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Biology版 - gateway help
相关主题
大家现在构建质粒,都用什么办法?有没有人用过villin-delta ATG这个载体?
请问一个gateway clone问题请教一个非常规实验(大载体连接)手段是否可行
再问gateway cloning问个质粒兼容的问题
菜鸟定向克隆求助,谢谢~大家交流一下作大载体的经验吧。
BioBrick使用疑问问个克隆问题
有没有人用multisite gateway做克隆的?问一个病毒载体的问题
sub-cloning真是揪心啊三个片段连接的问题
CLONING请问大家是怎么带质粒载体等回国或进美国的
相关话题的讨论汇总
话题: gateway话题: clone话题: positive话题: 质粒话题: 片断
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r****7
发帖数: 220
1
clone 长满板,pcr check 20% positive, 提质粒酶切 10%对的,累死我了。。。。
有人知道为啥妈?有可能是片断太长吗?clone 少都无所谓,咋这么多假的呢?
r****7
发帖数: 220
2
sigh

【在 r****7 的大作中提到】
: clone 长满板,pcr check 20% positive, 提质粒酶切 10%对的,累死我了。。。。
: 有人知道为啥妈?有可能是片断太长吗?clone 少都无所谓,咋这么多假的呢?

X******n
发帖数: 914
3
是BP还是LR?可能是你的质粒质量不好,没有了ccdB部分。
b******s
发帖数: 1089
4
我做gateway三片段连接也总是遇到这样的情形。基本都是false positive的。
甚至只有两个片段连到载体上也能长。
但是我的BP反应一般都没什么问题。你的false positive的是丢了ccdB的载体还是连了
别的奇怪的片段?
r****7
发帖数: 220
5
两种都是这种情况,我也觉得可能是这个原因,但是别人没这样....

【在 X******n 的大作中提到】
: 是BP还是LR?可能是你的质粒质量不好,没有了ccdB部分。
r****7
发帖数: 220
6
大小来看不像丢了ccdB的载体。。。。

【在 b******s 的大作中提到】
: 我做gateway三片段连接也总是遇到这样的情形。基本都是false positive的。
: 甚至只有两个片段连到载体上也能长。
: 但是我的BP反应一般都没什么问题。你的false positive的是丢了ccdB的载体还是连了
: 别的奇怪的片段?

t***s
发帖数: 300
7
gateway 插入片断的上限是多大? 搭车问一下。

【在 r****7 的大作中提到】
: clone 长满板,pcr check 20% positive, 提质粒酶切 10%对的,累死我了。。。。
: 有人知道为啥妈?有可能是片断太长吗?clone 少都无所谓,咋这么多假的呢?

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请问大家是怎么带质粒载体等回国或进美国的BioBrick使用疑问
求助个问题:在HSC中可以高表达基因的质粒有没有人用multisite gateway做克隆的?
克隆小贴示。sub-cloning真是揪心啊
质粒提取的困惑CLONING
大家现在构建质粒,都用什么办法?有没有人用过villin-delta ATG这个载体?
请问一个gateway clone问题请教一个非常规实验(大载体连接)手段是否可行
再问gateway cloning问个质粒兼容的问题
菜鸟定向克隆求助,谢谢~大家交流一下作大载体的经验吧。
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