d****h
发帖数: 4291 | 1 probe1 和probe2 相差三个碱基
蛋白为纯化的原核表达蛋白，上样量如图
probe为生物素3'标记
请教
1、probe2看上去条带sharp是因为这三个碱基造成的么？
2、条带是否sharp是由那些因素决定的？
3、到底是sharp的带结合紧密呢还是不sharp的带紧密？
多谢！ |
a****o
发帖数: 1786 | 2 1。应该是
2。不清楚
3。没关系，紧密程度由衡量， 约等于最低饱和浓度的一半，1和2都可以用更低浓度滴
定， 感觉1亲和力更高
RNA吗？ 可能是形成多种不同的二级结构， 1有两种结构可形成复合物， 2只有一种结
构可形成复合物， |
d****h
发帖数: 4291 | 3 是DNA，30多bp也能形成两种二级结构？
probe 均为20fmol |
T**********t
发帖数: 1604 | 4 30多bp形成好几种二级结构也有可能啊。
你用mfold算过可能形成的二级结构么？
【在 d****h 的大作中提到】
: 是DNA，30多bp也能形成两种二级结构？
: probe 均为20fmol
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a****o
发帖数: 1786 | 5 if you use double strand DNA, it is more likely one or both of single strand
DNA may bind to your protein too. you can test this.
My titration meant to use lower concentration of your protein.
【在 d****h 的大作中提到】
: 是DNA，30多bp也能形成两种二级结构？
: probe 均为20fmol
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d****h
发帖数: 4291 | |
