washing your Dynabeads with PBS 0.5% BSA 3 times, then incubate
antibodies in PBS-BSA for two hour. After IP, make sure resuspend beads
totally during each washing step. I never using sperm DNA. I would suggest
you using Pol II monoantibody 4H8 as positive control. Several steps are
critical for ChIP, 1, crosslinking, always using fresh FA, like 16% FA from
Thermo. for cells 15 min crosslinking with rotation would be enough, quench
with 0.125 M glycine for 1 min. 2 sonication, try Branson so... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 12 DNA提取后氧化是非常普遍和难以避免的问题，有文章说当DNA总量大于30微克后才能防
止氧化，当然你可以用未处理的细胞作为对照。至于加水incubate后qpcr下降，你可能
要检查一下你的试剂，有人说neb的BSA过夜时确实会降解DNA，乙酰化BSA会更好一些。 |
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m*********D
发帖数: 1727 | 13 每个试验都有它的目的，所以，考虑的因素也就完全不一样了。象我作CM,需要的是在
细胞很稀少的情况下，CM能帮助一个细胞变成一个colony,需要的就是细胞分泌的生长
因子。我不必搞清楚那些因子。所以，我就简单的用我需要的medium，在细胞数量比较
多的情况下收集。你要是想分析细胞分泌的生长因子等，你要考虑的是serum里带来的
因子会不会会干扰你的分析，serum里高浓度的BSA会不会让你的后续分析变得困难（我
现在也面临这个问题，正在试无serum的medium）。
如果你的目的是分析细胞分泌的生长因子等，我的建议就是细胞平时用的base medium
。要细胞adopt到新的base medium往往很不容易的，有时候需要几个pass。我会在收集
的那一步，不加serum，减少BSA和serum里带来的因子。所以，我会normally split细
胞，等细胞长到50-70%的confluence,先用1X PBS把细胞洗两篇，就加base medium,在
12小时内收集medium。 |
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w********h
发帖数: 12367 | 14 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: bulletin (bulletin), 信区: Biology
标 题: 穷人的劳斯莱斯——五年western经验谈（转）
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Mar 2 23:29:05 2012, 美东)
1. 抗体的选择
对于国内的大多数实验室来讲，做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很
简单，买进口抗体捉襟见肘，买国产抗体得需要大无畏的勇气，对于我所在的兰州地区
的实验者而言，感触尤深。在 这五年的western blot实验历程里，我先后用过进口抗
体，进口抗体国内分装包装，国产抗体，质量良莠不齐。
进口抗体一般不会出现闪失：abcam品种全，质量过硬，但价高（3400元/100微升），
而且说是100微升，但至多能吸出来90微升；Sigma的 价最贵；比较有性价比的是CST的
抗体，现在好像是2200元/100微升，我前后用过二十几种， 1:1000的稀释比下，还没
有失过手，100微升通常能完成所有的免疫组化和western blot实验，还有一个优点是
通常量比100微升多出来10... 阅读全帖 |
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e***n
发帖数: 3441 | 15 http://health.people.com.cn/GB/26466/70809/4802066.html
酸奶比牛奶好，但最好的是豆浆，尤其对于中国人！
牛奶是“上帝”给小牛准备的，连成年的牛也不能很好吸收，何况成人呢。成人连
人奶都吸收不好，何况牛奶呢！事实上，人类是唯一长大以后仍然喝奶的动物。
牛奶中含有乳糖，需要乳糖酶分解吸收。而世界上超过三分之二的人缺乏乳糖酶，
我们中国人更有80％以上缺乏乳糖酶。地球上只有居住在阿尔卑斯山以北的荷兰人、丹
麦人和瑞典人等民族有充足的乳糖酶，因为这个地区的人缺乏日照，因而缺乏维生素D
，影响钙的吸收。为了避免软骨病，他们的祖先通过喝牛奶，用乳糖代替维生素D来吸
收奶中的钙。中国有充足的光照，更有富含钙的大豆和深绿色多叶蔬菜，所以我们的祖
先没有通过喝牛奶获得钙的压力。正因为如此，中国（汉族）传统食谱中几乎没有乳制
品。
把牛奶发酵制成酸奶，部分乳糖分解成半乳糖或葡萄糖，所以酸奶的血糖指数（36
）比牛奶的（27）高。但是酸奶的吸收率比牛奶高，尤其对于那些缺乏乳糖酶的人。和
牛奶相比，酸奶中的钙没有减少，另外多了乳酸菌。乳酸菌既可以帮助奶中... 阅读全帖 |
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e***n
发帖数: 3441 | 16 http://health.people.com.cn/GB/26466/70809/4802066.html
酸奶比牛奶好，但最好的是豆浆，尤其对于中国人！
牛奶是“上帝”给小牛准备的，连成年的牛也不能很好吸收，何况成人呢。成人连
人奶都吸收不好，何况牛奶呢！事实上，人类是唯一长大以后仍然喝奶的动物。
牛奶中含有乳糖，需要乳糖酶分解吸收。而世界上超过三分之二的人缺乏乳糖酶，
我们中国人更有80％以上缺乏乳糖酶。地球上只有居住在阿尔卑斯山以北的荷兰人、丹
麦人和瑞典人等民族有充足的乳糖酶，因为这个地区的人缺乏日照，因而缺乏维生素D
，影响钙的吸收。为了避免软骨病，他们的祖先通过喝牛奶，用乳糖代替维生素D来吸
收奶中的钙。中国有充足的光照，更有富含钙的大豆和深绿色多叶蔬菜，所以我们的祖
先没有通过喝牛奶获得钙的压力。正因为如此，中国（汉族）传统食谱中几乎没有乳制
品。
把牛奶发酵制成酸奶，部分乳糖分解成半乳糖或葡萄糖，所以酸奶的血糖指数（36
）比牛奶的（27）高。但是酸奶的吸收率比牛奶高，尤其对于那些缺乏乳糖酶的人。和
牛奶相比，酸奶中的钙没有减少，另外多了乳酸菌。乳酸菌既可以帮助奶中... 阅读全帖 |
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d**********i
发帖数: 4877 | 17 如今还粉国民党的，只有大陆极少数的孝子贤孙，这不能不说是共党教育失败。
台湾网民评论: 国共内战国军为何兵败如山倒？
2013年06月04日 ⁄ 台湾评论 ⁄ 评论数 55 ⁄ 被围观 5,208+
国共内战国军为何兵败如山倒？楼主：中国土地面积那么大，且当时国军不论武器的质
量，老共不要说海军、空军，就连坦克车都没有，完全都是轻武器去对抗KMT的重装备
。军队的训练素质，KMT更远胜gcd，可是竟然在短短4年内，整个中国都丢了……实在
不可思议？况且老蒋带领中国打赢日本，迈入世界五强，在中国民间和国际声望相当高
，为何国共内战时，其他国家会没有帮KMT???有趣的是，后来中国被gcd整碗捧去，不
像东西德 南北韩 南北越分成共产VS皿煮二元对立的政体。
分享：缺德大叔
本文论坛地址：三泰虎论坛 http://bbs.santaihu.com/thread-6641-1-1.html
发帖人：内衣
中国土地面积那么大，且当时国军不论武器的质量，老共不要说海军、空军，就连坦克
车都没有，完全都是轻武器去对抗KMT的重装备。
军队的训练素质，KMT更远胜... 阅读全帖 |
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a*****y
发帖数: 33185 | 18 Although the Federal Reserve generally monitors developments in virtual
currencies and other payments system innovations, it does not necessarily
have authority to directly supervise or regulate these innovations or the
entities that provide them to the market. In general, the Federal Reserve
would only have authority to regulate a virtual currency product if it is
issued by, or cleared or settled through, a banking organization that we
supervise.
Given the Federal Reserve”s authority and the ma... 阅读全帖 |
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t***h
发帖数: 5601 | 19 In a highly unusual move, Hagel did not meet with President Hamid Karzai.
Karzai was scheduled to travel to Tehran on Sunday for talks with Iran,
officials said.
Karzai has said he won't sign the Bilateral Security Agreement (BSA) or any
agreement that allows continued raids on Afghan homes. Under Afghan law, any
agreement must be signed twice - once to get it to parliament and, if
approved, then by Karzai in his capacity as president.
Karzai says he wants his successor to decide after Afghanist... 阅读全帖 |
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c***c
发帖数: 21374 | 20 据华尔街日报，中国电商巨头阿里巴巴集团(Alibaba Group Holding Ltd.)旗下的淘宝
网(Taobao)是全球最大购物网站之一，该网站有700万家商户，商品数量多达八亿件，
从Columbia Sportswear毛绒夹克到大行(Dahon)折叠自行车无所不有。
但这其中存在一些问题。举例来说，据总部位于加州杜阿尔特的大行首席执行长韩德玮
(David Hon)称，在淘宝网上约5.8万辆供出售的折叠自行车中，有一半是假货或侵犯了
大行的知识产权。
据韩德玮估计，过去两年淘宝网上的假冒大行折叠车数量增加了10到20倍，致使公司每
年损失上百万美元的销售额并被迫增加打假资源。如今大行有四名全职员工专门负责在
全球监控、打击假货，每年投入的费用约20万美元。
韩德玮称大行一直在向淘宝投诉，造假者会停手一段时间，但几个月后又卷土重来另开
一家店。
大行遭遇的困境凸显出淘宝网运营商阿里巴巴在准备赴美进行首次公开募股(IPO)之际
面临的一个亟待解决的严峻问题。阿里巴巴的IPO有望成为全球有史以来规模最大的IPO。
据一项2月份提交世界知识产权组织(World Intellec... 阅读全帖 |
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j*********r
发帖数: 24733 | 22 【 以下文字转载自 USANews 讨论区 】
发信人: bostontennis (bostontennis), 信区: USANews
标 题: 赵美心等85位民主党议员向最高法院file支持race based AA
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Nov 4 08:30:00 2015, 美东)
85位美国国会众议员联名向联邦最高法院发出意见书，在即将开审的Fisher v
University of Texas 一案中，支持race based affirmative action. 85人全部是民
主党议员，包括华裔民主党议员Judy Chu
http://www.scotusblog.com/wp-content/uploads/2015/11/14-981-bsa
查了下，赵美心来自加州27区，选取内亚裔占37%，超过其他任何种族。
另外一个背景是Fisher vs University of Texas 一案即将开审，双方都在造势，寻求
同盟。很多政治人物纷纷选择站队。
More than 160 Asian-American Groups File Br... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 23 罪恶之城
我，最近沉默了很多。倒不是我有什么忌讳或者胆怯，只是有一些倦了。我，没有很强
的功利心，这世界上也没有什么我放不下或者必须要得到的东西。我唯一牵挂的就是我
的先生和孩子，他们每天被换来换去，所有的记忆都已走远，我，不能确认他们中任何
一个人，所以，我的心一直就漂浮在空中。因为我不能确认，所以，所有的人，我都是
远远的看着。我，也没有很强的报复心。人，总是要死的。人的一生不过是一种经历。
我相信，伤害我和我家人的人一定会得到报应的。不需要我亲自出手，他们一生也不会
善终，会受尽折磨和痛苦。
我，知道有不同势力在搏斗，但我不属于其中任何一种势力，所以我并不太清楚这些人
出出进进，忙忙碌碌在干什么。虽然我的悟性很高，但我很单纯，想必那种势力也不敢
在我面前曝露身份。因为我是没有秘密的人，自然也存不住秘密。谁在我面前曝露身份
，估计很快就被我出卖了，当然不是有意出卖的那种，而是我心里存不住秘密。你说，
我悟性又高，又存不住秘密，对于那些有秘密的人，实在应该离我远一些。你说，天下
如此之大，幅员广阔，人数众多，你害谁不好害，偏偏对我纠缠不放。我是看淡生死的
人，又无欲无求，又不受威胁，... 阅读全帖 |
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u***************r
发帖数: 11227 | 24 发信人： PLEASEGO(ZERO), 信区： Military
标题： 多维大数据解析日本已强大到让人窒息
发信站： BBS未名空间站(Fri Oct 20 14:07:19 2017,GMT)
谈起日本，大多数人第一反应就是“没落的发达国家”，或者“经济停止发展”，
可是，日本真的举步维艰了吗？
一起来看看闷声发大财的日本，这些年，到底在干什么。
01日本在创新领域
2015国际权威研究机构《 汤森路透》 发表了新的一年全球企业创新排名TOP100：
日本40家
美国35家
法国10家
德国4家
瑞士3家
日本其实早就抛弃已经沦为低端制造业的家电之类产业，转变为全力投入BtoB，新
材料，人工智能，医疗，生物，新能源，物联网，机器人，高科技硬件，环境保护，资
源再利用等新兴领域。
新技术领域，美日两国瓜分了全球80%……
《Economist》发表2015国家创新质量（Innovation Quality)报告，日本位列世界
第三。
麦肯锡2013发布研究报告，罗列了有望改变生活、商业和全球经济的12大新兴颠覆
技术：移动互联网、人工智能、物联网、云计算、机器人、次世代基因组技术... 阅读全帖 |
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C*I
发帖数: 4736 | 25 一直在误导，现在还在误导。 说说明corona virus 不可以从蝙蝠直接传染给人，必须
经过一个中间宿体性的其它动物才能传染给人。所以，病毒发生后，就故意误导全国人
民去海鲜市场找证据，找其它野生动物的麻烦。 而且还是病毒所去找的，找完了还装
模做样化验呀，分离呀什么的。最后把责任全部推给了海鲜市场的动物。可是那种动物
，一直不敢说，说了其它相关已经在人就会去早那种动物监测。 所以压根不说，打马
虎眼。
事实上，早在2013 年，就是这个武汉病毒研究所，已经从来自云南的蝙蝠身上所携带
的corona virus中分离出第一株蝙蝠SARS类似样的冠状病毒的活病毒，其中就包含了类
似于S类型的基因。从而证实这株病毒能够使其接受和SARS病毒相同的受体，并能够感
染人的细胞。对此新发现，武汉病毒所还把它以武汉病毒研究所的英文简称命名“WIV1
”，以彰显这一发现的重要价值和属于自己第一个发现的巨大研究成果。这个成果刊载
于2013年11月的《自然》杂志。
就是说，从云南弄回来的这种蝙蝠所携带的类似于sars的 corona virus， 可以不经过
其它受体/宿体，而直接传染给人。 他们... 阅读全帖 |
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C*I
发帖数: 4736 | 26 一直在误导，现在还在误导。 说说明corona virus 不可以从蝙蝠直接传染给人，必须
经过一个中间宿体性的其它动物才能传染给人。所以，病毒发生后，就故意误导全国人
民去海鲜市场找证据，找其它野生动物的麻烦。 而且还是病毒所去找的，找完了还装
模做样化验呀，分离呀什么的。最后把责任全部推给了海鲜市场的动物。可是那种动物
，一直不敢说，说了其它相关已经在人就会去早那种动物监测。 所以压根不说，打马
虎眼。
事实上，早在2013 年，就是这个武汉病毒研究所，已经从来自云南的蝙蝠身上所携带
的corona virus中分离出第一株蝙蝠SARS类似样的冠状病毒的活病毒，其中就包含了类
似于S类型的基因。从而证实这株病毒能够使其接受和SARS病毒相同的受体，并能够感
染人的细胞。对此新发现，武汉病毒所还把它以武汉病毒研究所的英文简称命名“WIV1
”，以彰显这一发现的重要价值和属于自己第一个发现的巨大研究成果。这个成果刊载
于2013年11月的《自然》杂志。
就是说，从云南弄回来的这种蝙蝠所携带的类似于sars的 corona virus， 可以不经过
其它受体/宿体，而直接传染给人。 他们... 阅读全帖 |
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C*I
发帖数: 4736 | 27 Published: 30 October 2013
Isolation and characterization of a bat SARS-like coronavirus that uses the
ACE2 receptor
Xing-Yi Ge, Jia-Lu Li, Xing-Lou Yang, Aleksei A. Chmura, Guangjian Zhu,
Jonathan H. Epstein, Jonna K. Mazet, Ben Hu, Wei Zhang, Cheng Peng, Yu-Ji
Zhang, Chu-Ming Luo, Bing Tan, Ning Wang, Yan Zhu, Gary Crameri, Shu-Yi
Zhang, Lin-Fa Wang, Peter Daszak & Zheng-Li Shi
Nature volume 503, pages535–538(2013)Cite this article
Abstract
The 2002–3 pandemic caused by severe acute respirator... 阅读全帖 |
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g********d
发帖数: 4174 | 28 http://www.advocate.com/society/youth/2012/06/06/boy-scouts-con
The Boy Scouts confirmed today that it is considering a change of policy
that lets gay scouts and leaders serve openly in local chapters.
The announcement comes after activist Zach Wahls delivered 275,000 petition
signatures to the group and met with its leadership. Wahls, an Eagle Scout
who has two moms, was outraged that a lesbian mother had been removed as den
leader for a Cub Scout troop. And he got back into his uniform and
del... 阅读全帖 |
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f****o
发帖数: 8105 | 29 【 以下文字转载自 WoldMiscNews 俱乐部 】
发信人: fuxeto (富士德), 信区: WoldMiscNews
标 题: 何清涟：巴拿马文件披露是对避税天堂的攻坚战
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Apr 9 23:09:36 2016, 美东)
《巴拿马档》在世界范围内掀起轩然大波，该档披露的资讯，舆论反应在西方与东方世
界截然不同，民主国家针对的是逃税行为，中国人则关注高层家族的腐败。我在接受采
访时，记者几乎都会问一个问题，为何巴拿马文件中很少有美国人？是不是美国故意透
露出来的？因为了解美国反洗钱的历史，我的回答是：在全球反洗钱活动中，美国一直
是领跑者，建立了相对完善的法律。因此，巴拿马档披露的真正意义，并不在于帮助中
国反腐，而在于美国艰难推进的全球反洗钱活 动，可以借此往前推进一步。
ADVERTISING
美国反洗钱，几十年磨一剑
美国最初的反洗钱是针对毒品交易的，后来随着本国司法实践及国际社会的政治需要而
不断调整目标，在立法、司法与执法三方面都有一个长达几十年演变过程。探究美国反
洗钱立法的核心，可以简单地概括为“一解两报”。所谓“一解... 阅读全帖 |
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f****o
发帖数: 8105 | 30 【 以下文字转载自 WoldMiscNews 俱乐部 】
发信人: fuxeto (富士德), 信区: WoldMiscNews
标 题: 何清涟：巴拿马文件披露是对避税天堂的攻坚战
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Apr 9 23:09:36 2016, 美东)
《巴拿马档》在世界范围内掀起轩然大波，该档披露的资讯，舆论反应在西方与东方世
界截然不同，民主国家针对的是逃税行为，中国人则关注高层家族的腐败。我在接受采
访时，记者几乎都会问一个问题，为何巴拿马文件中很少有美国人？是不是美国故意透
露出来的？因为了解美国反洗钱的历史，我的回答是：在全球反洗钱活动中，美国一直
是领跑者，建立了相对完善的法律。因此，巴拿马档披露的真正意义，并不在于帮助中
国反腐，而在于美国艰难推进的全球反洗钱活 动，可以借此往前推进一步。
ADVERTISING
美国反洗钱，几十年磨一剑
美国最初的反洗钱是针对毒品交易的，后来随着本国司法实践及国际社会的政治需要而
不断调整目标，在立法、司法与执法三方面都有一个长达几十年演变过程。探究美国反
洗钱立法的核心，可以简单地概括为“一解两报”。所谓“一解... 阅读全帖 |
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l****z
发帖数: 29846 | 31 Texas Gov. Perry: ‘I Look at the Homosexual Issue the Same Way’ as the ‘
Alcoholic’ Issue
June 12, 2014 - 1:22 PM
By Michael W. Chapman
(CNSNews.com) – Texas Gov. Rick Perry said he views homosexual behavior the
same way he views alcoholic behavior, in that a person may be inclined to
behave a certain way because of their genetic makeup but they also “have
the ability not to do that.”
It is a view he also expressed in his 2008 book on the Boy Scouts, On My
Honor, defending them against the atta... 阅读全帖 |
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d*****k
发帖数: 310 | 33 这几天真是精彩纷呈啊. 5*3 3*5的搞, 父亲儿子变伴侣, 男的女的厕所混搭, 犯罪记
录和贩毒分子成了人民的主人. public house到处强插， 华裔政客支持歧视华裔入学
的政策， 这世界变化太快！
这几天, 大家可以看到民主党的真实面目了, 在教育, 伦理, 政府, 住房. (sec8 潜行
进入中产区) 彻底的颠覆了华人的一切价值观和利益.
教育上用教条剥夺学生的独立思考能力, 在制度上削弱华人的优势. 在学校的安全上
进一步侵犯大多数学生的利益.
在伦理上, 父子结婚， 彻底显示了左派从来不遵从伦理和法规. 都是为所欲为, 一切
都是他人的错的思维.
在政府问题上, 狠狠的抽了华人五毛的耳光, 就是罪犯和毒贩都可以在政府工上优待,
也不愿给华裔一杯残羹
在住房上, 颠覆了社区的最后一道防线. 彻底的引进了劣币驱逐良币的现实.
今天更是投下原子弹了， 五毛宣传员以前说， 民主党支持华人参政的， 现在好， 看
到都是选汉奸的， 说AA对华裔有好处， 入学只是一小部分， 政府工我们占便宜，
好， 巴马立马扇嘴巴， 罪犯毒贩大多是非墨裔， 政府工以后不看了。。 宣传员... 阅读全帖 |
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f**********n
发帖数: 29853 | 34 正如我以前的帖子提到过的一样，我认为任何人投票都应该基于自己的切身利益，不要
被虚幻的宣传所迷惑。
华人该投票给谁，我在以前的帖子也提到过，AA对每个华人家庭都可能被折算为成千上
万的经济损失，对于未来小孩的经济地位和收入还有极其深远的影响。更别提那些每个
家庭都存在的难以估量的精神压力。经历过高考的第一代移民或多或少都能理解。鉴于
民主党政府对AA的顽固支持态度，希望准备在2016年投票给民主党的人三思。
那些活跃在本版的左派ID，他们不可能不知道AA，不可能不知道AA的影响有多大，然而
他们在蛊惑大家投票的时候，列出来的原因居然是“大家都是华人”?
都是华人怎么样?华人中没有败类？我不用翻开历史书，就问左派一个问题，如果华人
没有败类，那为什么我们的祖国不能提供一个足够幸福的环境？为什么我们要背井离乡？
回首看活跃在美国政坛的华人议员，就以赵没心为例。除了毫无实际意义的排华法案道
歉和装摸做样的质询寥寥发生的华人间谍案，她为华人做过啥？反过来，她与一大批民
主党议员联手，向最高法院施加压力，來支持AA。 参见链接1
不仅如此，因为她的无能和低效，她还为华人带来了羞辱。参见链接2
我... 阅读全帖 |
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x****k
发帖数: 2932 | 35 bostontennis (bostontennis)发于 Wed Nov 4 08:30:00 2015, 美东, 信区:
USANews标 题: 赵美心等85位民主党议员向最高法院file支持race based AA
85位美国国会众议员联名向联邦最高法院发出意见书，在即将开审的Fisher v
University of Texas 一案中，支持race based affirmative action. 85人全部是民
主党议员，包括华裔民主党议员Judy Chu
http://www.scotusblog.com/wp-content/uploads/2015/11/14-981-bsa
查了下，赵美心来自加州27区，选取内亚裔占37%，超过其他任何种族。
另外一个背景是Fisher vs University of Texas 一案即将开审，双方都在造势，寻求
同盟。很多政治人物纷纷选择站队。
More than 160 Asian-American Groups File Briefs in Support of Affirmative
Action
http://ww... 阅读全帖 |
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M****H
发帖数: 1057 | 36 这篇文章的原文。内容我不评论，我只想说，这写作和逻辑水平，在中学生里也是平均
水准之下，怎么进的哈佛？说歪理可以，说歪理也可以也说得很圆满自洽，梁校就是典
型。但这篇哈佛学生的文章真的是弱到爆炸。
https://www.thecrimson.com/article/2018/7/9/hyppolite-harvard-without-
affirmative-action/
A Room Full of Mirrors: Harvard Without Affirmative Action
By Jasmine N. Hyppolite July 9, 2018
Jasmine N. Hyppolite ’21 lives in Eliot House. She is political action
chair of the Black Students Association.
10
The recent news regarding accusations of disadvantages for and
discrimination against Asian-America... 阅读全帖 |
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d******y
发帖数: 2787 | 37 感谢网友贴出全文
其实我认为这篇文章的逻辑水平的确是fake news的好范文, 前后观点呼应下，中间搞
点个人攻击，塞点翻来覆去的narratives，承认点不足但是坚决不改就齐活了，AA进来
的政治活动积极分子也就这样了。咋能按梁效的写作水平来要求他们呢？
发信人: MTWASH (83), 信区: USANews
标 题: Re: 哈佛大学校报 “没有平权措施的哈佛，整间教室恐怕都将是亚裔
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Aug 31 17:40:35 2018, 美东)
这篇文章的原文。内容我不评论，我只想说，这写作和逻辑水平，在中学生里也是平均
水准之下，怎么进的哈佛？说歪理可以，说歪理也可以也说得很圆满自洽，梁校就是典
型。但这篇哈佛学生的文章真的是弱到爆炸。
https://www.thecrimson.com/article/2018/7/9/hyppolite-harvard-without-
affirmative-action/
A Room Full of Mirrors: Harvard Without Affirmative Action
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发帖数: 1 | 38 流亡美国的中国富豪郭文贵日前被香港高等法院以《有组织及严重罪行条例》，冻结87
亿元（港币，15亿新币）的资产，令他操控的公司和人头帐户曝光。当中最瞩目的是首
次发现他透过离岸公司，合共控制约14.98%海通证券H股。
据网媒香港01报道，法庭文件显示，海通主要股东“BSA Strategic Fund I”、“
Insight Phoenix Fund”被郭文贵“有效控制”，郭还透过其他离岸公司控制海通的股
份。不过，股份被冻结至今近一个月，海通证券并无发出公告。 |
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y***e
发帖数: 383 | 39 我的座椅是调节的比较低，要不然要顶到头了，呃。座椅低视野会不好么？
对了，你觉得A柱的遮挡厉害么？我觉得还好但是大家的complain比较多。
EX+Premium是连加热方向盘都有了，虽然我在加州用不上这东西...
BSA我就不想了，那个层次可能太高。
但是HID和自适应转向前灯灯没有我还是比较失望一点点的。
保值我觉得不是问题关键。再过5年，如果这个被证明是一款好车，自然resale还是会
上去的。再说5年后两者的差价也就最多$4K，或许和现在的新车价差异差不多。不差这
点钱了咯。
我第一次看到同事开KIA的时候也问了。他以前的名声是真不好。希望这次他的车不要
金玉其外咯。
你还觉得它有什么缺点么？
谢谢讨论～：） |
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t*****l
发帖数: 266 | 40 家附近有一个DEALER, 本来是打算试驾,看车. 然后联系一个更远的DEALER拼价格的.
正好他们那里有我要的乞丐版的, 后轮驱, premium package, BSA, heated seats,
panorama sunroof. MSRP $43205.
下班以后去的, 抱着完全可以不买的心态,谈到$38100, 实在是饿的不行了, 就从了. 6
%州, 出门41K出头一点.
不算是大DEAL, 感觉也还行吧, 看了一个月车, 每个礼拜不是在试车就是在去DEALER的
路上. 总算可以松口气了.
打算maintenance package, 请大家推荐哪家便宜. |
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f********e
发帖数: 33 | 41 Post for a friend's company:
Position Description: Sr. Business Systems Analyst
Company: Youncl Corp.
Location: Richmond, VA
Posted on: Tue, Feb.9, 2010
Position type: Full time
Work permit: We sponsor H1B VISA
Contact: A*******[email protected]
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f********e
发帖数: 33 | 42 Post for a friend's company:
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l*********u
发帖数: 1660 | 43 这个不是诈骗或者勒索信。这个官方称作Cease and Desist Letter,我原来提醒过大家
，一般由软件manufacturer，或者是SIIA和BSA代表manufacturer发出。
他要求你停止你一切曾经做过的贩卖软件的事情，如果再发现，就会采取进一步法律手
段。在某种角度上说，你收到这封信是好事情。有些人在没有收到这封信的情况下直接
就被告了。
Good luck. |
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m*****o
发帖数: 2578 | 46 【 以下文字转载自 ebiz 讨论区 】
发信人: lanlandezhu (懒懒的猪（家有小小朱）), 信区: ebiz
标 题: 几点补充
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Jan 30 14:05:17 2010, 美东)
这次说完不再多说了。
1. 本身redeem free upgrade没有任何法律问题，你只要有你买的eligible的电脑，
redeem再多也可以，
2. 这个不同于普通的OEM软件，free redemption的微软把它归于和educational 同一
级别的，微软律师团除了防盗版以外的重点，
3. MS和BSA每天有人盯着ebay, 大多数情况MS直接让ebay remove你listing。如果你的
listing长期没被Remove，那我告诉你，你危险了。MS故意不让ebay remove的。微软经
常自己买一些东西，普通情况下微软都是买2-3本。做为取证用。这个内幕是从我一个
关系很好的软件商口中出来的，这个是MS VP of the OEM software告诉他的。
美国司法在我眼中完全是假公正，都是为大公司服务的幌子。老Ｅ说的那 |
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c**t
发帖数: 2889 | 47 二手交易风险自负！请自行验证是否合法和一手卡！:
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HP officejet wireless 6500
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f********e
发帖数: 33 | 48 Post for a friend's company:
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t****2
发帖数: 125 | 50 手机不好贴链接啊
Evan Burfield, Co-founder, 1776; Maury Blackman, President & Chief Executive
Office, Accela; Khaled Naim, Co-founder & Chief Executive Officer, Addy Inc
.; Darrell Ford, Chief Human Resources Officer, Advanced Micro Devices (AMD)
; Pankaj Jindal, Chief Operating Officer, Akraya Inc.; Hannah Kain, Chief
Executive Officer , ALOM; Eric Davidson, President, American Automation &
Communications, Inc.; David A. Raymond, President & Chief Executive Officer,
American Council of Engineering Co... 阅读全帖 |
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