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对了, www.cid.csic.es/homes/roca/TOPOII.html关于做ligation时insert/vector的ratio的疑问
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s***e
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是环状DNA分子构成. 分子在室温下的溶液里热运动.
分子的拓扑状态有几种: 1. 是否纽结; 2. DNA分子的两条链互相缠绕的圈数;
3. 是否有多个DNA圈套在一起.
拓扑状态的热力学平衡态分布有几种办法可以达到:
1. Ligation反应. 大概就是一开始让DNA非闭合,反应后闭合;
2. 依靠酶的帮助. 一种叫作TOPO I, 它剪断双链中的一根, 让另外一根穿越,然后在缝
好. 显然这个反应可以改变缠绕数; TOPO II---剪段双链, 自身穿越后才缝好. 这个
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