s*********y
发帖数: 387 | 1 很多人遇到过 大提的时候 产量很低 虽然有1。87到1。93的质量控制指标，但是获得
的浓度偏低
比如 1毫升 浓度在 150ng/ul
我的经验是，可以使用 3k 或者10 k的filter, 10分钟的离心，你就可以得到 100ul的
浓度在
1000ng/ul的高浓度DNA
作为一般的真核细胞 转染 使用 足够了 |
a********n
发帖数: 844 | 2 我用midi prep kit，100ml culture可以提出来500 ul of 600ng/ul，这产量也算正常
吧 |
S**********e
发帖数: 1789 | 3 什么是3 k 和 10 k filter？
【在 s*********y 的大作中提到】
: 很多人遇到过 大提的时候 产量很低 虽然有1。87到1。93的质量控制指标，但是获得
: 的浓度偏低
: 比如 1毫升 浓度在 150ng/ul
: 我的经验是，可以使用 3k 或者10 k的filter, 10分钟的离心，你就可以得到 100ul的
: 浓度在
: 1000ng/ul的高浓度DNA
: 作为一般的真核细胞 转染 使用 足够了
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C*******e
发帖数: 4348 | 4 说的再具体点？
用3k或10k MWCO的centricon/minicon么？
上样是什么？裂解、蛋白沉淀以后的上清？ |
c*********r
发帖数: 1312 | |
s*********y
发帖数: 387 | 6 是的，这个浓度和体积算是很好了
【在 a********n 的大作中提到】
: 我用midi prep kit，100ml culture可以提出来500 ul of 600ng/ul，这产量也算正常
: 吧
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s*********y
发帖数: 387 | 7 用3k或10k MWCO的centricon/minicon么
回答是 是的
上扬的是最终的 TE elutions
【在 C*******e 的大作中提到】
: 说的再具体点？
: 用3k或10k MWCO的centricon/minicon么？
: 上样是什么？裂解、蛋白沉淀以后的上清？
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s*********y
发帖数: 387 | |
