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Biology版 - 技术问题求教:western blot上放入同量的蛋白,但是blot结果现实,band的intensity不 一样
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问一个loading control的问题,谢谢比较不同基因在同一和不同细胞系中的表达量————qPCR结果要怎样分析
western比较一个蛋白含量,上样怎么控制?用细胞核蛋白做WB,可以用b-actin做内参不?
有人知道做synaptic protein 的western blot 用什么loading control 好,actin or tubulin 还是无所谓?请问一个WB的内参问题
western blot 的问题求教qPCR normalization gene 选择
脂肪组织提取的蛋白做western为啥跟火箭一样?有啥办法改进?Cannot get beta-actin, Why?
(求助)western blot GAPDH two bands?求教:一个关于 actin 的western blot的问题
肝脏,脂肪组织Western blot大家都用什么Loading control呀?为何细胞在药物作用后Actin band消失
求推荐beta-tubulin ANTIBODY in mouse heart tissue18S rRNA做内参的问题
相关话题的讨论汇总
话题: 同量话题: blot话题: 蛋白话题: bca话题: intensity
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a*****i
发帖数: 1045
1
用的是human monocytes细胞,同量的蛋白,但是结果发现loading control,还有其
他一些unspecific band的intensity完全不一样,感觉蛋白质不等量。
用的是BCA 测量蛋白的浓度。
同实验室其他的人说是因为本身的细胞有很多死掉的,所以导致即使放入同量的蛋
白,最后WB之后还是发现蛋白量不一样。
s******s
发帖数: 1584
2
挺正常的,我都是按BCA 走一遍ACTIN 或者GAPDH 再按loading control 再RUN 一遍
a*****i
发帖数: 1045
3
什么叫按loading control 再run 一遍呢?

【在 s******s 的大作中提到】
: 挺正常的,我都是按BCA 走一遍ACTIN 或者GAPDH 再按loading control 再RUN 一遍
j******9
发帖数: 128
4
First you detect you sample using BCA.
Then you need adjust your samples accoring to the concentration and run gel
for hybridizing actin.
Finally you adjust your samples again according the different density of
action.
That is all
a*****i
发帖数: 1045
5
谢谢

gel

【在 j******9 的大作中提到】
: First you detect you sample using BCA.
: Then you need adjust your samples accoring to the concentration and run gel
: for hybridizing actin.
: Finally you adjust your samples again according the different density of
: action.
: That is all

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18S rRNA做内参的问题脂肪组织提取的蛋白做western为啥跟火箭一样?有啥办法改进?
GAPDH的Ct值在30以上,这结果还可靠不?(求助)western blot GAPDH two bands?
求救: 检测蛋白的方法肝脏,脂肪组织Western blot大家都用什么Loading control呀?
Re: northern blotting problem求推荐beta-tubulin ANTIBODY in mouse heart tissue
问一个loading control的问题,谢谢比较不同基因在同一和不同细胞系中的表达量————qPCR结果要怎样分析
western比较一个蛋白含量,上样怎么控制?用细胞核蛋白做WB,可以用b-actin做内参不?
有人知道做synaptic protein 的western blot 用什么loading control 好,actin or tubulin 还是无所谓?请问一个WB的内参问题
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