y*********u
发帖数: 183 | 1 很多commercial CMV driven 的plasmid能做到用IRES drive上游下游基因同时表达，
但很多文章里似乎说到如果把IRES knock in到内源基因的EXON，上游基因表达就会被
抑制(但也有说会增强的……) ， 雾水了 |
b******e
发帖数: 3348 | |
y*********u
发帖数: 183 | |
V********n
发帖数: 305 | |
y*********u
发帖数: 183 | 5 有搜到文章给出这类结论，会不会增强我不管了，不知道会不会减弱上游基因表达。
这似乎很有可能，因为IRES driven translation是5'3'cap/tail结构independent的
【在 V********n 的大作中提到】
: 为什么IRES会增加上游基因表达？
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V********n
发帖数: 305 | 6 IRES的调控是translation水平上的。
还是不明白LZ的意思，如果mRNA的结构是cap-gene1-IRES-gene2-3UTR，gene1的翻译可
能被抑制，IRES一般含有stem loop高级结构，会阻碍translation elongation。如果
cap-gene1-3UTR, IRES-gene1-3UTR是两个独立的mRNA,gene1的表达不太可能被抑制，
因为IRES的翻译效率很低。
另外IRES不完全是3-tail independent。是否就完全5cap independent，我觉得也不好
讲。IRES只是说ribosom loading不需要cap（其实这个概念本身就问题多多），cap的
作用不限于ribosom entry，还包括mRNA 稳定等。 |
g*********5
发帖数: 2533 | 7 gene 1 need 3'utr?
I just put two orf in pIRES plasmid... |
