q*******8
发帖数: 768 | 1
感受态的敏感性是不一样的，要检测感受态是否有功能，你要做的不只是阳性对照，还
要把你阳性对照里的质粒梯度稀释。
RESTRICTION ENZYME 也有讲究，NEB官网上对每个酶切位点都有评论，有的酶切位点就
是不好连。。。
另外TOPO TA真的很好用，超级快效率超级高，如果可以的话果断用TOPO的。 |
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f********e
发帖数: 15 | 2 最近在做CRISPR突变，得到一些indel mutation。因为是hetrozygous， 所以不做TOPO
cloning就看不出每一个allele的序列是什么。
记得以前有人曾经提到过用一个软件可以直接分析heterozygous的indel mutation序列
，只是现在记不得了，不知有人知道有什么样的免费软件可以进行这方面的分析？另外
，这样的准确度有多高？是不是就不用TOPO cloning了？ 多谢指教！ |
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T*****e
发帖数: 247 | 3 谢谢楼上各位的建议！
nchu：
protocol我不知道怎么让公司换。primer已经换过了还这样。RELP是什么？谢谢！
varianinccom：
他们就是质量控制发现绝大部分sample都很差。我在他家用了四年多了吧。这是第一次
这样大规模的出错。关键是这个测序的部分非常简单。invitrogen的pCR8GWTOPO，普通
的TOPO cloning vector。用通用的M13 primer测序，这个结合位点是在TOPO vector载
体上的。我只是插入PCR产物进去，跟引物结合位点还差了100bp以上呢。至于你提出的
加DMSO，我这种估计得专门跟他们沟通才敢加吧。
atwood：
我在他家以前一直也没啥问题，就最近两个星期。所以我才来这问的。不过你说没有问
题，那我再找找自己的原因。
extinguish：
有个别的sample用了free repeat了，还是不行。即使是测载体自身序列部分也有突变
。我就搞不明白这些突变是从哪来的了。
再次感谢大家的帮助！ |
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T*****e
发帖数: 247 | 4 谢谢楼上各位的建议！
nchu：
protocol我不知道怎么让公司换。primer已经换过了还这样。RELP是什么？谢谢！
varianinccom：
他们就是质量控制发现绝大部分sample都很差。我在他家用了四年多了吧。这是第一次
这样大规模的出错。关键是这个测序的部分非常简单。invitrogen的pCR8GWTOPO，普通
的TOPO cloning vector。用通用的M13 primer测序，这个结合位点是在TOPO vector载
体上的。我只是插入PCR产物进去，跟引物结合位点还差了100bp以上呢。至于你提出的
加DMSO，我这种估计得专门跟他们沟通才敢加吧。
atwood：
我在他家以前一直也没啥问题，就最近两个星期。所以我才来这问的。不过你说没有问
题，那我再找找自己的原因。
extinguish：
有个别的sample用了free repeat了，还是不行。即使是测载体自身序列部分也有突变
。我就搞不明白这些突变是从哪来的了。
再次感谢大家的帮助！ |
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d***p
发帖数: 306 | 5 不够亮是因为QY不够高，还是浓度低？
用于什么目的？
大多数合成方法文章上都有量子产率报道啊。
你不如检查一下样品纯度，无水无氧条件吧，
这和用topo还是脂肪酸的关系不是很大。
另外，topo好像是工业纯的比分析纯的量子产率要高 |
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r***u
发帖数: 37 | 6 不知道你说的亮是什么意思。
1，如果是type I 的话，core-shell 结构可以提高QY很多。前提是你合成方法过硬，
技术没问题。而且shell 厚度控制的好。
2， Qdots浓度对QY有影响，QDods M 太高，QY反尔会降低。
3，一般说来，modify Qdots 表面的stablizer会对Qdots的QY 有影响（我是只把
stablizer 从topo变成amine或者羧酸什么的，从而变成水溶性），但是不是很大，而
且要选对。选的不好，QY反尔降低。而且modify stablizer后容易aggregate，QD稳定
性下降很多。
所以，找pengxiaogang的文献，用topo－top系统做个core－shell是最好的方案。
good luck。
对了，有没有包子 啊？ |
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d**********t
发帖数: 82 | 7 不好意思，重复发帖了，着急ing。
忙乎在单纳米线CdSe器件组装上有好几个月了，还是没有很好的器件。这种~10nm 的纳
米线包着一层TOPO，别人提供的样品，我不懂合成。主要是光电流太小，小于5 pA（2V
电压，显微镜最大光强），大部分是500 fA。到了激光下，lock-in基本上测不出什么
电流了。大家有什么好主意啊，主要考虑的怎样去掉电极接触部分的TOPO。 电极金属
是Al，不好用In啊，我用FIB也做过了，金属只能固定在Pt（Pt只不是欧姆接触）。不
知道哪里出了问题，我是实验光谱出身的，结果这个课题需要先做器件，大家帮帮忙啊
！ |
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y****e
发帖数: 71 | 8 After reading the paper Space provide (actually can not understand them),
finnaly got some ideas about what Space are talking about.
You are talking about knotting of DNA, and we are talking about super-coil
of DNA. Knotting is another problem, and I agree that Topo II has some
problem to sense that, since there will be no different between knotted
and un-knotted DNA from Topo II point of view.
Guess you are need to get some idea about chemistry of that reaction. I
remember the reaction is ver |
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y****e
发帖数: 71 | 9
I remember a lot of old textbook say that ATP in Topo II is changing
conformation of the enzyme. Crystal struction of some enzyme resemble
Topo II also use similar mechnism. ATP is used to change enzyme
conformation.
However, if from pour energy point of view, it is hard to prove ATP is
only used in change enzyme conformation, because DNA is already bound
when ATP is hydrolyzed. Change enzyme conformation may also lead change
of DNA conformation (only my hypothesis, no prove in my acknowledg |
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s***e
发帖数: 911 | 10
最关键的是, topo II尺寸于DNA分子相比非常小, 而拓扑性质是整体性质.这个topo II
如何得知这整体性质是个问题... |
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s***e
发帖数: 911 | 11
超螺旋我知道.实际上超螺旋就是由linking number来描述的. topo II的作用也影响
linking number. type I topo也影响Linking number.
Sov.Phys.Usp.24(8),679,1981
也是一篇好文章... |
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s***e
发帖数: 911 | 12 是环状DNA分子构成. 分子在室温下的溶液里热运动.
分子的拓扑状态有几种: 1. 是否纽结; 2. DNA分子的两条链互相缠绕的圈数;
3. 是否有多个DNA圈套在一起.
拓扑状态的热力学平衡态分布有几种办法可以达到:
1. Ligation反应. 大概就是一开始让DNA非闭合,反应后闭合;
2. 依靠酶的帮助. 一种叫作TOPO I, 它剪断双链中的一根, 让另外一根穿越,然后在缝
好. 显然这个反应可以改变缠绕数; TOPO II---剪段双链, 自身穿越后才缝好. 这个
反应同时改变缠绕数, 扭结类型, 还有多DAN套叠... |
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s***e
发帖数: 911 | 13 TOPO II催化的系统1997年发现不到达平衡态, 可见TOPO II 对系统作了功,影响
了实验的方向. 我们去年发表了一个模型可以解释这个问题---模型里面最关键
处要求DNA第一次自交碰撞,并不立刻导致穿越发生, 只是把酶激发到一个可以
cut的状态; 这个激发态有一个衰退率, 如果在退化前第二次碰撞发生了, 就可以
发生穿越. 模型的计算表明, 必须要求激发态衰变特别快才能得到有趣的结果.
这就意味着前后两次自交碰撞必须间隔特别短. 反应模型里面.既然第一次碰撞
只是为了激发, 所以任何碰撞类型都有效,是overall的碰撞率; 第二次碰撞就要改变
拓扑, 是拓扑改变的特殊类型的碰撞. 这个碰撞率的比(knot-2-unknot/unknot-2-knot)
就可以由Boltzmann distibution决定下来. |
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N****y
发帖数: 45 | 15 不能这么比.汉藏语是和阿尔泰语对应的大语系.汉语族倒是可以
和突厥语族对应起来.其实如果不从语言上联系而只依照史书上的
记载,我们史书上说的突厥人跟现在的TURKS根本就是两个不对应的
概念,我们北魏隋唐史书上的突厥最初形成时,是个以阿史那氏为领导
(最狭义的突厥就是他们,但他们早就给灭了),以漠北丁零-铁勒为
主体的游牧民族群体,人种以蒙古种为主,语言文化也主要
是丁零-铁勒的语言文化(受些塞人的影响是可能的).而回纥则是铁
勒一支.回纥人风俗上也有搞狼崇拜,葬礼时以刀割面,"血泪俱下"什么的.
在后来的扩张及西迁的过程中又不断有其他游牧民族被突厥化.
后来出现在阿拉伯,波斯世界里的TURKS主要是大量的已被突厥
化的原塞人(这里广义指从中亚向西的草原上原各印欧语的游牧民族),
因此人种上以高加索人为主. 土耳其人也是属於后来被同化的TURKS
血统上他们多少杆子才打得着最初的突厥人谁也不知道.然而泛突的
基地在土耳其,所以他们的理论有一大部分都是要证明:突厥语和突厥文
化很早就在西方产生了,由游牧的吐火罗人(TURKIC)和塞卡人(TURKIC)带
到中亚,再向东带到蒙古草原的.至... 阅读全帖 |
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d*b
发帖数: 21830 | 17 你要自己玩过open street map的话，就会知道vector map分可route和不可route 2种
，vector map加route功能都不是很难。比如garmin的us topo在mapsource上不能route
, 但在GPS里能route...
商业化盈利模式的考虑，估计几笔政府经费用完了就停止更新了 |
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c**i
发帖数: 6973 | 19 Ian Johnson, On the Party Circuit, and Upsetting the Party. New York Times,
July 30, 2011
http://www.nytimes.com/2011/07/30/world/asia
/30chan.html?_r=1&scp=2&sq=chan&st=cse
Quote:
"He quickly realized, however, that if he wanted to be in touch with what
was going on in China he had to be in Beijing. 'At dinner people talk about
serious things,' Mr. Chan said. 'They want to make sense of China.'
"He still travels widely abroad, but is intensely interested in the thick
political gossip that swirl... 阅读全帖 |
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d*******8
发帖数: 87 | 20 握手。半个月后你又把我这个帖子顶上来了。我去年6，7，月买车时先是想买tech
model，后来无意中发
现base model 那个位置放ipad 正合适，不要任何配件，直接放上就行，非常好的，就
改主意了。我也是
用的CO-Pilot HD。
CO-Pilot HD， Navigon 等一些application 都自带map 的，完全不用data plan的，
所以有
1.5G左右。
如果你的ipad是3G的话，CO-Pilot HD 应当是用的GPS信号，荒郊野外一样用。
顺便严重推荐Motionx-GPS（不是Motoinx GPS Drive HD)荒郊野外hiking, geocaching
用，
$2.99,可以下载所有city map，park的trail 路线，topo map。 |
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m****s
发帖数: 18160 | 21 此表为精华区内所有feedback的统计（从04/01/2006开始）。制作此表的目的是为了让
大家能够了解近期feedback情况。由于feedback数量庞大，在制作此表的过程中采用了
电脑程序，以后也将继续使用此程序。所以，希望大家以后在留feedback时，能采用模
板发文，这样才能保证feedback能被正确的统计。
[0] MITBBS
[-] MITBBS
以下这些feedback题目都不合格：
1) 【＋】MITBBS
2) ++++++MITBBS
3) (+) MITBBS
4) [+] MITBBS, JIAOYOU8, HUAREN (只有第一个ID会被统计到)
5) [MITBBS]+++++
6) [+] 未名空间
最后更新：
+/0 feedbacks updated to Jul 29, 2012.
- feedbacks updated to Jul 29, 2012.
?? 3 0 0
?JINGO 1 0 0
A321321321 3 0 0
A7 17 0 0
AAAAA1 3 0 0
AAABBC 2 0 0
AAAPPP 1 0 0
A... 阅读全帖 |
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e*9
发帖数: 2289 | 22 类似案子的英文报道：
LOS ANGELES - A federal grand jury indicted a Los Angeles toy company
Thursday in a complex financial scheme to launder millions of dollars for
drug trafficking organizations in Mexico and Colombia. The drug proceeds,
which were allegedly laundered through numerous "structured" cash deposits
in the United States, were returned to clients when stuffed animals --
including Teddy bears and Topo Gigio dolls -- were exported to the foreign
countries and sold to generate local "clean" money... 阅读全帖 |
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K****D
发帖数: 30533 | 23 此表为精华区内所有feedback的统计（从04/01/2006开始，更古老的feedback已经
删除）。制作此表的目的是为了让大家能够了解近期feedback情况。
由于feedback数量庞大，在制作此表的过程中采用了电脑程序，以后也将继续使用
此程序。所以，希望大家以后在留feedback时，能采用模板发文，这样才能保证
feedback能被正确的统计。
正确的题目格式为 (replace MITBBS with the ID you are leaving feedback for):
[+] MITBBS
[0] MITBBS
[-] MITBBS
以下这些feedback题目都不合格：
1) 【＋】MITBBS
2) ++++++MITBBS
3) (+) MITBBS
4) [+] MITBBS, JIAOYOU8, HUAREN (只有第一个ID会被统计到)
5) [MITBBS]+++++
6) [+] 未名空间
最后更新：
+/0 feedbacks updated to Jun 30, 2011.
- feedbacks updated to Jun 30... 阅读全帖 |
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m****s
发帖数: 18160 | 24 此表为精华区内所有feedback的统计（从04/01/2006开始）。制作此表的目的是为了让
大家能够了解近期feedback情况。由于feedback数量庞大，在制作此表的过程中采用了
电脑程序，以后也将继续使用此程序。所以，希望大家以后在留feedback时，能采用模
板发文，这样才能保证feedback能被正确的统计。
[0] MITBBS
[-] MITBBS
以下这些feedback题目都不合格：
1) 【＋】MITBBS
2) ++++++MITBBS
3) (+) MITBBS
4) [+] MITBBS, JIAOYOU8, HUAREN (只有第一个ID会被统计到)
5) [MITBBS]+++++
6) [+] 未名空间
最后更新：
+/0 feedbacks updated to Aug 26, 2011.
- feedbacks updated to Aug26, 2011.
===========================================
ID + 0 -
============... 阅读全帖 |
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m****s
发帖数: 18160 | 25 此表为精华区内所有feedback的统计（从04/01/2006开始）。制作此表的目的是为了让
大家能够了解近期feedback情况。由于feedback数量庞大，在制作此表的过程中采用了
电脑程序，以后也将继续使用此程序。所以，希望大家以后在留feedback时，能采用模
板发文，这样才能保证feedback能被正确的统计。
[0] MITBBS
[-] MITBBS
以下这些feedback题目都不合格：
1) 【＋】MITBBS
2) ++++++MITBBS
3) (+) MITBBS
4) [+] MITBBS, JIAOYOU8, HUAREN (只有第一个ID会被统计到)
5) [MITBBS]+++++
6) [+] 未名空间
最后更新：
+/0 feedbacks updated to Aug 26, 2011.
- feedbacks updated to Aug26, 2011.
===========================================
ID + 0 -
============... 阅读全帖 |
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F*****e
发帖数: 4 | 26 sorry, topo error $115 ship free, |
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m******s
发帖数: 665 | 27 自2006年1月份以来二手市场建立了feedback制度，方便大家在交易的过程中给大家提
供一个公平交易的评价方式。
为了便于大家查找信誉，请标题用规范的格式。
以下这些feedback题目都不合格
1，【+】MITBBS
2，+++++++MITBBS
3，(+)MITBBS
4,[+]MITBBS,JIAOYOU8,HUAREN(只有第一个会被统计到)
5，[MITBBS]+++++
6,[+]未名空间
本次统计的截止日期为：
+ 的统计截止日期到 Sun Aug 15 2012
- 的统计截止日期到 Sun Aug 15 2012
id + 0 -
?? 3 0 0
?JINGO 1 0 0
A321321321 3 0 0
A7 17 0 0
AAAAA1 3 0 0
AAABBC 2 0 0
AAAPPP 1 0 0
AAATY 1 0 0
AADDOO 5 0 0
AANON 6 0 0
abao2000 2 0 0
abc111 1 0 0
ABCD123 5 0 0
ABCDEFGHIJK 1 0 0
ABED 32 1 0
ABERDE... 阅读全帖 |
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m******s
发帖数: 665 | 28 TAID 2 0 0
TAIGER 2 0 0
taishici 4 0 0
TaleTell 1 0 0
TALKTIVE 2 0 0
TALLY 49 0 0
TAMAGO 1 0 0
TAMBOVWOLF 5 0 0
TANFOON 1 0 0
TANFTHUST 1 0 0
TANG318 1 0 0
TANGERINE 9 0 0
TANGMU 3 0 0
TANK 2 0 0
TANL 2 0 0
TANS 1 0 0
TAOBAOBAO 4 0 0
Taobear 1 0 0
TAOHE 1 0 0
TAOJM2001 2 0 0
TAOMOON 2 0 0
TAOTAO701 11 0 0
TARA 1 0 0
TARGETLADY 47 0 0
TARTARUS 1 0 0
TASSEL 1 0 0
TAVI 2 0 0
taweiho 8 0 0
tayshung 1 0 0
tbirdie 1 0 0
TCAT 1 0 0
TCBC 2 0 0
TEA91 1 0 0
TEAPOT 18 0 0
TECNAI 1 0 0
TEDDYDOG 7 0 0
TEDDYX... 阅读全帖 |
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j********x
发帖数: 2330 | 29 topo sort 要在确定dag之后做，反过来干嘛。。。 |
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g*********e
发帖数: 14401 | 30 请问这些题目都需要写code吗？感觉topo排序不好写啊 |
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p*****2
发帖数: 21240 | 32
其实就是BFS。我第一次见这种东西还不知道有topo sort这个东西，用BFS就可以做出
来。你想像。 |
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K*********n
发帖数: 2852 | 34 呃没看懂，那就是说写topo sort之需要找任意一个入度为0的点为source？ |
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l*****a
发帖数: 14598 | 35 M的A3电面问你topo sort显然就是想搞你
按说他们的onsite都不见得问到这咚咚 |
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o***d
发帖数: 313 | 37 怎么用adjacent list觉得这么麻烦,每个node前后的edges都要管理 |
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a*******n
发帖数: 64 | 41 能展开说说吗？
这个问题主要不是怎么用topo sorting and DP去找longest path
而是问如果给你找到shortest path的算法，问怎么改graph去找longest |
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r*******e
发帖数: 7583 | 42 这些都是问system design，没有图论的细节题吧
我被问过的图相关的有topo sort, min spanning tree, min cut这些 |
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f********x
发帖数: 2086 | 43
outdegree
第三题这种不是topo排序么？ |
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g*********e
发帖数: 14401 | 44
毫不扯淡。
比如你有个有向图，图里每个node都可以是一个小图，你要给这个大图做优化，递归最
好写。
还是这个图，求它的topo order算dependency，就得dfs。
电路里面做静态时序分析，那都是dp。
用位来存储一些数据结构，或者做查找表，节约空间。更抠的还有把flag存到指针低位
的 |
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T***9
发帖数: 73 | 46 我妈妈上个月刚刚做的乳腺根治术＋一期化疗（手术后一周开始的），63岁，有糖尿病，现在继续胰岛素治疗
。
家族病史：我姥姥55岁的时候死于乳腺癌。
病理诊断： 左乳浸润性导管癌II级，（S1：1.5x1cm, S2: 2x1.5cm, S3:1.5x1.5cm),
腋下淋巴结6／25查见癌。 乳头，基底未见癌。
免疫组化：PR（10％癌细胞阳性） ER（95％癌细胞阳性） C-erbB2 (2+), ki-67（10
％） P53（－） P120(膜＋） E-Cadherin (+) TOPO II （－）。 FISH检测待检。
现在医生建议 4个疗程CEF + 4个疗程TAC。我想问问这个方案是否可行，有没有更好的
方案， 担心8个疗程老妈的身体吃不消，有没有必要用雌激素疗法？老妈感觉一期化疗尚可，化疗后头三天较疼，第四天开始可以睡整觉了。象我妈这种情况，生存率高吗？
另外有没有其他需要做的检测？
现在炖乌骨鸡汤，黑鱼汤，鳖汤给老妈补身体，灵芝孢子粉有用吗？ 问了医生，医生
建议用食补。
多谢了！ |
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T***9
发帖数: 73 | 47 我妈妈4年前做的乳腺根治术＋８期化疗（4个疗程CEF + 4个疗程TAC）。10天前腰椎疼
，CT检查显示骨转移。我妈妈今年67了，有糖尿病，现在继续胰岛素治疗。
4年前的诊断报告：
病理诊断： 左乳浸润性导管癌II级，（S1：1.5x1cm, S2: 2x1.5cm, S3:1.5x1.5cm),
腋下淋巴结6／25查见癌。 乳头，基底未见癌。
免疫组化：PR（10％癌细胞阳性） ER（95％癌细胞阳性） C-erbB2 (2+), ki-67（10
％） P53（－） P120(膜＋） E-Cadherin (+) TOPO II （－）。 FISH检测待检。
现在医生建议的方案是： 斑蝥酸钠维生素B6注射液， 乌苯美司胶囊， 参莲胶囊，楼
莲胶囊，地塞米松。
这个方案可行吗？有没有更好的方案？
象我妈这种情况，生存率高吗？
另外有没有其他需要做的检测？
多谢了！ |
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s**o
发帖数: 144 | 48 【 以下文字转载自 PDA 讨论区 】
发信人: sumo (Super), 信区: PDA
标 题: 新手请教 GPS 地图
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Dec 6 10:25:50 2010, 美东)
tomtom 540 有topograph，能和street map装一张卡上切换吗?内置的２G卡是microSD
?能自己换成4G或８G吗？想要一个能兼容topo的偶尔用用，有什么型号好用的还请各位
高人推荐！谢谢！ |
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S*********g
发帖数: 24893 | 49 Stock版 - 我来发一个中线的pick吧。
1
我来发一个中线的pick吧。
时间：3到6个月，30％以上的利润。
Mkt Cap>5B，风险不大，可以all in。
免费。
想要的跟贴。
spasm
2013-12-02 12:52:46
来自: 0.0.
2
all in 跟
thanks. prof.!
JJCNJ
2013-12-02 12:52:55
来自: 0.0.
3
求
谢谢
winner8888
2013-12-02 12:52:57
来自: 0.0.
4
我要， Thank you,
allence
2013-12-02 12:53:06
来自: 0.0.
5
pick please, thanks
happy6688
2013-12-02 12:53:16
来自: 0.0.
6
thank you very much.
bigbelly
2013-12-02 12:53:25
来自: 0.0.
7
thx
JesusLee
2013-12-02 12:53:25
来自: 0.0.
8
re
researchba
20... 阅读全帖 |
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l*****y
发帖数: 186 | 50 同问，不知LZ等了多久了呀？
我的是4月底递的，也没有消息。
不是说60天给答复吗？
topo, 你是我听说的第二个过了60天也没有消息的了
bless! |
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