s********9 发帖数: 132 | 1 问个问题:
很多研究说明PTM可以调节酶的活性(比如磷酸化可以激活很多激酶).
但是这些往往是细胞内的结果,看这个酶的活性. 但是直接的生化证据呢.
有没有了解的给说说?
尤其是如果体外把E.Coli 表达的蛋白(酶)进行体外人为PTM之后, 再测这个酶的活性,
很多
时候可能有构象的问题, 从而体外修饰的酶不比未修饰的酶更有活性. 这个问题大概怎
么解决(有无这样的文献)?怎么能够帮助这个体外的蛋白重新折叠从而使得人为加上的
修饰发挥作用(有无这样的文献)? |
b******y 发帖数: 627 | 2 huge literature on all of your questions. get a good review on each and go
from there. |
s********9 发帖数: 132 | 3 光是看看abstract,好多文章还都claim这个了,可是一看证据还真不是那么回事.
麻烦你给贴一个吧?谢谢.
【在 b******y 的大作中提到】 : huge literature on all of your questions. get a good review on each and go : from there.
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l********g 发帖数: 19 | 4 请看管坤良早年的工作 GST-Mek,GST-Erk... etc. 有很多。 |
s********9 发帖数: 132 | 5 我后来还真是找到了一个磷酸化激活激酶的这种实验.
不知道有无其他的PTM(Ac,Sumo,Ubi等)有这种solid的生化证据的.
【在 l********g 的大作中提到】 : 请看管坤良早年的工作 GST-Mek,GST-Erk... etc. 有很多。
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s********9 发帖数: 132 | 6 非常感谢.
【在 l********g 的大作中提到】 : 请看管坤良早年的工作 GST-Mek,GST-Erk... etc. 有很多。
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b******y 发帖数: 627 | 7 Almost all kinases have an activation loop. Phosphorylation of the
activation loop is required for their activity. Many cases of kinase, they
auto-phosphorylate themselves in trans. That is why you have incubate the
kinase in the reaction buffer before it shows up any activity.
【在 s********9 的大作中提到】 : 我后来还真是找到了一个磷酸化激活激酶的这种实验. : 不知道有无其他的PTM(Ac,Sumo,Ubi等)有这种solid的生化证据的.
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b******y 发帖数: 627 | 8 The same holds true for many acetyltransferases although understudied. That
is to say, many acetyltransferases are acetylated around their active center
or substrate recognition pocket to be active. |