A******y 发帖数: 2041 | 1 What's your substrate? Are you using Enzo substrate? If your hela cell
extract didn't work, don't expect the HDAC6 to work.
Check your pH...should be 8
Do the incubation at room temp first.
HDAC6 is fragile...I will get them from BPSbiosciences.
Go buy a tube of Boc-Lys(ac)-AMC from Bachem or Anaspec and make the
substrate youself in DMSO...
watch your %DMSO...more than 1% in the reaction mix will not work (yea, I
know someone say they have 5%...sure)...
If you are trying to deacetylate isolat... 阅读全帖 |
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l***7 发帖数: 50 | 2 用10%的DMSO是网上看到的,也有人用3%-8%的DMSO。
没有positive control。这基因GC含量很高,ORF含有72%的GC。我重新设计了一对不带
酶切位点(接头)的引物,今天刚从genomic DNA里扩出了一条大小相符的带。明天重
复一下,就送去测序看看。
谢谢。 |
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w********r 发帖数: 1431 | 3 1.wash cell twice with PBS
2. incubate with DSP/DMSO/PBS solution for 20min at RT (freshly!!! prepared
DSP,2.5mg DSP-->480ul DMSO-->12ml PBS, final 200ug/ml DSP)
3. wash 2XPBS
4.incubate 5min with 50mM Glycine/PBS
5. wash with PBS
6. harvest cell in RIPA buffer with PIM, w/o DTT!!!, followed by CO-IP. Wash stringently with RIPA before WB.
Good luck! |
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i*****g 发帖数: 11893 | 4 飞机上不允许干冰 最好不要,否则被查到,麻烦
这个类似高速超速,没人逮着算了,有人抓住你,就是麻烦。
几十个tube,就那么运,扔在行李箱里,散开放
运输不要加DMSO,到目的地后培养或加DMSO冻
飞机上24个小时,细胞还是抗得住的 |
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g***y 发帖数: 201 | 5 1. use betain instead of DMSO. I tried them side by side and found that
when I used DMSO, there was increased error rate.
2. try phusion:taq 1:1 mixture instead of phusion alone. |
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s******s 发帖数: 699 | 6 想在果蝇胚胎里测一种药物(水溶性比较差),药物介绍上说让用DMSO溶,可是我们发
现DMSO control会影响胚胎发育.请问一下大家有没有别得什么比较好得溶剂可以使用
,先谢谢大家了:) |
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s******y 发帖数: 28562 | 7 可以。用DMSO 溶解,分成小管放。
不过我都是把粉末分成小管放,事先称好粉末的重量,需要的时候加入
相应体积的DMSO当场用 |
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n**7 发帖数: 90 | 8 新手问一下关于2-bromopalmitate (2-bp)的一些使用问题:
我用100% DMSO溶解后,用细胞培养液倍比稀释 (DMEM,10%FBS,1% pen/strep),准备
做cytotoxic assay看不同浓度的2-bp对细胞的影响。但是发现在200uM和100uM 2-bp的
浓度下有很多黄色的絮状沉淀,不知道为何物,也不知道会不会因为这个原因影响细胞
状态,而非药物作用。不知道用过的人有没有这个问题。
所以我有几个问题如下:
用DMSO溶解2-bp正确么?我头天溶解了,室温下避光overnight后,第二天稀释了用,
是否2-bp必须要fresh配呢?
10% FBS会和2-BP作用么?
因为实验室确实没人用过这个问题,想请教各位大侠,不胜感激 |
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s****l 发帖数: 513 | 9 是一下1%的DMSO看能不能溶解你的化合物。1%DMSO一般不会让蛋白质变性。
口服药物是经过formulation的吧。
对了,你可以看一下人家弄成药物的时候是不是做成了盐形态。而你用的还是
hydrophobic的。 |
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a*****v 发帖数: 128 | 10 有核磁的文章是用1%DMSO做蛋白质滴定的么?
这个破药物,就是一个咪唑环还能带点点,其他的根本没法成盐啊...
他们做细胞实验的时候也是用DMSO溶解的。
但是核磁,真的是希望完全溶解的...
文章中说的口服药是in a vehicle contained 33.3% Simple Syrup and 66.6% 0.1 M
citrate buffer.也没说syrup的配方,柠檬水也没说啥... |
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V**3 发帖数: 12756 | 11 做结构用DMSO也很正常,一般来说,最终DMSO含量低于5% 或者10% 不会导致变性(这
个需要试验)
另外你需要看一下滴到溶液中就沉淀了,沉淀的是光drug还是也有蛋白 |
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a**y 发帖数: 464 | 13 我没有鄙视生物的意思。我原文的意思是如果认为生物是比普通化学更加复杂的化学反
应,
很明显现有的生物研究者需要更多的化学训练。反过来,作化学的需要生物训练的
重要性早就意识到了。
我觉得不论做什么实验之前,需要大致的想一下实验的原理。对生物和化学都应该是
适用的。不应该把一切都交给kit。
比如一个常见的现象,你看发表的文章有用DMSO做control的,有多少也作了没有DMSO
的实验的?
当然,化学背景在这个问题上问题更大。很多都不会做任何的control。 |
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l**********1 发帖数: 5204 | 14 LZ U R Lab 有老印不? 莫非她/他 偷偷加了点10% DMSO 到那个 Tag 1 ml tube 了
? !
Taq DNA Polymerase (Native & Recombinant)
www.invitrogen.com › ... ›
Standard PCR EnzymesTaq is inhibited 47% at a concentration of 10% DMSO |
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r******g 发帖数: 600 | 15 Seahorse XF24 我们这边买的好像是150K
挺贵的
一开始送了很多很多kits,如果自己买挺贵的
这个机器的稳定性非常不好,我一个24 well的plate 只能跑2个sample
意思就是1个sample 11个replicates....
你仔细读paper会发现,很多seahorse data里面给的stats都是+-SEM
你说的那种全部都是直线的情况:
1. 你的medium用的对不对?你用的seahorse自己的mito stress medium还是自己配的
?成分对不对?
2. 你的ABCD孔加对没? (可能性不大,不然不可能是一直直线)
3. 仔细读manual,inhibitor只有一个瓶子里面有powder,其他的瓶子都是空的
aliqouts,我们一般是180uL DMSO resuspension,然后,分装12个aliquots X 15uL (
kit送6个空瓶子?我们自己再准备6个)
也许你加到ABCD孔里面的全是DMSO,那就没用了
我很不喜欢seahorse这个机器,相当浪费钱和时间... 除非你有非常显著的phenotype
,否则 要... 阅读全帖 |
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h******y 发帖数: 351 | 16 How To Make Your Own ECL
ECL can be an expensive reagent in a lab, and what with it being involved in
the final stage of a western blot, it’s something you don’t want to have
to worry about too much. During my PhD, I was struggling with my western
blots for ages – it seemed I was doing everything right, I just wasn’t
getting any signal in the dark room. At the time I was using a pre-made ECL,
and a friend that I shared lab space with suggested I try her home-made
brew. I was sceptical at first, ... 阅读全帖 |
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w*s 发帖数: 50 | 17 Prep HPLC,样品不溶于水,在乙腈里溶解度极低。只溶于DCM或DMSO,怎样上样啊?起
始洗脱50% MeCN/H2O。老问题了,一直找不到好的solution。只有一根柱子,不敢用太
多DMSO上啊。 |
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c****n 发帖数: 134 | 18 I just tested your idea. The sample is PIB(DP=50)-b-PVA(DP=200).
The sample was dissolved in DMSO. Then 10 times of water was added (the
solution became very hot in the beginning, hehe).
It remained homogeneous. So you are right :) The DMSO functions to break the
intramolecular H-bonding of PIB-b-PVA, but water is too weak to work in the
same way. Water can only break the H-bonding of homoPVA. Once the H-bonding of
PIB-b-PVA is broken, the sample is readily soluble in water.
Now the problem is: |
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C***S 发帖数: 175 | 19 可能你用的水解度比较低吧。
我用PVA做凝胶时,直接就可以溶解在DMSO中了。不过DMSO的味道不好。 |
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p****e 发帖数: 40 | 20 关于1: 不清楚,不过觉得应该不是结构单元数。应该是和detector信号强度对应的,
所以我认为对应着不同size的population,就是个相对值,和质谱峰强度的意义差不多。
关于2:我自己的经验(不是很丰富,只测过我自己的一个样品,供参考)。我用的是
DMSO做流动相,也是考虑到标样选择的问题,我查了文献,这样的体系的确不多,不过
有人用dextran 或者pullulan做标样,其实这两种标样一般是用于水相GPC的,考虑到
他们的极性也都比较大(聚糖),应该还是有对比价值的。最后我用了detran,我实际
上是用它作为一个对比样品(因为我们只有一个分子量的样品),并非严格意义的标样
。GPC系统的标定其实还是用的PS(THF流动相),然后测了那个detran(DMSO流动相w/
1g/L LiBr),结果和标签值吻合,我也就据此认为用这个体系测我的样品数据是可靠
的。 |
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a*****v 发帖数: 128 | 21 如题
蛋白质溶于水溶液,但是药物只溶于Ethanol和DMSO, ACN。
然后我最低可以用50%ACN溶解该药物,
但是滴定到蛋白质溶液中立刻就沉淀了。
最终是要作蛋白质NMR,不能用有机溶剂让蛋白质变性阿。
而且该药物还是用于口服的药物,这是怎么起作用的呢?
碰到这种情况,大家怎么办呢?
注意,是说做结构的时候能不能加有机溶剂,做细胞实验的时候是加DMSO溶解的
这个帖子是在别人的建议下从生物版转过来的 |
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h*******l 发帖数: 16 | 22 本人非药学专业。
一种非水溶性药物,可以溶解在DMSO里面,但是溶解度也不高。需要用DMSO配置固定浓
度的STOCK SOLUTION(10^-5 M).又是加热又时sonicate,好不容易总算是把药物溶进去
了。但是不确定是不是达到目标浓度了。请问有什么方法可以确定溶液的浓度呢?谢谢
! |
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w*********g 发帖数: 30882 | 24 平井宪夫揭示日本核电业惊天内幕——素人造核电,豆腐渣工程
作者:蜀中行 更新时间:2011-3-16
设施配管1级技士平井宪夫(1997年1月因癌症逝世)生前的最后吶喊。
/来自中华网社区 club.china.com/
/来自中华网社区 club.china.com/
关于平井宪夫:
1997年1月逝世。设施配管1级技士,核电事故调查国民会议顾问,核电劳工救济中
心代表,北陆电力志贺核电厂停止诉讼原告特别辅佐人,东北电力女川核电停止诉讼原
告特别辅佐人,福岛二号核电厂三号机运转停止诉讼原告证人。「核电劳工救济中心代
表」在他仙逝后,因后继无人关闭
"我不是反核运动家。这20年来,我一直在核电厂工作。社会上有听不完的拥核反
核理论,但我只想在这里告诉大家:「所谓的核电厂是这样一回事。」大部份的人都不
知道核电内部的实际情形。希望大家有耐心把这篇文章读完。所谓核电,跟各位所想的
或许有点出入。在那里,每天都有遭受放射线污染的工人,以及严重的岐视产生。
我的专长,是负责大型化学工场的内部配管施工与维修。快30岁时,日本掀起了一
阵核电建设的... 阅读全帖 |
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K**********n 发帖数: 1197 | 25
跟这帮自称理科的文科生物wsn实在纠缠不清楚。给丫们上点洋大人自己的说法吧,而
且都是学术圈的,已有reference一堆,其中一份是著名的兰德公司的报告。
另外,美国和澳洲已立法限制使用脑波扫描仪,拿脑波扫描仪扫本国公民已是联邦法的
重罪。不过这个比较难的是你无法证实谁接收了你的脑信号。所以立了法跟没立一个样。
Remote Mind Control Technology
Reprinted from SECRET AND SUPPRESSED: BANNED IDEAS AND HIDDEN
HISTORY, edited by Jim Keith, $12.95, available from
1-800-680-INET.
There had been an ongoing controversy over health effects of electromagnetic
fields (EMF) for years (e.g., extremely low frequency radiation and the
Navy's Project Sea... 阅读全帖 |
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d*******3 发帖数: 8598 | 27 有现成更好啊
精确称量一下,DMSO溶解一下,然后在淀粉糊糊里面搅拌,弄个药丸,就不可以了么 |
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f***y 发帖数: 4447 | 28 http://mil.news.sina.com.cn/china/2016-02-16/doc-ifxpmpqt130362
科技日报》15日报道,中国黑龙江省天顺化工科技开发有限公司承担的“T700级碳纤维
碳化中试生产线及工艺研究”项目2月5日通过鉴定。据相关政务公开信息,该项目年产
量为5吨碳纤维。这家企业生产线的特点是成本低廉,污染少,其生产的T700级碳纤维
成本可控制在每公斤200元以内。这被认为解决了国内高性能碳纤维生产成本高、质量
不稳定的关键瓶颈问题。目前我国已有超过10家企业在研制生产高性能碳纤维。
国产碳纤维技术出现突破固然喜人,但也有业内论文警告,近年来国内出现“碳纤维热
”,众多科研院所和企业纷纷启动了碳纤维研究或千吨级产业化项目。虽然当前国内市
场对碳纤维产品需求较大,但几年以后,市场出现过剩将成为必然。
天顺化工的发展之路
《科技日报》的报道中提到,该项目经过5年艰苦卓绝的创新攻关,终于突破高性能碳
纤维生产的关键技术。据该公司总经理孟凡钧介绍,该项目采用独特的纺丝工艺、DMSO
溶剂回收技术、精密的碳化生产技术及先进的废水处理技术,质量稳定,生产成本低... 阅读全帖 |
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V*****2 发帖数: 7930 | 29 得90%的细胞培养基,加10%的甘油或者DMSO,放在液氮罐里,普通-20C冰箱无效。化冻
在37C水浴锅搅动,快速化冻。 |
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v*******n 发帖数: 8995 | 30 多放点dmso
就行
我们千老都知道
★ 发自iPhone App: ChinaWeb 1.1.5 |
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v**e 发帖数: 8422 | 31 有人做的抗流感研究
大蒜油抗流感病毒作用及机制研究
山东大学 | 郑倩倩
目的 流感是一种由流感病毒感染引起的急性呼吸道传染病,具有发病快、传染性强等特
点,曾多次造成世界范围的大流行,严重影响人们的日常生活和身体健康。对于流感的防
治,目前还没有安全性和有效性都较理想的方法。大蒜油有防治冠心病、酒精性脂肪肝
、杀菌、抗癌、杀虫等多种功效,其抗巨细胞病毒、肠道病毒、鼠肝炎病毒、生殖器疱
疹的研究已经有了初步进展,但大蒜油抗流感病毒作用的研究还未见报导。本研究通过
体外培养的细胞和动物模型,对大蒜油的抗流感病毒作用进行了研究,并对其机制进行了
初步的探讨。为大蒜油用于流感的防治提供了科学依据。 方法 1、流感病毒的增殖:
将0.2mL人季节性H1N1流感病毒(以下简称流感病毒)接种于10日龄的鸡胚尿囊腔内,于34
℃孵育箱里孵育44-48h,每日照检,收获前放于4℃冰箱6h。无菌吸取尿囊液,接种于下一
代鸡胚,方法同上,直至尿囊液中流感病毒的血凝滴度>1:128。然后将符合条件的尿囊
液混匀,-80℃保存备用。 2、大蒜油抗流感病毒作用的体外研究:常规培养MDCK细胞,
采用细胞病变法(... 阅读全帖 |
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P***y 发帖数: 529 | 32 http://lt.cjdby.net/thread-1039755-1-3.html
如何才能不去顾忌J-20 原创翻译完工 Bill Sweetman 新博文和相关评论 更有深度
昨天翻译了一篇有关J-20的Bill Sweetman的博客和相关评论《成都的迷雾消散中》,
反应不错。
年底正好不忙,今天再翻译一篇他新的博文和评论,早上看过一遍,觉得更有深度。
首先是Bill Sweetman空间上的本人介绍,当然是业内专家。
他的看法可能比我们的一般专家贵宾要更有价值。
Bill Sweetman
Washington DC
About Me: Bill Sweetman is Editor in Chief of Defense Technology
International.
My Company/Organization: Aviation Week Group
My Job Function: Editor in Chief
My Areas of Expertise: Defense Media
My Areas of Interest: Advanced techno... 阅读全帖 |
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l****n 发帖数: 768 | 33 先试试乙醇,不行就丙酮,再不行用DMSO吧
也许walmart有专门的去树脂的水卖 |
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z*****1 发帖数: 130 | 34 thank you dmso for the help and time !|
to |
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l*******i 发帖数: 153 | 35 文章发了,你就没法patent了。
Nature methods可以试一下。前段时间有一篇文章讲提高人多能干细胞分化效率的,方
法及其简单,就是先用DMSO短暂处理一下细胞,然后分化效率就可以提高几倍,但机理
说不清楚。这文章就发在了Nature methods. |
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r*********y 发帖数: 28 | 36 我是做有机化学的,每天都接触DMAc, DMSO, DMF,methanol等等溶剂. 一直做实验到
孩子出生的那天早上。然后生完孩子5个星期就回去做实验了。 |
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l****l 发帖数: 833 | 37 ☆─────────────────────────────────────☆
MITCWSN (买买提首席猥琐男) 于 (Wed May 30 10:38:27 2007) 提到:
一次打球把肩膀弄伤了,好像又2个月了,到现在还没有完全好。
听别人的建议用DMSO CREAM,倒是起作用,可能是因为这期间还一直在打球,所以一直
没有好,特别是反手回抽的时候,会感觉到酸疼。
不知道会不会有什么后遗症啊!有经验的说说...
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Smash (嘶马斜杀球-Do People Want Thick Road!) 于 (Wed May 30 10:58:18 2007) 提到:
俗话说,伤筋动骨一百天。 最后是完全把伤养好之后,再恢复运动。弄成习惯性老伤
,就是一辈子的事了。所以,每次打球千万不要忽视热身,宁愿少打五分钟,也要热透
,降低受伤的几率。
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ktw (饭老赵之Frank) 于 (Wed May 30 |
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f*****f 发帖数: 1270 | 43 我上次洗一个unc的云南半开,这个币含银低,我泡久了点,把地板洗坏了,哭死 |
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a*****4 发帖数: 3081 | 45 bless一下先,再问一下技术问题。有机溶剂加超声能洗掉啥?是不是就是手印之类的
东?能洗掉一般的带锈污垢吗?轻微的边缘氧化,大家怎么洗的?给个recipe吧 |
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c******n 发帖数: 16403 | 47 不会是实验室的HPLC/LCMS用溶剂吧? 哈哈 |
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