b******s 发帖数: 1089 | 1 Kit好用,但是很贵。一个盒子里没几个柱子。
我要做BIFC,有很多组合,需要提很多plasmids。想自己提纯。网上搜了一些protocol
,基本上都是盐沉淀之后酚氯仿纯化。试过发现转染效率都极低。我用的系统是植物的
protoplasts,有实验室用CsCL离心效果很好。想问问有没有更清洁安全的protocol?
谢谢 |
h******y 发帖数: 351 | 2 I have used the protocol in this paper. It worked really well.
http://www.plosone.org/article/info:doi/10.1371/journal.pone.00
A Rapid and Economic In-House DNA Purification Method Using Glass Syringe Fi
lters
protocol
【在 b******s 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : Kit好用,但是很贵。一个盒子里没几个柱子。 : 我要做BIFC,有很多组合,需要提很多plasmids。想自己提纯。网上搜了一些protocol : ,基本上都是盐沉淀之后酚氯仿纯化。试过发现转染效率都极低。我用的系统是植物的 : protoplasts,有实验室用CsCL离心效果很好。想问问有没有更清洁安全的protocol? : 谢谢
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J****n 发帖数: 156 | 3 Try this.
Protocol: a rapid and economical procedure for purification of plasmid or
plant DNA with diverse applications in plant biology
Plant Methods 2010, 6:1 doi:10.1186/1746-4811-6-1
protocol
【在 b******s 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : Kit好用,但是很贵。一个盒子里没几个柱子。 : 我要做BIFC,有很多组合,需要提很多plasmids。想自己提纯。网上搜了一些protocol : ,基本上都是盐沉淀之后酚氯仿纯化。试过发现转染效率都极低。我用的系统是植物的 : protoplasts,有实验室用CsCL离心效果很好。想问问有没有更清洁安全的protocol? : 谢谢
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b***2 发帖数: 348 | 4 我用过清华谢振华的 用于哺乳动物细胞转染的高纯度 质粒 DNA 的制备 的方案,拿到
一大堆用于转染的质粒,花的时间长点,但便宜。
:Try this.
:
:Protocol: a rapid and economical procedure for purification of plasmid or
:plant DNA with diverse applications in plant biology
:Plant Methods 2010, 6:1 doi:10.1186/1746-4811-6-1
:
:【 在 boulders (walnut) 的大作中提到: 】
……
【在 J****n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : Try this. : Protocol: a rapid and economical procedure for purification of plasmid or : plant DNA with diverse applications in plant biology : Plant Methods 2010, 6:1 doi:10.1186/1746-4811-6-1 : : protocol
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b******s 发帖数: 1089 | 5 非常感谢。我在公司主页看不到价格,能否告知Glass Syringe filters的价格?
Fi
【在 h******y 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : I have used the protocol in this paper. It worked really well. : http://www.plosone.org/article/info:doi/10.1371/journal.pone.00 : A Rapid and Economic In-House DNA Purification Method Using Glass Syringe Fi : lters : : protocol
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b******s 发帖数: 1089 | 6 我以前也看到过。他们只用2ml的mini-prep,最后几个ul elute,然后做protoplasts
的转染,文章里说有70%的转染率。不知道你有没有试过?转染效率是否有这么高?我
要做BIFC,需要相对高的转染效率。谢谢
【在 J****n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : Try this. : Protocol: a rapid and economical procedure for purification of plasmid or : plant DNA with diverse applications in plant biology : Plant Methods 2010, 6:1 doi:10.1186/1746-4811-6-1 : : protocol
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h******y 发帖数: 351 | 7 I bought it from VWR.
https://us.vwr.com/store/catalog/product.jsp?catalog_number=28143-986
Case of 200 $284.91
Each filter has a binding capacity of about 100-150ug plasmid. You can use
several filters as shown in Figure 1 in the paper for maxiprep.
【在 b******s 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 非常感谢。我在公司主页看不到价格,能否告知Glass Syringe filters的价格? : : Fi
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c********b 发帖数: 363 | 8 其实我就用的Midi,抽一次可以用15个样。
而且,柱子还可以放在4度反复用(对同一个construct
midi一个kit要多好多柱子,而且我都是用的100ml的菌液
protocol
【在 b******s 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : Kit好用,但是很贵。一个盒子里没几个柱子。 : 我要做BIFC,有很多组合,需要提很多plasmids。想自己提纯。网上搜了一些protocol : ,基本上都是盐沉淀之后酚氯仿纯化。试过发现转染效率都极低。我用的系统是植物的 : protoplasts,有实验室用CsCL离心效果很好。想问问有没有更清洁安全的protocol? : 谢谢
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J****n 发帖数: 156 | 9 我scale up他们的protocol for 100 ml菌液。work得很好,也很容易。
protoplasts
【在 b******s 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我以前也看到过。他们只用2ml的mini-prep,最后几个ul elute,然后做protoplasts : 的转染,文章里说有70%的转染率。不知道你有没有试过?转染效率是否有这么高?我 : 要做BIFC,需要相对高的转染效率。谢谢
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L*****e 发帖数: 135 | |
b******s 发帖数: 1089 | |
b******s 发帖数: 1089 | 12 请问这是回哪一贴?
【在 L*****e 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 销量只是一般
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