谁给讲一下荧光信号吧 - Biology版 - 未名存档

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Biology版 - 谁给讲一下荧光信号吧

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话题: 荧光话题: mrfp话题: 信号话题: q66t话题: emission

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B****r 发帖数: 647	1 要读取荧光信号的话，设置的excitation和emission应该不是那个maximum值吧？要用一个mRFP突变体Q66T，不知道怎么查这两个值，谢谢啦
b******s 发帖数: 1089	2 如果你使用的是一般的laser scanning confocal的话，根据laser source的不同，有几种固定波长的laser，可以选择。即使不是正好在所谓的maximum上，前后一定范围内的也是很好用的。488nm既可以激发GFP，也可以很好的激发YFP。你可以设置搜集的 emission的波长，尤其是有两种颜色的荧光的时候。 mRFP和mCherry等都是从最早的DsRed改造过来的。m代表他们大多是单体（我印象里是这样的），因为dsRed很容易形成四聚体。但是经过改造之后，excitation和emission 都有所变化。但是基本上580nm/610nm都可以很好用。mCherry荧光强度最高，但是mRFP 也很不错。怎么查？google就可以了。虽然mRFP有很多突变体，Q66M或者是你的Q66T等，主要是促进了蛋白折叠成熟，用580nm/610nm应该没问题。【在 B****r 的大作中提到】 : 要读取荧光信号的话，设置的excitation和emission应该不是那个maximum值吧？ : 要用一个mRFP突变体Q66T，不知道怎么查这两个值，谢谢啦
y******n 发帖数: 8667	3 You don't need select the peaks. But if you can, why not? 【在 B****r 的大作中提到】 : 要读取荧光信号的话，设置的excitation和emission应该不是那个maximum值吧？ : 要用一个mRFP突变体Q66T，不知道怎么查这两个值，谢谢啦

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