请问有没有从老鼠组织提过蛋白的？ THX - Biology版 - 未名存档

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Biology版 - 请问有没有从老鼠组织提过蛋白的？ THX

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D******9 发帖数: 2665	1 有没有好的PROTOCOL, 请推荐一下？
D******9 发帖数: 2665	2 没有人知道吗？自己顶一下
f**e 发帖数: 2160	3 蛋白那么多，又不说清楚，谁能帮你哪
D******9 发帖数: 2665	4 Sorry, I need whole cell proteins. Need to do some western blot
S*****s 发帖数: 287	5 我用 15ml RIPA/1mg 脑组织，用 mortar 打碎，离心之后取上清，蛋白浓度一般在 4mg/ml 左右 (Bio-Rad Bradford assay)，做 western 检测膜蛋白效果不错，过程也蛮简单。【在 D******9 的大作中提到】 : Sorry, I need whole cell proteins. Need to do some western blot
D******9 发帖数: 2665	6 do you freeze the sample in liquid nitrogen or -80 first? When you homogenize the tissue, do you also add some liquid nitrogen into it? Thx
S*****s 发帖数: 287	7 我用的老鼠大脑是以前取下来 fresh frozen 的。这样的脑子既可以用来切片也可以用来提蛋白或者 RNA。如果你有新鲜的大脑效果应该更好。如果你只是用来提蛋白可以把冻好的脑组织放在加了 protease inhibitor 的 RIPA 里面解冻，然后在 RIPA 里面 homogenize。你说的那个加液氮粉碎组织的我也做过，不过是把组织粉碎之后提 RNA 用的，那个还要用专门的冷冻好的 mortar pestal，蛋白不需要这么苛刻的条件。

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