请教crispr HDR的模板能直接放在px469载体上吗？ - Biology版 - 未名存档

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Biology版 - 请教crispr HDR的模板能直接放在px469载体上吗？

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r***e 发帖数: 2539	1 就是将修复模板（800bp）放在同一个载体上，比如px459-puro的Not1位点？我看标准的protocol需要将修复模板线性化，这个重要吗？先谢谢了！
j****n 发帖数: 3370	2 线性片断HR效率高放在template也可行至少我们在yeast做是可以的效率差一些需要很高的plasmid copy number才能实现100%敲除【在 r***e 的大作中提到】 : 就是将修复模板（800bp）放在同一个载体上，比如px459-puro的Not1位点？ : 我看标准的protocol需要将修复模板线性化，这个重要吗？ : 先谢谢了！
r***e 发帖数: 2539	3 谢谢，那就分开算了。做点突变Knockin，没什么好的筛选方法，只能引入酶切位点做鉴定用，看来得慢慢挑克隆了。【在 j****n 的大作中提到】 : 线性片断HR效率高 : 放在template也可行至少我们在yeast做是可以的效率差一些需要很高的plasmid : copy number才能实现100%敲除

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