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Biology版 - 如何建立cDNA library?
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b********2
发帖数: 125
1
希望clone一段Eukaryote organism gene到其他的方便表达的receptor hosts.
查到有个kit, Superscript Plasmid system with Gateway for cDNA synthesis and
cloning. 是个好的选择吗?
这个kit里面用到了32P-dCTP,不用可以吗?有什么其他方法一样可以计算yield和size
?比如为什么不用nanodrop?
万分感谢!
l******g
发帖数: 1623
2
不是学生物的吧?这需要写本书来教你这些了。问问实验室师姐师兄什么的会快很多

and
size

【在 b********2 的大作中提到】
: 希望clone一段Eukaryote organism gene到其他的方便表达的receptor hosts.
: 查到有个kit, Superscript Plasmid system with Gateway for cDNA synthesis and
: cloning. 是个好的选择吗?
: 这个kit里面用到了32P-dCTP,不用可以吗?有什么其他方法一样可以计算yield和size
: ?比如为什么不用nanodrop?
: 万分感谢!

g*****n
发帖数: 250
3
看上去是还没入门。想自己甩开膀子开一片天地还不行。
1。要克隆一个基因不必建一个库。
2。用哪个KIT,取决于你下一步要干什么。
3。不知道32P-dCTP是干嘛用的,那还要上课。
4。nanodrop只是个机器,能测yield, 不能测size。
b********2
发帖数: 125
4
不是学生物的。
学长有什么这方面的书可以推荐吗?简单明了的最好,多谢指点

【在 l******g 的大作中提到】
: 不是学生物的吧?这需要写本书来教你这些了。问问实验室师姐师兄什么的会快很多
:
: and
: size

b********2
发帖数: 125
5
多谢指点。现在还完全没有入门
克隆的那个基因序列和表达的蛋白序列是可以知道的,但是因为有内含子,所以考虑到
了cDNA.是说建立库是不必要,简单的方法就是用primer amplify想要的那段基因最直
接?那么建立cDNA库和得到一部分的cDNA在操作上有很大差别吗?

【在 g*****n 的大作中提到】
: 看上去是还没入门。想自己甩开膀子开一片天地还不行。
: 1。要克隆一个基因不必建一个库。
: 2。用哪个KIT,取决于你下一步要干什么。
: 3。不知道32P-dCTP是干嘛用的,那还要上课。
: 4。nanodrop只是个机器,能测yield, 不能测size。

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