问个蛋白的实验问题 - Biology版 - 未名存档

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Biology版 - 问个蛋白的实验问题

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x*****y 发帖数: 118	1 现在有个20kD的蛋白怀疑在小分子ligand 作用下形成homodimer. 有晶体结构这个蛋白没有ligand 的话是monomer 请问怎么确定在溶液里也是dimer? 试过 size-exclusion column, NMR, ITC. 结果都不明确
t*******o 发帖数: 516	2 analytical ultracentrifugation SEC-MALS DLS etc. 【在 x*****y 的大作中提到】 : 现在有个20kD的蛋白怀疑在小分子ligand 作用下形成homodimer. 有晶体结构 : 这个蛋白没有ligand 的话是monomer : 请问怎么确定在溶液里也是dimer? : 试过 size-exclusion column, NMR, ITC. 结果都不明确
a********g 发帖数: 558	3 size-exclusion column结果不明确可能是你的column选的不正确，用高分辨率的就可以
g*****n 发帖数: 250	4 走个native电泳和SDS-PAGE 一对比就看出来了。
n******7 发帖数: 12463	5 可以试试先做crosslinking 在做size-exclusion column SDS-PAGE啥的另外，还可以试试电镜
l****y 发帖数: 398	6 增加蛋白和ligand浓度，降温，减少溶液离子强度 [在 xdrfvgy (xc) 的大作中提到：] ：现在有个20kD的蛋白怀疑在小分子ligand 作用下形成homodimer. 有晶体结构：这个蛋白没有ligand 的话是monomer ：...........

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