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b******y 发帖数: 627 | 3 autoclave, pour waste to the sink, rinse a bit, autoclave again for next
round of use.
e. coli is very robust. why use bleach?? |
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M*P 发帖数: 6456 | 5 【 以下文字转载自 Joke 讨论区 】
发信人: zhonghangyue (中行说), 信区: Joke
标 题: 这些生物学的笑话梗,你都Get到了没?
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Jul 27 09:50:43 2016, 美东)
2016-07-26 微生物研究所 微信号tkwsws
功能介绍
浙江微生物研究所,直属浙江省科技厅,是一家集技术研发、技术服务、成果转化为一
体的研究型技术服务机构。
编辑整理:小静
来源:网络
“啊,雨后的空气,真是清新,让我张开怀抱尽情呼吸吧。”
“那只是放线菌的排泄物”
“今天晒的被子,现在还有阳光的气息。”
“那是烤熟的螨虫。”
“你们搞生物的能不能不要这么毁生活?”
“我还要告诉你真正的玫瑰比月季还要难看几十倍吗?我会告诉你拉面其实很像蛔虫吗
?我会告诉你你吃河蚌其实是吃的人家的生殖腺吗?
“快闭嘴!”
“师妹,你胶配了没有?”
数学是光,点亮物理的灯;
物理是灯,照亮化学的路;
化学是路,通向生物的坑;
生物这个坑,埋葬了我的后半生。
顺我者套袋,逆我者去雄。
分子生物学PhD去超市购物,总价94,他又买了2块钱的东西,心... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 6 以前克隆个基因,序列不是都放在正文figure里嘛。现在冷冻电镜造假昂贵,也就清北
中科院这种地方砸得起钱买,很多公司都买不起,以后便宜了估计很多公司都能买,解
个结构就像DNA测序一样,后基因组时代,估计都不要自己摇菌准备样品,说下基因名
字就可以了。。。 |
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s******y 发帖数: 28562 | 7 对,你说的非常好。关键就是这个接种方法不同。小提一般都是从板上的菌点接种,
而中提是在已经长起来的液体里接种。
其实在板上长的时候因为菌落里面有那个biofilm, 所以只要最底下一层是有抗性的携
带质粒的菌,顶上肯定也就是。而且零星长起来的突变抗性菌没有办法跑过去占他们的
地盘,所以菌种比较单纯。但是在摇的菌液里情况就完全不一样了,突变体很快就能取
代携带质粒的菌体,因为携带质粒其实对于细菌而言就和我们被感染了寄生虫是类似的
,都是个负担。
有一个小窍门就是把一个单克隆挑出来在板上满满的涂一大圈,然后长起来后把整层都
刮下来放到培养液里去再摇个8小时就可以做中提了。 |
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g****t 发帖数: 31659 | 8 《我当阴阳先生的那几年》
第一章 黄米饭
我的名字叫崔作非,胡作非为的作非。.你是不是觉得这个名字有点奇怪,听上去有点像是“崔作废”。其实我也对这个名字很不满意。但是按照家谱上起名字的排序,我这代正好犯了一个“作”字。而且我的父母又没什么文化,听说给我起这个名字的时候着实让他们头疼了一阵子。后来还是我父亲灵光闪现拿出了一本字典,说是翻到哪页就用头一个字当我的名字。说来也巧,翻到的那页上的头一个字正好是个废字。这时我的母亲不干了,谁希望自己的孩子名字叫“作废”呢?她充分的体现出了东北女人的彪悍,说什么也不能让自己的孩子就这么作废了。
于是我的父亲妥协了,他指了指同页的一个非字对我母亲讲,那咱大儿子就叫作非吧。希望他长大后能有一翻非凡的作为。我的名字就这样被草率的定了下来。
接下来我要给你们讲的事,你们完全可以当成故事来听,不用过于认真。
我的家乡叫龙江,属于黑龙江省齐齐哈尔市周边的一个小县城。听我爷爷讲,龙江县以前叫做朱家坎。正所谓庙小妖风大,镇小是非多,就是这样的一个镇子,旁边的林子里居然还住着一伙胡子。家住在东北的朋友们都应该知道胡子是什么,就是土匪,... 阅读全帖 |
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c*******u 发帖数: 12899 | 9 ☆─────────────────────────────────────☆
sweetpanda (sweetpanda) 于 (Thu Jun 7 16:00:14 2012, 美东) 提到:
前些日子,为父亲祈福,谢谢大家。 现在诊断结果出来了。 "得的是细菌性心内膜炎
,主动脉瓣上有赘生物,也就是菌团。情况很危险,一旦赘生物脱落,随时都有生命危
险,需要尽快做手术。这种手术是高风险高难度的" 我们省会城市医院不能做的听说一
般都转到上海、北京大医院去做。 可是父亲刚动完一个外科手术,还在高危病房,不
知道怎样才能转到上海北京大医院。而且他们会接受?我已经36周多了。 不知道姐妹们
有知道这个病或者知道上海北京那个医院做这方面的手术好?能帮我出出主意吗?我哭
了再哭,也无能为力。
谢谢大家的祝福!
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crab789 (土豆) 于 (Thu Jun 7 16:01:42 2012, 美东) 提到:
祝福
☆─────────────────────────────────────... 阅读全帖 |
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j****e 发帖数: 12067 | 10 【 以下文字转载自 Detective 讨论区 】
发信人: guvest (我爱你老婆Anna), 信区: Detective
标 题: 阴阳先生这几年
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jul 19 22:24:29 2011, 美东)
《我当阴阳先生的那几年》
第一章 黄米饭
我的名字叫崔作非,胡作非为的作非。.你是不是觉得这个名字有点奇怪,听上去有点像是“崔作废”。其实我也对这个名字很不满意。但是按照家谱上起名字的排序,我这代正好犯了一个“作”字。而且我的父母又没什么文化,听说给我起这个名字的时候着实让他们头疼了一阵子。后来还是我父亲灵光闪现拿出了一本字典,说是翻到哪页就用头一个字当我的名字。说来也巧,翻到的那页上的头一个字正好是个废字。这时我的母亲不干了,谁希望自己的孩子名字叫“作废”呢?她充分的体现出了东北女人的彪悍,说什么也不能让自己的孩子就这么作废了。
于是我的父亲妥协了,他指了指同页的一个非字对我母亲讲,那咱大儿子就叫作非吧。希望他长大后能有一翻非凡的作为。我的名字就这样被草率的定了下来。
接下来我要给你们讲的事,你们完全可以当成故事来... 阅读全帖 |
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j****e 发帖数: 12067 | 11 【 以下文字转载自 Detective 讨论区 】
发信人: guvest (我爱你老婆Anna), 信区: Detective
标 题: 阴阳先生这几年
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jul 19 22:24:29 2011, 美东)
《我当阴阳先生的那几年》
第一章 黄米饭
我的名字叫崔作非,胡作非为的作非。.你是不是觉得这个名字有点奇怪,听上去有点像是“崔作废”。其实我也对这个名字很不满意。但是按照家谱上起名字的排序,我这代正好犯了一个“作”字。而且我的父母又没什么文化,听说给我起这个名字的时候着实让他们头疼了一阵子。后来还是我父亲灵光闪现拿出了一本字典,说是翻到哪页就用头一个字当我的名字。说来也巧,翻到的那页上的头一个字正好是个废字。这时我的母亲不干了,谁希望自己的孩子名字叫“作废”呢?她充分的体现出了东北女人的彪悍,说什么也不能让自己的孩子就这么作废了。
于是我的父亲妥协了,他指了指同页的一个非字对我母亲讲,那咱大儿子就叫作非吧。希望他长大后能有一翻非凡的作为。我的名字就这样被草率的定了下来。
接下来我要给你们讲的事,你们完全可以当成故事来... 阅读全帖 |
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g****t 发帖数: 31659 | 12 【 以下文字转载自 Detective 讨论区 】
发信人: guvest (我爱你老婆Anna), 信区: Detective
标 题: 阴阳先生这几年
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jul 19 22:24:29 2011, 美东)
《我当阴阳先生的那几年》
第一章 黄米饭
我的名字叫崔作非,胡作非为的作非。.你是不是觉得这个名字有点奇怪,听上去有点像是“崔作废”。其实我也对这个名字很不满意。但是按照家谱上起名字的排序,我这代正好犯了一个“作”字。而且我的父母又没什么文化,听说给我起这个名字的时候着实让他们头疼了一阵子。后来还是我父亲灵光闪现拿出了一本字典,说是翻到哪页就用头一个字当我的名字。说来也巧,翻到的那页上的头一个字正好是个废字。这时我的母亲不干了,谁希望自己的孩子名字叫“作废”呢?她充分的体现出了东北女人的彪悍,说什么也不能让自己的孩子就这么作废了。
于是我的父亲妥协了,他指了指同页的一个非字对我母亲讲,那咱大儿子就叫作非吧。希望他长大后能有一翻非凡的作为。我的名字就这样被草率的定了下来。
接下来我要给你们讲的事,你们完全可以当成故事来... 阅读全帖 |
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p**u 发帖数: 61 | 13 2017/1/1 新年快乐
祝你新年快乐,亲爱的肚肚。
2017/1/2 恍恍惚惚的一天
想起鲁迅写过的一首古体诗:
灵台无计逃神矢,
风雨如磐黯故园。
寄意寒星荃不查,
我以我血荐轩辕。
我记忆力差强人意,但这首诗读过好些年头了,一直记得。
要命的是,记了这么些年,却不懂得。
2017/1/3 恐惧还是孤独
一连在外面跑了两三天,实在累得要瘫掉的样子,日志也马马虎虎只是应付,
昨晚上一回到家,靠着沙发就想睡死过去,被逮起来吃饭,又强忍着洗了锅
碗,一脱衣服,就睡得啥也不知道了。
平时我们睡得都比较晚,偶尔看看书, 偶尔说说话,大部分时候各玩各的手
机,但基本上都是同时入睡的。昨天实在太累,就没理她,所以不知道她竟然
一直盯着我看。天亮后她说她看着看着,就浑身发抖,直出汗,因为太害怕
了,太孤独了。
我以为她的意思是看我的脸太可怕了,再问,才明白她在说生小孩的事。她说
她看着呼呼大睡的我,却在想预产期马上要来了,她要一个人面对那疼痛,和
医生们恶劣的态度。网上全是产妇们惊心动魄的生产贴,她看太多了,有些没
信心了。其实从一开始就没信心,买了七八本书来壮胆,到头来还是怕得出
汗。
恐惧可... 阅读全帖 |
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d********d 发帖数: 1424 | 14 【 以下文字转载自 Ghost 讨论区 】
发信人: joycee (买买提头号女魔头), 信区: Ghost
标 题: 阴阳先生这几年 (转载)
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jul 19 23:02:01 2011, 美东)
发信人: guvest (我爱你老婆Anna), 信区: Detective
标 题: 阴阳先生这几年
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jul 19 22:24:29 2011, 美东)
《我当阴阳先生的那几年》
第一章 黄米饭
我的名字叫崔作非,胡作非为的作非。.你是不是觉得这个名字有点奇怪,听上去有点像是“崔作废”。其实我也对这个名字很不满意。但是按照家谱上起名字的排序,我这代正好犯了一个“作”字。而且我的父母又没什么文化,听说给我起这个名字的时候着实让他们头疼了一阵子。后来还是我父亲灵光闪现拿出了一本字典,说是翻到哪页就用头一个字当我的名字。说来也巧,翻到的那页上的头一个字正好是个废字。这时我的母亲不干了,谁希望自己的孩子名字叫“作废”呢?她充分的体现出了东北女人的彪悍,说什么也不能让自己的孩子就这么作废了。
于是我... 阅读全帖 |
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c****t 发帖数: 19049 | 15 ☆─────────────────────────────────────☆
casact (尝尝也) 于 (Tue Jul 5 01:17:00 2011, 美东) 提到:
第一章 被驱逐的高手
更新时间 2011-2-28 15:15:57 字数:4023
“卡卡卡,嗒嗒……”
一双灵巧的手飞舞着操纵着键盘和鼠标,富有节奏的敲击声仿佛是一首轻快的乐
章。屏幕上漫天的光华闪过,对手飞扬着血花倒了下去。
“呵呵。”叶秋笑了笑,抬手取下了衔在嘴角的烟头。银白的烟灰已经结成了长
长一串,但在叶秋挥舞着鼠标敲打着键盘施展操作的过程中却没有被震落分毫。摘下的
烟头很快被掐灭在了桌上的一个形状古怪的烟灰缸里,叶秋的手飞快地回到了键盘,正
准备对对手说点什么,房门却突得咣一声被人打开了。
叶秋没有回头,像是早就在等着这一刻一样,只是问了一句:“来了?”
“来了。”苏沐橙的回答也同样简单。
“那就走吧!”叶秋拒绝了对手又一次的邀战,轻轻地从网游荣耀专用的登录器
上摘下了一张卡片,起身来到门旁衣架顺手取下了外套。
夜已... 阅读全帖 |
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l*****d 发帖数: 7963 | 16 ☆─────────────────────────────────────☆
ladyred (落红万点,好运名:小旺红) 于 (Sat Nov 12 17:59:42 2011, 美东) 提到:
国内二十几个大小诗词论坛、贴吧、诗社等联合举办2011年年终诗词大赛,不知有人愿
意参加否?特点是对诗词的格律要求很严格。
要求如下:
2011年岁末网络二十六坛诗词联赛方案实施细则
为弘扬诗词文化,交流创作技艺,由半生缘论坛茶韵发起,5460论坛跑堂总策划,
二十六个网络论坛、诗社与诗词群决定联合举办2011年岁末网络诗坛诗词联赛,并一致
认同本届联赛重在参与、交流和提高。秉承公平、公正、公开的原则,认定本联赛方案
实施细则。
一、联赛主题
1、主题:五个“一”;
A、一个字:“夜”;
B、一个词:“寂寞空虚冷”;
C、一句话:“是月(淳熙二年闰九月),辛弃疾诱赖文政杀之,茶寇平”;
D、一张图:
图片.jpg
E、一首歌:《那时候哥还小》;
2、要求:以上五个主题,参赛作者可以诗、词俱选或任选,数量不限。
(1)诗限平水韵五、七言绝句、律诗,接受排律。不接受古风,组诗... 阅读全帖 |
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r****y 发帖数: 26819 | 17 【 以下文字转载自 Poetry 讨论区 】
发信人: ladyred (旺红), 信区: Poetry
标 题: Re: 癸酉本红楼梦--
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Oct 6 12:20:49 2013, 美东)
第六版修改说明
2011年5月22日,何莉莉在百度贴吧何初本吧透露其堂妹何文艳将精修癸酉本,至今整
整四个月,这次修改终于完成了第一遍增补。何莉莉本来计划等到第二遍全面润色完成
后,再发布这一版,不过考虑到很多关注癸酉本的读者已经等得太久,所以何莉莉接受
我的建议,同意先把第一遍增补的结果发布,让各位读者预览一下,并提出宝贵建议,
以便在第二遍全面润色时予以采纳。此次修改相对前几次力度还是比较大的,基本每一
回都增加了新的内容,对原来版本中明显的缺文也进行了增补。每一回都还原了标题诗
是此次修改最大的的亮点。当然,因为何莉莉和她的堂妹是凭记忆还原增补,所以语言
文采和诗词平仄都与原本有较大差距,还请各位读者见谅。
... 阅读全帖 |
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Z*****l 发帖数: 14069 | 18 这种防毒面具没有去臭的功能,做好心理准备,一会儿想吐,就出去吐,没人笑话你们
,别硬撑着,小心吐在防毒面具里。”师父坏笑着和我们说。
不一会儿,殡仪馆去现场拉尸体的车风驰电掣般开了过来,突然一个急刹,紧接着
车门打开,副驾驶上的一个殡仪馆工作人员跳将下来。整个动作如行云流水,一气呵成
。他是下来吐的。
驾驶员是一个经验老到的殡仪馆工作人员,他开门走下来:“你们自己搬吧,这个
确实臭,车估计得晒两天。”
我鄙夷地走过去,掀起面包车的后门,看见了那个白花花、鼓囊囊的编织袋,一股
臭气扑面而来,看来戴着的防毒面具确实没啥除臭效果。刚在垃圾场,离得又比较远,
所以没有感受到这种异于高度腐败尸体的臭味,恶臭中夹杂着酸臭,让人的肠胃迅速翻
腾起来。
我定了定神,和李华一起将编织袋拖下了车,还好袋子不太沉。
我们把编织袋拎到解剖台上,师父已经穿戴完毕走了过来,说:“去戴两层手套。”
我看了眼在一旁观摩的痕检员林涛,生怕他又嘲笑我,梗了下脖子,装作经验丰富
的样子,说:“没事,两层手套没手感,缝线打结都感觉不到线头。”
师父看了我一眼,没说话。
我们打开白色编织袋的拉链,臭味迅速加强了几倍,在一旁负责... 阅读全帖 |
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l*****d 发帖数: 7963 | 19 【 以下文字转载自 Poetry 讨论区 】
发信人: ladyred (旺红), 信区: Poetry
标 题: 最接近原著,红迷必读:癸酉本红楼梦--(102-108)
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Oct 6 12:29:02 2013, 美东)
第102回 冷惜春甘伴青灯佛 洁妙玉泥陷瓜洲渡
诗云:林噪蝉鸣渐静息,隐者不问鸾鹤心。虎落平地龙潜池,风过梵铃尽悲音。
话说薛蟠被处斩过后,薛姨妈不觉病倒,成日躺在炕上啼哭,思念儿子。宝钗也曾多次
劝慰,陪着淌了不少泪。贾蓉、贾蔷几次来山庄找宝钗谈论分割贾府房地的事。宝钗道
:“荣宁两府外加大观园竟占了大半条街,若是每人分得一处,也空旷的很。再说如今
世道刚刚安宁,城里生意还是冷淡的很,分的这么多房子,开门面也没有人光顾。我先
不去住着,你们带兄弟们随意住去吧,我怕宝兄弟回去又勾起伤心事,等再过几年他忘
了旧事再搬回去不迟,那么大的地方谁住着都怕。”贾蓉道:“那我就带了弟兄们先住
进去,把大观园都留给你和宝叔了。”宝钗道:“正是如此。”于是蓉、蔷带王仁、倪
二、柳湘莲、卜世仁及众弟兄搬了进去。外头有赁屋的也都打了钱住进来,... 阅读全帖 |
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P**********n 发帖数: 6311 | 20 第十章
只要涉及人事问题,伊泽尔的反应总要慢半拍。他知道自己有这个缺点。劳的意图
很清楚,他本来应该当即明白过来。这种事他在学校里还学过呢二他们来到营帐后,劳
先对大家来了一小段甜言蜜语,把新的"青河舰队管理主任"伊泽尔·文尼介绍给大家。
劳特别强调指出,在幸存下来、来自船主家庭的船员中,文尼的级别是最高的。文尼家
族的两艘主力飞船逃过了大难,受创也相对较轻。如果要在目前的青河舰队中选出一位
领导,那自然非伊泽尔·文尼莫属。只要与目前的上级合作,人家都能得到财富。之后
,伊泽尔被推到前列,他嘟嚷了几句能回到朋友们中间来真好、希望大家帮助之类的话
。
劳在青河人的职责和忠诚之间打进了一个楔子。此后几天,文尼渐渐意识到了这个
楔子。他回到了自己人中间,却又不算真的回来。每一天,他看到的都是熟悉的面孔。
本尼·温和吉米·迪姆都活下来了。伊泽尔和本尼从六岁起就是好朋友,但现在本尼却
像个陌生人,一个顺从的陌生人。
一天,伊泽尔在营帐的交通艇气密门处遇上本尼。这是他事先做的安排,但更大程
度上也是巧合。伊泽尔身边没其他人。他的易莫金人助手现在已经不怎么盯着他了。信
任他?在他身上安了监控器?觉得... 阅读全帖 |
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a*********3 发帖数: 660 | 21 01.《将进酒》·李白
君不见黄河之水天上来,奔流到海不复回。君不见高堂明镜悲白发,朝如青丝暮成
雪。人生得意须尽欢,莫使金樽空对月。天生我材必有用,千金散尽还复来。烹羊宰牛
且为乐,会须一饮三百杯。岑夫子,丹丘生,将进酒,君莫停。与君歌一曲,请君为我
侧耳听:钟鼓馔玉何足贵,但愿长醉不复醒。古来圣贤皆寂寞,惟有饮者留其名。陈王
昔时宴平乐,斗酒十千恣欢谑。主人何为言少钱,径须沽取对君酌。五花马,千金裘,
呼儿将出换美酒,与尔同销万古愁。
唐代李白沿用乐府古体写的《将进酒》,影响极大。虽然在思想内容上得不到历代
主流意识的推荐,但从艺术和诗的角度看,仍然是一首十分完美的诗。此诗在喜欢喝酒的
广大群众中影响是不同凡响的。
02.《水调歌头》·苏轼
丙辰中秋,欢饮达旦,大醉,作此篇,兼怀子由。
明月几时有,把酒问青天。不知天上宫阙,今夕是何年?我欲乘风归去,又恐琼楼
玉宇,高处不胜寒。起舞弄清影,何似在人间!
转朱阁,低绮户,照无眠。不应有恨,何事长向别时圆?人有悲欢离合,月有阴晴
圆缺,此事古难全。但愿人长久,千里共婵娟。
苏轼(1... 阅读全帖 |
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l*****d 发帖数: 7963 | 22 201
临江仙 除夕夜
远客匆匆归故里,华灯初上阑珊。入襟飞雪不觉寒。心思千里外,飞越万重山。
试问苍天明我意,缘何不见君还?天涯望尽梦难圆。悠悠空对月,意恐度年关。
202
临江仙 携手百年融
情锁辽城心挽梦,馨香沉醉穹空。凭栏伫望炫霓虹。凤楼留夙愿,惬意绕东风。
把盏推杯邀北雪,夕阳西下嫣红。伊人笑靥惹琼衷。潇潇疏雨润,携手百年融。
203
临江仙 心事诉弦筝
北雪苍茫空际远,银蛇舞醉晶莹。雕栏玉砌韵华生。玉波横贯处,律曲掩清明。
河畔冰封难起舵,行船停滞旗旌。青州路远更难行。佳期无定日,心事诉弦筝。
204
鹊踏枝 寂寞空虚冷
黄叶离枝风几片。移步云楼,一望秋无限。雁阵低徊悲路远,渔人闲钓清江畔。
谁送流年偷曲换。传报鱼书,游子归来晚。夜半沉吟倾酒盏,倚窗独醉星光暗。
205
苏幕遮 秋夜思
桂香飘,云旖旎。碧月秋波,波荡凉枝系。一抹清辉窗影腻。风逸含情,抚柳飘飘醉。
瑟音噎,蛩唱细。思韵悠悠,曲在心头济。绣阁吟诗寒月寄。飞白淋漓,鸿雁徘徊意。
206
江城子 那时候哥还小之忆相知
别来三载隔音颜。日相牵,夜难眠,一片芳心,无寄恨长天。纵使云笺传不尽,千种意
,万... 阅读全帖 |
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s******s 发帖数: 13035 | 23 1.首先你要保证你大瓶摇出来的菌和小摇出来的有一样多的质粒,
用大摇的菌取出来小抽一下看看?
2.不放心iso-pro沉淀的时候-70放一个小时先
3.强烈建议用50ml falcon tube做收集离心,干净,pellet清楚
注意速度不要超过6k,可以时间延长一些
Qiagen的Midi简直是最好的plasmid kit, 质粒绝对干净。以前实验
室做transgenic fly, 只有这个做出来的质粒打embryo不会有很高的
致死率 |
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Z*****l 发帖数: 14069 | 24 陈诗羽鄙视地看了一眼林涛。
“那这是什么?”我指着地面上像是足迹轮廓一样的痕迹问林涛。
林涛说:“这是没有花纹的足迹轮廓,我们穿着鞋套走进现场,踩到了血迹,再踩
回地面的话,都会留下这样的足迹。”
“你是说这是我们民警穿戴鞋套进入现场留下的足迹?”大宝问。
“是。”林涛顿了一下,接着说,“不过,如果凶手也穿着这样的鞋套,也会留下
这样的痕迹。”
陈诗羽忽然蹲下身,用手指蹭了一下尸体旁边地面上的血迹,说:“凶手应该就是
穿着鞋套进入现场的。”
“啊?”大宝吃了一惊,“陈羽毛你是怎么知道的?”
陈诗羽说:“你们看,旁边有几个类似的足迹应该是民警留下的,因为时间不长,
所以还没有完全干掉。而这几枚足迹,已经完全干掉了,说明足迹留下的时间很长。另
外,我叫陈诗羽,不叫陈羽毛,谢谢。”
一个大学生能做出这样的推断,确实让我有些刮目相看。我赞许地点了点头,表示
对她的论断予以支持。
“戴着橡胶手套,穿着鞋套进入现场杀人。”大宝说,“杀的还是精神病人。听上
去好像那部美剧,叫什么《嗜血法医》里的情节啊。”
“难道是美剧迷... 阅读全帖 |
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w***s 发帖数: 7132 | 25 张佳玮的日记
什么是天下第一奇毒?
2011-08-17 11:54:09
师父问:“什么是天下第一奇毒?”
七师弟说:“我愿走千山、渡万水,收瘴疠,品花草。菌菇蕊叶,阴阳调和,遍览医典
,以求生克。研磨细琢,鼎炉蒸熏,使毒无色无臭,无迹可寻,无药可解。”
师父摇了摇头。
六师弟说:“我愿杀猛兽、捕蛇蝎,采矿石,粹金铁。提配方,做分析。细密纪录,研
究结构。集万物之邪诡,合天地之残忍,使人见血封喉、当者立毙。”
师父摇了摇头。
五师妹说:“我愿红妆素裹、描眉画眼。习箜篌、按玉笛,摹工笔,绘写意。四书五经
、淫词浪曲,饮食茶酒,德容言工,以至于婉转承应、品箫媚术,无一不精。令天下男
子皆为我裙下之臣、入幕之宾。那时节,任凭我端给他们喝孔雀胆、鹤顶红,他们也甘
之如饴。”
师父擦了擦鼻血,摇了摇头。
四师弟说:“我愿研究风的吹送,水的流动,人的饮食习性,牛马的走向爱好。我愿参
透天地星辰的运行,探寻世间的规律,绘制出一幅图像。我只要一小撮毒药,不必见血
封喉,只要能生生不息的繁衍。我将毒药下在一条合适的河中,自会被合适的荇藻吸收
,自会被合适的男子吃到,自会传递给另一个女子的嘴唇,自会传递... 阅读全帖 |
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c****t 发帖数: 19049 | 26 楔子
罗府后花园的回廊里,十娘揪着十一娘的衣襟,满脸愤恨:“你给我脱下来!你给我脱
下来!”小小的十一娘被揪得趄趄趔趔,大大的眼睛噙着晶莹的泪水,却嘴角紧抿,不
发一言。 十娘身边的丫鬟碧桃和红桃,一个低头望着自己脚下的青石砖,一个侧脸
望着台阶旁那株光秃秃的玉兰树,都装没有看见。 十一娘身边的丫鬟水苏看着就叹
一口气,上前抱住了十一娘,笑着对十娘道:“十小姐,十一小姐没皮袄,几件棉袄都
做得薄,这天气一冷,可不就连门都不敢出了。杨姨娘就把您的皮袄借十一小姐穿穿,
等会去给大太太请了安,立刻就还给您。” 十娘听说是生母杨姨娘把自己的皮袄借
给十一娘的,满脸狐惑地望向碧桃。 碧桃在水苏开口的时候已抬起头来观察十一娘
的神色,见十一娘望着她,她立刻笑着点了点头:“十小姐,您的皮袄是杨姨娘借给十
一小姐的。” 十小姐闻言,脸上的表情有所舒缓,揪着十一娘的衣襟的手渐渐放松
:“姨娘借给你的你也不许得意,给母亲请了安,立刻给脱还给我。” 水苏见这个
混世魔王松了口,她也松口气,笑着保证:“十小姐放心,请完安,立刻把皮袄还了。
” 十娘很满意这样的回答,微微点头,松了手。 水苏也站... 阅读全帖 |
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P**********n 发帖数: 6311 | 27 第二章
捣蛋小鬼埋伏在伊泽尔宿舍外,正等着他哩。
"哎,伊泽尔,昨晚我看你来着。"这句话差点让他停下了脚步。她说的是宴会。对
了,贸易委员会把宴会的情况实时传送回了舰队。
"知道,奇维。你在传送图像上看到了我,现在又见到了我本人。"他打开房门走进
去。小鬼在身后跟得实在太紧,不知怎么一下子,她也进来了,"你来这儿有什么事吗?
"
在按自己的心意曲解别人的问题方面,捣蛋小鬼是个天才。"我们正好轮到值同一个
勤杂班,两千秒后开始。我刚才想,咱们可以一块儿下楼到菌囊去,交换交换小道消息
什么的。"
文尼飘进里间,这回总算成功地把她关在门外。他换上工作服。出门时一看,不用
猜都想得到,捣蛋小鬼仍旧守在外头。
他叹了口气,"我没什么小道消息。"至于特里克西娅跟我说的事,我要告诉你才真
是活见鬼呢。
奇维得意洋洋地笑了。"这个嘛,我有。来。"她打开通向外面的宿舍门,零重力下
姿态优美地向他一躬,飘身进入外面的走廊,"宴会上的事,我想跟你对对笔记。但说实
在的,我敢打赌,我看到的准比你多。委员会传回来的视像数据分三个视角,其中一个
在大门边上,比你的视角强多了。"
她蹦蹦跳跳,在零重力环境中一弹一弹... 阅读全帖 |
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s******s 发帖数: 699 | 28 要表达GST融合蛋白,第一次转进BL21 codon+(找别人借的...)中,挑菌,摇过夜,
存了一份glycerol stock放在-80, 然后剩下的菌IPTG诱导,成功表达。
可是后来用glycerol stock, 同样的条件,却再也不能诱导表达了,我也从冻在四度的
板子上再挑过菌,还是不能表达。
现在的打算是再找别人借一次(主要是有六个蛋白要表达一老借也不是个事),但还是
觉得很奇怪,菌的抗性还保存着说明质粒应该还在啊,当然这个菌不是保存质粒的好选
择,会有重组,可我还是不敢相信六个样品都发生重组。
有人知道这种第一次可以表达第二次就不行的现象是为什么吗?先谢谢大家了。
下面是抱怨帖:博士后天天在后面追着要蛋白,可是我还有ACE马上要过以及自己的课
题还有别的一堆事,真的没有那么多时间来trouble shooting啊>_< |
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n******6 发帖数: 1829 | 29 (引子)
多年前的一个傍晚,南加州大学,落日的余晖映红了半边天际。
生化实验馆的一楼,来自印度的博士生拉贾,正穿过走廊踱向大门。大门自
动打开了,一个青春靓丽的女孩儿,迎面闯了进来。她一身洁白:白色的球鞋,
白色的运动袜,白色的网球短裙,手上还握着一副白色的球拍。博士生拉贾顿时
停住脚步,呆立在那里,眼巴巴地望着。女孩儿的身后,大门还没有关闭,灿烂
的晚霞,毫无遮拦地披洒进来。美丽的女孩儿,被笼罩在圣洁的光晕中。
“拉贾师兄,你好啊,这么早就走,回家抱孩子去啊?”女孩儿走近了,高兴
地打着招呼,却没有停下来的意思。
“啊?啊!不,不是,我实验做完了。”来自印度的博士生惊醒过来,拦住女
孩儿,“哎,艾琳,你今天可真漂亮,打网球去啦?”
“是呀,我打了一下午,电子系的一位师兄非要教我,还请我吃了冰激淋。”
女孩儿不得不停了下来。
“真好,总有人请你。”博士生拉贾有些怅然若失,但很快又振作起来,做出
一副轻松的样子,问:“艾琳,什么时候我也请你吃个饭吧,外边新开了一家印
度餐馆,咖喱蔬菜咖喱鸡,咖喱羊肉咖喱鱼,... 阅读全帖 |
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n******6 发帖数: 1829 | 30 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: newegg06 (egg), 信区: Military
标 题: 这篇文章讲述了老印阿三是如何一步一步把国女骗上床的
发信站: BBS 未名空间站 (Thu May 19 00:32:40 2016, 美东)
(引子)
多年前的一个傍晚,南加州大学,落日的余晖映红了半边天际。
生化实验馆的一楼,来自印度的博士生拉贾,正穿过走廊踱向大门。大门自
动打开了,一个青春靓丽的女孩儿,迎面闯了进来。她一身洁白:白色的球鞋,
白色的运动袜,白色的网球短裙,手上还握着一副白色的球拍。博士生拉贾顿时
停住脚步,呆立在那里,眼巴巴地望着。女孩儿的身后,大门还没有关闭,灿烂
的晚霞,毫无遮拦地披洒进来。美丽的女孩儿,被笼罩在圣洁的光晕中。
“拉贾师兄,你好啊,这么早就走,回家抱孩子去啊?”女孩儿走近了,高兴
地打着招呼,却没有停下来的意思。
“啊?啊!不,不是,我实验做完了。”来自印度的博士生惊醒过来,拦住女
孩儿,“哎,艾琳,你今天可真漂亮,打网球去啦?”
“是呀,我打了... 阅读全帖 |
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n******6 发帖数: 1829 | 31 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: newegg06 (egg), 信区: Military
标 题: 这篇文章讲述了老印阿三是如何一步一步把国女骗上床的
发信站: BBS 未名空间站 (Thu May 19 00:32:40 2016, 美东)
(引子)
多年前的一个傍晚,南加州大学,落日的余晖映红了半边天际。
生化实验馆的一楼,来自印度的博士生拉贾,正穿过走廊踱向大门。大门自
动打开了,一个青春靓丽的女孩儿,迎面闯了进来。她一身洁白:白色的球鞋,
白色的运动袜,白色的网球短裙,手上还握着一副白色的球拍。博士生拉贾顿时
停住脚步,呆立在那里,眼巴巴地望着。女孩儿的身后,大门还没有关闭,灿烂
的晚霞,毫无遮拦地披洒进来。美丽的女孩儿,被笼罩在圣洁的光晕中。
“拉贾师兄,你好啊,这么早就走,回家抱孩子去啊?”女孩儿走近了,高兴
地打着招呼,却没有停下来的意思。
“啊?啊!不,不是,我实验做完了。”来自印度的博士生惊醒过来,拦住女
孩儿,“哎,艾琳,你今天可真漂亮,打网球去啦?”
“是呀,我打了... 阅读全帖 |
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n******6 发帖数: 1829 | 32 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: newegg06 (egg), 信区: Military
标 题: 这篇文章讲述了老印阿三是如何一步一步把国女骗上床的
发信站: BBS 未名空间站 (Thu May 19 00:32:40 2016, 美东)
(引子)
多年前的一个傍晚,南加州大学,落日的余晖映红了半边天际。
生化实验馆的一楼,来自印度的博士生拉贾,正穿过走廊踱向大门。大门自
动打开了,一个青春靓丽的女孩儿,迎面闯了进来。她一身洁白:白色的球鞋,
白色的运动袜,白色的网球短裙,手上还握着一副白色的球拍。博士生拉贾顿时
停住脚步,呆立在那里,眼巴巴地望着。女孩儿的身后,大门还没有关闭,灿烂
的晚霞,毫无遮拦地披洒进来。美丽的女孩儿,被笼罩在圣洁的光晕中。
“拉贾师兄,你好啊,这么早就走,回家抱孩子去啊?”女孩儿走近了,高兴
地打着招呼,却没有停下来的意思。
“啊?啊!不,不是,我实验做完了。”来自印度的博士生惊醒过来,拦住女
孩儿,“哎,艾琳,你今天可真漂亮,打网球去啦?”
“是呀,我打了... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 33 终于星期一了。现在我跟在国内差不多,今天早上我想呢,我怎么过得跟在国内的日
子一样了。在家比上班还忙,还累。
星期六去买了一个蓝牙喇叭,想着做饭的时候可以听手机里的歌,自己享受也不影响别
人,我家有DVD连着音响的,想当年这音响是高级的,现在也非常不错。所以,如果放
它,那声音太响了,也不适合做饭时候听。
原来有个蓝牙喇叭,想不到墙上的USB插销坏了,我以为是喇叭坏了,充不进去电了,
那个喇叭原来也是电池盒子坏了,用胶布粘的,老公说我弄坏的,我说它弄坏的,想起
来两人就掐一阵。闲的!那是好几年前店里打折买的,$10一个。该扔了,声音是真好。
有人跟我一个感觉没有?现在的东西贵的都不如以前便宜的。说再买一个吧,转了半天
没有特别合适的,都是低音太重,还什么几倍的低音。心脏都要被它弄坏了,只能听摇
滚。
终于找到一个便宜的,我发现便宜的就是简单的,我喜欢的。回家说连手机吧,都连不
上,气得我说,便宜的东西就是不行,第二天去退了,又买了一个贵一点的,回来打开
盒子,一股味道直冲鼻子,就是那股塑料味儿,不知道还有没有人记得过内DVD碟子的
外壳,就是那个味道。
还有我买个过一个三星智能电视也是... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 34 今天早上我想呢,我怎么过得跟在国内的日子一样了。在家比上班还忙,还累。
星期六去买了一个蓝牙喇叭,想着做饭的时候可以听手机里的歌,自己享受也不影响别
人,我家有DVD连着音响的,想当年这音响是高级的,现在也非常不错。所以,如果放
它,那声音太响了,也不适合做饭时候听。
原来有个蓝牙喇叭,想不到墙上的USB插销坏了,我以为是喇叭坏了,充不进去电了,
那个喇叭原来也是电池盒子坏了,用胶布粘的,老公说我弄坏的,我说它弄坏的,想起
来两人就掐一阵。闲的!那是好几年前店里打折买的,$10一个。该扔了,声音是真好。
有人跟我一个感觉没有?现在的东西贵的都不如以前便宜的。说再买一个吧,转了半天
没有特别合适的,都是低音太重,还什么几倍的低音。心脏都要被它弄坏了,只能听摇
滚。
终于找到一个便宜的,我发现便宜的就是简单的,我喜欢的。回家说连手机吧,都连不
上,气得我说,便宜的东西就是不行,第二天去退了,又买了一个贵一点的,回来打开
盒子,一股味道直冲鼻子,就是那股塑料味儿,不知道还有没有人记得国内DVD碟子的
外壳,就是那个味道。
还有我买个过一个三星智能电视也是,好几百块我下班回家一开门满屋都是那个... 阅读全帖 |
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f**********d 发帖数: 4960 | 35 丁玲写这个《梦珂》的时候才20出头。大概看看,才华是相当好。
梦珂
这是九月初的一天,几个女学生在操坪里打网球。
“看,鼻子!”其中一个这样急促的叫,脸朝着她的同伴。同伴慌了,跳过一边,
从荷包里掏出小手绢,使劲的往鼻子上去擦。
网那边正发过一个球来,恰恰打在那喊叫者的腿上。大家都瞅着她那弯着腰两手抱
住右腿直哼的样儿发笑。
“笑什么,看呀,看红鼻子先生的鼻子!”
原来那边走廊上正走来一个矮胖胖的教员。新学生进校没多久,对于教员还认识不
清。不过这一个教员,他那红得象熟透了的樱桃的鼻子却很惹人注意,于是自自然然把
他那特点代替了他的姓名。其实他不同别人的地方还够多:如同眼呢,是一个钝角的三
角形,紧紧的挤在那很浮肿的眼皮里,走起路来,常常把一只大手放到头上不住的搔那
稀稀的几根黄发,还有那咳嗽,永远的,痰是翻上翻下的在喉管里打滚,却总不见他吐
出一口或两口来的。
这时他是从第八教室出来,满脸绯红,汗珠拥挤的在xxxx中用力的榨出,右手在秃
头上使劲的乱搔,皮鞋也便在那石板上大声的响,这似乎是警告,又象是叹息:... 阅读全帖 |
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s*******c 发帖数: 5161 | 36 ☆─────────────────────────────────────☆
lilykang (伊一人) 于 (Tue Mar 5 09:24:34 2013, 美东) 提到:
3月5日晚间11点,护士唤醒我,说老公的血压在持续下降,很可能剩下的时间不多了。
我打电话让朋友把三个孩子带进来,和他们爸爸告别,让朋友帮忙照了最后一张全家福
。然后把孩子们送回去睡觉,其后就一直守在他身边。我和他说了很多很多话,和他说
我怎么爱上他的,和他说我对我们共同生活未来的展望,我摇他大声呼唤他,可是他都
没有反应,我一遍又一遍地亲他,和他说我舍不得舍不得啊,我知道他其实听得到,因
为期间他的血压有所回升。我一度以为奇迹出现,就更用力地抱他,更大声地说话。可
是生命的力量还是抵挡不住癌细胞的吞噬。他的血压一路滑落,最后凌晨近四时,他大
声喘了几口气,发出类似叹气的声音,眼角慢慢沁出一滴泪水。医疗监视器的警告声提
醒我,This is it。我的坚强的老公啊,我认识他以来从来没见他哭过,总算在他人生
的最后时刻,流下了一滴泪水。。
----谢谢大家给我这么多的祝福,我觉得祝福还是起作用了,... 阅读全帖 |
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h**r 发帖数: 8078 | 37 ☆─────────────────────────────────────☆
nuonuo12 (快哉风) 于 (Sat May 5 09:12:08 2012, 美东) 提到:
第一卷连接:
http://www.mitbbs.com/article_t2/Chicago/31695989.html
封神2012 (八十) 昆仑
狂风怒号,雪花纷飞,山坳中还不时飘过一阵浓雾,纵然是在白天,也只能看到数尺之
内,稍不留神,就会摔落万丈悬崖。
在过去的十多天中,殷飞好多次都认为自己将会把性命送在这昆仑山中。上个月,他离
开芝加哥参加十五年一度的玉虚仙葩大赛。在北京短暂停留后,又乘飞机来到青海西宁
,然后根据预先龙菁菁给他设计好的路线,各路火车汽车七转八换,来到了一个偏远得
不能再偏远山脚下的小村,在农家的土炕上休息一晚,翌日清晨便独自背着背包踏入了
莽莽苍苍的昆仑山中。
经过一年来跟着龙菁菁的修炼,殷飞的修为又有了新的突破,勉强进入了第七品。这个
进展导致了殷飞的极度自我膨胀。根据阐教规定,修为在七品以下的弟子,必须由师长
陪同前往昆仑阆苑境参加玉虚新锐大赛,而达到七品及六... 阅读全帖 |
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m***e 发帖数: 48 | 38 首发梦幻泡影吧吧
http://tieba.baidu.c.m/f?kw=%C3%CE%BB%C3%C5%DD%D3%B0%B0%C9&f[s=yqtb
感谢船兄
【第一章】—治军
【第二章】—屠龙
【第三章】——初阵
【第四章】——旖旎
【第五章】——剑宗传承
第一章】—治军
「嗡嗡嗡-」
到处是飞舞的毒虫,厚密的虫云遮住人的眼睛,整座蛊池早已成为虫的世界。
和前一座蛊池相比,这里的蛊池变了很多,一眼望去,到处都是大大小小的
空桶杂乱地堆着,成为天然的虫穴。
正是这些虫穴成为所有虫子的庇护所,所以虫子的数量急剧增加,而数量一
多,争斗自然变得越发激烈,也更加残酷。
优胜劣汰,现在整座蛊池几乎全是毒蜂、毒蚁、毒蝗之类群居型的虫子,也
有独来独往的虫子,都异常强悍,而且大多属于蜘蛛、毒蚕这种会吐丝结网的类
型,牠们全都躲在某个阴暗而狭小的角落里,守住一个很小的缺口,等待猎物落
入陷阱。
这是个充满争斗和杀戮的世界,适者生存的道理在这里演绎得淋漓尽致。
在蛊池一角,一颗金灿灿的圆球内,谢小玉盘腿而坐,此时他的意识附着在
那些蛊虫上,感受着牠们为了生存而进行的挣扎与杀戮,身体四周凝聚着一层浓... 阅读全帖 |
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l*****k 发帖数: 1059 | 39 【第一章】—治军
【第二章】—屠龙
【第三章】——初阵
【第四章】——旖旎
【第五章】——剑宗传承
第一章】—治军
「嗡嗡嗡-」
到处是飞舞的毒虫,厚密的虫云遮住人的眼睛,整座蛊池早已成为虫的世界。
和前一座蛊池相比,这里的蛊池变了很多,一眼望去,到处都是大大小小的
空桶杂乱地堆着,成为天然的虫穴。
正是这些虫穴成为所有虫子的庇护所,所以虫子的数量急剧增加,而数量一
多,争斗自然变得越发激烈,也更加残酷。
优胜劣汰,现在整座蛊池几乎全是毒蜂、毒蚁、毒蝗之类群居型的虫子,也
有独来独往的虫子,都异常强悍,而且大多属于蜘蛛、毒蚕这种会吐丝结网的类
型,牠们全都躲在某个阴暗而狭小的角落里,守住一个很小的缺口,等待猎物落
入陷阱。
这是个充满争斗和杀戮的世界,适者生存的道理在这里演绎得淋漓尽致。
在蛊池一角,一颗金灿灿的圆球内,谢小玉盘腿而坐,此时他的意识附着在
那些蛊虫上,感受着牠们为了生存而进行的挣扎与杀戮,身体四周凝聚着一层浓
郁的杀气。
这是谢小玉的选择。
虽然身为剑修,但谢小玉已经放弃往剑道方面发展,他选择的是杀道,修练
的是杀人术,既然修练杀人术,肯定要有一身杀气,更要有对杀戮的感... 阅读全帖 |
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B****n 发帖数: 22 | 40 说一点我的经历,或许对楼主有帮助
我去年也在大提pLKO质粒遇到同样的问题,产量很低。因为当时有人警告我说这个质粒
拷贝数很低要摇很多菌,所以我先挑一个单菌落放在5ml培养基里过夜摇,然后转到1L
的大瓶里放大。结果很悲惨。
后来发现没那么邪乎,直接挑一个单菌落放在250ml过夜摇就能提到1-2mg。
我建议:
1.每次都重新转化感受态
2.不要经过小摇,直接单菌落接种 |
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s******n 发帖数: 518 | 41
地下的笑声
作者:郭沫若
你们要我自杀吗?哼,我偏不自杀!我要是自杀,那不是成为了你们的帮凶?你们
害得我已经够苦,剩给我的就只有死路一条。我早迟是会死的,而且死已经逼在了我的
面前了。但我偏不帮助你们把我赶快弄死。死了好做你们的肥料吗?好让你们的世界更
干净些吗?在你们的乐园里面,至少还有我这样已经快要腐烂的活的尸骸存在,我感觉
着起码的复杂的快活。
有什么悲惨可言呢?我并不感觉悲惨。要痛吧,痛得更彻骨髓一点。要痉挛吧,痉
挛得更僵硬一点。瞎了的不是我,残废了的不是我!我倒庆幸我的指头把我搭救了。它
们真痉挛得出奇呀。我是那么崇拜小提琴的人。我抱着小提琴,胜过抱着我自己的心脏
。我那么崇拜珂尔曼,他真是我的宙司大神,是他在统治着这个世界,这个丕达哥拉司
的音乐世界。当我醉心于练习提琴的时候,谁有过我那样的专心呢?秀的献身于我,或
许有我那样的专心吧?我自己可以发誓,我就从不曾以那样的专心来对待过秀。秀呀,
请你原谅我吧!尽管你为我害得要死,我为什也害得要死。不要误会啦,我们并不是在
害相思病呀!笑话,那种十二世纪的病!晓得么,她是为我害了花柳病的?我电为她害
了花柳病的,晓得... 阅读全帖 |
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U***5 发帖数: 2796 | 42 第六十章 放弃与回归
第六十章 放弃与回归
伴着邓迪中校的吼叫声,方森岩他们也随之获得了提示:
“你们在72小时内摧毁了至少一门巨型孢子菌喷射防空塔。”
“你们成功完成了本次任务。”
“你们只摧毁了一门巨型孢子菌喷射防空塔。”
“跟随你们战斗的人类士兵伤亡率超过50%。”
“你们只能获得最低评价下的奖励。”
“请从下列的奖励条件当中抽取两项来作为你的奖励。”
你可以从如下奖励当中挑选两项来成为最终的奖励:
奖励:通用点增加9000点。
奖励b:基础属性点随机+3点。
说明:选择了此项以后,将会将第六十章 放弃与回归3点基础属性点自由分配在你
的基础属性上。随机分配的原则将考虑到你的当前属性而定。
奖励:功勋值+3点。
方森岩看到这里,也觉得并没有多稀奇,但是接下来投射出来的两道全息图像却令
他倒吸了一口凉气,接下来给出的两项备选项,赫然是两件黑色品质的装备!!
奖励d:n高级碳素有机盔甲。
n高级碳素有机盔甲。
原产地:星际联盟人马星系第九生产星
... 阅读全帖 |
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b*******s 发帖数: 954 | 43 做蛋白出身,实验室有昂贵过蛋白柱子的大侠就不用往下看了。
我半路出家,做了五六年蛋白纯化,走无数弯路。在的实验室也没有特别做蛋白的经验,什么fancy的分蛋白的东东都没有。现在有一点点心得,希望我的经验可以帮楼主少走些弯路。
我的蛋白最早也是在包涵体里,我折腾Urea, 变性复性,整了两年,也没有拿到什么好用的蛋白。
(1)如果楼主需要用蛋白做functional experiment的话,可以试试不用变性复性的办法。降低表达的温度。室温下过夜都可以。如果有条件的话,试试14度。
这样蛋白更有可能是可溶性的。
摸条件时,可以做3ml 的小样,看看在什么样的温度和时间下表达量最高。然后放大表达。
(2)在(1)的低温条件下,多表达一些菌,
我现在实验室条件不好,我每天摇几百毫升菌。离心后冻在-80度。收集到五升以后,在同一天破细菌收蛋白。然后24小时之内连续做实验把蛋白拿到。
(3) 过柱子时不要贪快,让裂解的菌液缓缓流下。
你的蛋白出现在elution 之前的组分里,我猜就是没有挂住。
(4) 洗脱时可以快速,如果你用的是一般的小柱子的话。可以在柱子下面加一根长管子。
good luc... 阅读全帖 |
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r*****t 发帖数: 4793 | 44 连接后转化,有菌落长出,但是提不出质粒
我试了买的感受态细菌和自己做的电转的菌,都是一样的结果,有菌落,提不出质粒
提质粒用的是qiagen的miniprep,应该没问题
摇的菌好像不太对,长的不够浓,离心下来只得到一点菌,而且看起来不太对劲,比较
"粘",正常离下来的像一堆沙子,这个像粥
还有就是我的载体质粒比较大,有14k
到底怎么回事啊?愁死我了 |
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发帖数: 1 | 45 大跃进奇闻拾屑
成车的麻雀被作为战利品送上除四害展览会:
公社食堂要吃猴头、燕窝、海味
“大跃进”中,中央一些领导干部到基层宣传、描绘共产主义人民公社的美好前景
,以鼓励人民的奋斗热情。当时国务院一位副总理在河南省遂平县讲得最为具体,不妨
抄录下来。他说公社的好处在哪里?
“首先,有好的食物,而不仅仅是填饱肚子。每顿有肉、鸡、鱼、蛋,还有更精美
的食物如猴头、燕窝、海味等,都是按需供给。第二,衣服穿着方面,一切要求都可满
足。有各种花色和品种的服装,而不是清一色的黑色和蓝色。将来,普通服装仅作为工
作服使用,下班后,人们就换上皮服、呢绒和羊毛制服,当人民公社都养了狐狸,那时
外套就都是狐皮的了。第三,房屋都达到现代城市的标准。现代化是什么?人民公社。
在屋子的北厢有供暖设备,南厢有冷气设备。人们都住在高楼里,不用说,里面有电灯
、电话、自来水、无线电和电视。第四,除了跑步的选手外,旅客和行人都有交通工具
,航班通向各个方向,每个省都有飞机场,每个地方都有飞机制造厂的日子也不远了。
第五,每个人都受高等教育,教育已经普及。”这幅人民公社的美景,真让几亿农民乐
得合不上嘴。只是谁也没有去想... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 46 大跃进奇闻拾屑
成车的麻雀被作为战利品送上除四害展览会:
公社食堂要吃猴头、燕窝、海味
“大跃进”中,中央一些领导干部到基层宣传、描绘共产主义人民公社的美好前景
,以鼓励人民的奋斗热情。当时国务院一位副总理在河南省遂平县讲得最为具体,不妨
抄录下来。他说公社的好处在哪里?
“首先,有好的食物,而不仅仅是填饱肚子。每顿有肉、鸡、鱼、蛋,还有更精美
的食物如猴头、燕窝、海味等,都是按需供给。第二,衣服穿着方面,一切要求都可满
足。有各种花色和品种的服装,而不是清一色的黑色和蓝色。将来,普通服装仅作为工
作服使用,下班后,人们就换上皮服、呢绒和羊毛制服,当人民公社都养了狐狸,那时
外套就都是狐皮的了。第三,房屋都达到现代城市的标准。现代化是什么?人民公社。
在屋子的北厢有供暖设备,南厢有冷气设备。人们都住在高楼里,不用说,里面有电灯
、电话、自来水、无线电和电视。第四,除了跑步的选手外,旅客和行人都有交通工具
,航班通向各个方向,每个省都有飞机场,每个地方都有飞机制造厂的日子也不远了。
第五,每个人都受高等教育,教育已经普及。”这幅人民公社的美景,真让几亿农民乐
得合不上嘴。只是谁也没有去想... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 47 大跃进奇闻拾屑
成车的麻雀被作为战利品送上除四害展览会:
公社食堂要吃猴头、燕窝、海味
“大跃进”中,中央一些领导干部到基层宣传、描绘共产主义人民公社的美好前景
,以鼓励人民的奋斗热情。当时国务院一位副总理在河南省遂平县讲得最为具体,不妨
抄录下来。他说公社的好处在哪里?
“首先,有好的食物,而不仅仅是填饱肚子。每顿有肉、鸡、鱼、蛋,还有更精美
的食物如猴头、燕窝、海味等,都是按需供给。第二,衣服穿着方面,一切要求都可满
足。有各种花色和品种的服装,而不是清一色的黑色和蓝色。将来,普通服装仅作为工
作服使用,下班后,人们就换上皮服、呢绒和羊毛制服,当人民公社都养了狐狸,那时
外套就都是狐皮的了。第三,房屋都达到现代城市的标准。现代化是什么?人民公社。
在屋子的北厢有供暖设备,南厢有冷气设备。人们都住在高楼里,不用说,里面有电灯
、电话、自来水、无线电和电视。第四,除了跑步的选手外,旅客和行人都有交通工具
,航班通向各个方向,每个省都有飞机场,每个地方都有飞机制造厂的日子也不远了。
第五,每个人都受高等教育,教育已经普及。”这幅人民公社的美景,真让几亿农民乐
得合不上嘴。只是谁也没有去想... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 48 公社食堂要吃猴头、燕窝、海味
“大跃进”中,中央一些领导干部到基层宣传、描绘共产主义人民公社的美好前景,以
鼓励人民的奋斗热情。当时国务院一位副总理在河南省遂平县讲得最为具体,不妨抄录
下来。他说公社的好处在哪里?
“首先,有好的食物,而不仅仅是填饱肚子。每顿有肉、鸡、鱼、蛋,还有更精美的食
物如猴头、燕窝、海味等,都是按需供给。第二,衣服穿着方面,一切要求都可满足。
有各种花色和品种的服装,而不是清一色的黑色和蓝色。将来,普通服装仅作为工作服
使用,下班后,人们就换上皮服、呢绒和羊毛制服,当人民公社都养了狐狸,那时外套
就都是狐皮的了。第三,房屋都达到现代城市的标准。现代化是什么?人民公社。在屋
子的北厢有供暖设备,南厢有冷气设备。人们都住在高楼里,不用说,里面有电灯、电
话、自来水、无线电和电视。第四,除了跑步的选手外,旅客和行人都有交通工具,航
班通向各个方向,每个省都有飞机场,每个地方都有飞机制造厂的日子也不远了。第五
,每个人都受高等教育,教育已经普及。”这幅人民公社的美景,真让几亿农民乐得合
不上嘴。只是谁也没有去想一想,那稀有珍贵的猴头菌菇从哪里获得?价格昂贵的燕窝
(大... 阅读全帖 |
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d*****1 发帖数: 228 | 49 第十幕 龙墓
长江三峡水库,古时的“夔门”。
一个晴朗的夜晚,等待通过船闸的船只静静地泊在江面上,江面平静,江水到映着
星月光辉。孤零零的黑影站在江心小洲的岸边,默默地眺望,水声哗哗作响,令人想起
很多年以前。
很多年以前,这个小洲是一座山,站在这里望出去,是如同神斧噼成的夔门,春来
满眼都是绿色,风浩荡地吹起两个人的白袍。
黑影向着水面伸出手,古老的咒语如钟声行于水上。
水面出现了波纹,无数气泡从水底升起,水面腾起袅袅的白烟,钢水般的光芒流动
于水底,仿佛有火山在水底即将喷发。
江水沸腾,炽热的白气冲天而起,发出雷鸣般的巨响。江面开裂,数百吨滚烫的海
水向着天空激涌,而后化为水滴洒下。洒在漆黑的鳞片上,迅速地蒸发殆尽。
巨大的、无法用语言概括的生物。
他破水而出,仰天发出像是笑声又像是婴儿啼哭的声音,而后弯曲脖子,低下头,
和水边的黑影对视。他露出水面的身躯就近乎四层楼的高度,修长的脖子上遍布黑鳞,
沿着嵴椎,是锯齿般的黑色骨刺,刺破鳞片而出,古老的铁质面具覆盖了他的脸,只露
出妖异的黄金瞳。
不是亲眼见到,没人会相信世... 阅读全帖 |
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