C*******e
发帖数: 4348 | 1 纯化的蛋白看起来好像跟DnaJ结合成了complex
Gel Filtration上单峰洗脱
下来是目标蛋白还有DnaJ (~37 kDa)
有没有什么trick可以去除DnaJ?
先谢过 |
b******n
发帖数: 4225 | 2 http://molbiol.ru/forums/index.php?act=Attach&type=post&id=1057
【在 C*******e 的大作中提到】
: 纯化的蛋白看起来好像跟DnaJ结合成了complex
: Gel Filtration上单峰洗脱
: 下来是目标蛋白还有DnaJ (~37 kDa)
: 有没有什么trick可以去除DnaJ?
: 先谢过
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C*******e
发帖数: 4348 | 3 先谢过
不过这个是去除DnaK的
我很久以前就拜读过这篇文章并且用过5 mM ATP的trick
这次也有用5 mM ATP外加Mg++的trick，
GroEL/ES的问题是解决了
但还有37 kDa左右可能是DnaJ也可能是GrpE的杂带
【在 b******n 的大作中提到】
: http://molbiol.ru/forums/index.php?act=Attach&type=post&id=1057
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b******n
发帖数: 4225 | 4 嗯，一般DnaK和DnaJ是一起的，用ATP/Mg++也许见效
实在不行试试denatured soluble protein或者glycerol等偏方
而GroEL用ATP/Mg++比较好解决
【在 C*******e 的大作中提到】
: 先谢过
: 不过这个是去除DnaK的
: 我很久以前就拜读过这篇文章并且用过5 mM ATP的trick
: 这次也有用5 mM ATP外加Mg++的trick，
: GroEL/ES的问题是解决了
: 但还有37 kDa左右可能是DnaJ也可能是GrpE的杂带
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C*******e
发帖数: 4348 | 5 谢谢！
【在 b******n 的大作中提到】
: 嗯，一般DnaK和DnaJ是一起的，用ATP/Mg++也许见效
: 实在不行试试denatured soluble protein或者glycerol等偏方
: 而GroEL用ATP/Mg++比较好解决
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