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Biology版 - 请教overexpress tagged protein要不要加linker
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相关话题的讨论汇总
话题: linker话题: protein话题: tagged话题: 要加
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z*t
发帖数: 863
1
现在实验要过表达一个protein,做Co-IP& ChIP因为没有好的antibody,要在蛋白前加
tag sequence,现在有个问题是要不要在tag和orf之间加linker sequence,大家有没
有什么建议?
s****9
发帖数: 932
2
看什么protein和什么tag了。Flag我一般不加,Fc我一般加4-5个aa

【在 z*t 的大作中提到】
: 现在实验要过表达一个protein,做Co-IP& ChIP因为没有好的antibody,要在蛋白前加
: tag sequence,现在有个问题是要不要在tag和orf之间加linker sequence,大家有没
: 有什么建议?

z*t
发帖数: 863
3
大牛那myc tag呢?
要过表达protein比较大(150kd)左右,一般要不要加?

【在 s****9 的大作中提到】
: 看什么protein和什么tag了。Flag我一般不加,Fc我一般加4-5个aa
g*r
发帖数: 67
4
为什么要加呢?
要是不放心,干脆制两个:一个加,一个不加。

【在 z*t 的大作中提到】
: 大牛那myc tag呢?
: 要过表达protein比较大(150kd)左右,一般要不要加?

z*t
发帖数: 863
5
担心不加会影响抗体对tag的识别,大牛帮忙解惑:)

【在 g*r 的大作中提到】
: 为什么要加呢?
: 要是不放心,干脆制两个:一个加,一个不加。

j****n
发帖数: 3370
6
生物比较大的问题之一就是不确定性
很多东西是没法预先知道的
以其担心这担心那 还不如两个都试下
无非是多一个cloning的问题。。。

★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.7

【在 z*t 的大作中提到】
: 担心不加会影响抗体对tag的识别,大牛帮忙解惑:)
i***l
发帖数: 1656
7
对,you never know
所以得多做 做出来什么就是什么,拿嘴说没用

【在 j****n 的大作中提到】
: 生物比较大的问题之一就是不确定性
: 很多东西是没法预先知道的
: 以其担心这担心那 还不如两个都试下
: 无非是多一个cloning的问题。。。
:
: ★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.7

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