V**F
发帖数: 164 | |
l**********n
发帖数: 201 | |
t*****z
发帖数: 1598 | 3 咳，别提了，我半天没抽出多少东西来，试验过QIAGEN Large-Construct Kit，QIAGEN
Plasmid Mini，Invitrogen PureLink HiPure Kit。产量低且不稳定，关键是要做好
心理准备，细菌要好好养，动作要轻，水要热。最后我们直接把含有BAC的细菌株送到
转基因公司去了。他们说可以免费代替我们纯化。 |
b***g
发帖数: 516 | |
f***4
发帖数: 886 | 5 Qiagen plasmid Midi
严格按照上面说的做，效果非常好
【在 V**F 的大作中提到】
: 大家有没有好用的抽BAC的kit？
: 多谢！
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p****p
发帖数: 3360 | 6 please google these 3 words: bac qiagen midi. First hit.
I've used the protocol for many Bac clones, routinely get more than 100ug/
50ml culture.
【在 V**F 的大作中提到】
: 大家有没有好用的抽BAC的kit？
: 多谢！
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b***g
发帖数: 516 | |
S*****s
发帖数: 287 | 8 何必用 Kit，直接 CsCl 纯化吧。产率高很多，而且样品也很纯。我用 Clontech 的
kit 纯化出来的 BAC，如果再 setup CsCl 的话还能看到有很多杂质和 linear DNA。
【在 V**F 的大作中提到】
: 大家有没有好用的抽BAC的kit？
: 多谢！
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j****g
发帖数: 406 | 9 看你的目的了。如果只是为了做PCR的template,那么很简单，Qiagen kit里的p1, p2,
p3buffer加后直接加isopropanol沉淀，再用ethanol洗两次就可以了。保证不会丢。这
个方法可以在CHORI的网站上找到。
我们实验室一般用来打老鼠，这就需要CsCl纯化。虽然步骤挺多，但是做熟了也很简单
。而且质量会好很多。 |
s*****t
发帖数: 107 | 10 强烈推荐Clontech的BAC100 kit, 我每天都用
【在 V**F 的大作中提到】
: 大家有没有好用的抽BAC的kit？
: 多谢！
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