A******d
发帖数: 571 | 1 我的一个细胞系，用药物处理之后annexinV/PI染色作facs,annexinV+/PI+（necrosis)
的增多，但是annexinV+/PI-(apoptosis)的没有变化，可是我的microarray结果显示很
多和apoptosis相关的基因上调了。如果说药物作用时间太长导致apoptotic的necrotic
,那我处理4小时也是同样的结果。
请问，会不会apoptosis 在某些细胞里就会引起细胞膜破裂？ |
i*******n
发帖数: 48 | 2 这种情况应该是Necrosis
你最好加Caspase inhibitor block apoptosis，再看PI+有没有变化。
很多时候的death是mixed form.
microarray不能说明什么问题，因为所谓的apoptosis相关的基因不是那么绝对的。
另外一个就是看细胞形态，necrosis能看到细胞破裂。
Good Luck.
necrosis)
necrotic
【在 A******d 的大作中提到】
: 我的一个细胞系，用药物处理之后annexinV/PI染色作facs,annexinV+/PI+（necrosis)
: 的增多，但是annexinV+/PI-(apoptosis)的没有变化，可是我的microarray结果显示很
: 多和apoptosis相关的基因上调了。如果说药物作用时间太长导致apoptotic的necrotic
: ,那我处理4小时也是同样的结果。
: 请问，会不会apoptosis 在某些细胞里就会引起细胞膜破裂？
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z*****i
发帖数: 28 | 3 降低药物浓度试试。
necrosis)
necrotic
【在 A******d 的大作中提到】
: 我的一个细胞系，用药物处理之后annexinV/PI染色作facs,annexinV+/PI+（necrosis)
: 的增多，但是annexinV+/PI-(apoptosis)的没有变化，可是我的microarray结果显示很
: 多和apoptosis相关的基因上调了。如果说药物作用时间太长导致apoptotic的necrotic
: ,那我处理4小时也是同样的结果。
: 请问，会不会apoptosis 在某些细胞里就会引起细胞膜破裂？
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q******g
发帖数: 3858 | |
s******a
发帖数: 472 | 5 凋亡晚期不也是双阳性吗？同意LS建议降低浓度
necrosis)
necrotic
【在 A******d 的大作中提到】
: 我的一个细胞系，用药物处理之后annexinV/PI染色作facs,annexinV+/PI+（necrosis)
: 的增多，但是annexinV+/PI-(apoptosis)的没有变化，可是我的microarray结果显示很
: 多和apoptosis相关的基因上调了。如果说药物作用时间太长导致apoptotic的necrotic
: ,那我处理4小时也是同样的结果。
: 请问，会不会apoptosis 在某些细胞里就会引起细胞膜破裂？
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s****l
发帖数: 395 | 6 做个activated caspase + PI的flow比较准
necrosis)
necrotic
【在 A******d 的大作中提到】
: 我的一个细胞系，用药物处理之后annexinV/PI染色作facs,annexinV+/PI+（necrosis)
: 的增多，但是annexinV+/PI-(apoptosis)的没有变化，可是我的microarray结果显示很
: 多和apoptosis相关的基因上调了。如果说药物作用时间太长导致apoptotic的necrotic
: ,那我处理4小时也是同样的结果。
: 请问，会不会apoptosis 在某些细胞里就会引起细胞膜破裂？
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A******d
发帖数: 571 | 7 我做过很多次caspase-3的western blot,从来没有看到和control的区别，包括用高浓
度的药物和staurosporin，以及从2小时到4天.所以这让我怀疑可能我的细胞的确没有
apoptosis，至少在我的药物处理下。观察方面，通常能看到细胞变圆开始脱壁，但是
从来没有发现细胞破裂的，好像在破裂之前都已经detach了。
【在 i*******n 的大作中提到】
: 这种情况应该是Necrosis
: 你最好加Caspase inhibitor block apoptosis，再看PI+有没有变化。
: 很多时候的death是mixed form.
: microarray不能说明什么问题，因为所谓的apoptosis相关的基因不是那么绝对的。
: 另外一个就是看细胞形态，necrosis能看到细胞破裂。
: Good Luck.
:
: necrosis)
: necrotic
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A******d
发帖数: 571 | |
a*****g
发帖数: 25 | 9 同意楼上说的降低浓度。
另外，不知楼主用的什么细胞？文献里有没有诱导这种细胞凋亡的报道？
如果有的话可以做个正对照。
还可以试试别的检测凋亡的方法：TUNEL、PARP等 |
