a*******l
发帖数: 116 | 1 我的理解是，assisted hatching一般是岁数大一些的建议做，这里很多jms移植的是
day 5的blastocyst。但是这2个都是要听医生建议的，尤其blastocyst culture,我觉
得不是自己选择的，是医生根据当时embryo的情况决定做到什么stage.这就是医生一般
在ER以后并不能马上告诉你是第三天还是第五天ET,因为要看embryo的发展情况。
价钱方面不了解。 |
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h*******d
发帖数: 1191 | 2 如果是我,我选blastocyst culture.因为如果你的受精卵能到blastocyst的话就说明卵
质量很好成功的希望就很大,我上次尽管做了AH还是失败了,因为卵的质量不好. |
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j********r
发帖数: 156 | 3 The experiment is to isolate blastocyst for cloning mouse embryonic stem
cells. Can anyone give me a
protocol? I couldn't find any on the web. Also I was told to start with 21
days mice, and to mate them on day
23 after stimulating the females with hormones (PMS and hCG). Are they too
young?
Thanks a lot! |
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a******n
发帖数: 392 | 4 你碰到什么问题了？第一天中午注射PMSG,第三天中午注射hCG，当天放入公老鼠。第四
天上午检查有没有交配。如果有交配，第七天解剖老鼠，冲出blastocyst. 21天的母鼠不算太小了。 |
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W******e
发帖数: 745 | 5 我现在想买一个package来做IVF，虽然贵一点，但是不成功的话，可以随时退出，他们
退70%的钱。
这个package cover以下两个项目中的一个：Assisted Hatching or Blastocyst
culture。如果两个都做的话，自己要交钱cover其中的一个。
大家看看，哪个更重要，哪个更贵？谢谢！ |
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G*********a
发帖数: 328 | 6 Copied from a website:
Day transfer -
1dpt... Embryo is growing and developing
2dpt... Embryo is now a blastocyst
3dpt... Blastocyst hatches out of shell on this day
4dpt... Blastocyst attaches to a site on the uterine lining
5dpt... Implantation begins,as the blastocyst begins to bury in the lining
6dpt... Implantation process continues and morula buries deeper in the
lining
7dpt... Morula is completely inmplanted in the lining and has placenta cells
&
fetal cells
8dpt... Placenta cells begin t |
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b*******n
发帖数: 8420 | 7 先用同源重组技术把小鼠胚胎干细胞DNA里面的某个基因敲除，然后再注射到
blastocyst里面，这个东西发育成胚胎，长成嵌合体老鼠，因为blastocyst里面只有一
部分细胞来源于胚胎干细胞，所以只有部分细胞是基因敲除的。如果生殖系统恰好也是
基因敲除的，通过杂交就可以得到基因敲除的老鼠。整个过程费时费力费钱，根据运气
大概1-2年能得到最终需要的老鼠。
前两天有个RIKEN的来做报告，说他们觉得这个过程太慢了，想直接用胚胎干细胞发育
成blastocyst，这样就省去了嵌合体老鼠这一步。 |
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k******3
发帖数: 41 | 8 28 eggs retrieved, 20 matured, 17 fertilized, 8 developed into blastocysts.
Didn't feel any pain after egg retrieval...1 blastocyst transferred at the
first try,failed. 2 blastocysts transferred at the second time. Positive
pregnancy, but no embryo and heartbeat found at 7 week 5 days ultrasound (DC
'd by taking medicine). Still have 5 blastcysts left, planning to transfer 2
next time. God bless! |
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r****o
发帖数: 105 | 9 本文献给YL
（八）Matrix Reloaded
六月七号第一天实验中最重要的一个项目是胚胎子宫转移（uterine transfer）。
这个实验的目的在于把经过体外培养和修饰过的囊胚（blastocyst）放回到假孕小鼠的子
宫里，使之着床（implantation）并且正常发育。没有这个技术存在，基因敲除小鼠是绝
对做不出来的。前面提到过，Anne Mclaren一手发展了这个技术，奠定了小鼠胚胎研究的
基础。原始的文章发表在Nature上，有兴趣的同学可以查阅一下：McLaren A. and
Biggers J.D. 1958. Successful development and birth of mice cultivated in
vitro as early embryos. Nature 182:877-878。
把囊胚（blastocyst）放入子宫（uterus）本身并不能保证囊胚的正常发育，只有
当囊胚正确的着床（implantation）之后才能进一步发育。而顺利的着床（implantation
）需要怀孕雌鼠在特定时间“窗口”大量分泌一些激素。由于这种激 |
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m***f
发帖数: 1622 | 10
扯淡呢，看看高最近两年发表的文章吧
CELL STEM CELL, JBC, STEM CELL, PNAS，都是很不错的
就这样还不能PROMOTION? 在美国都可以tennure了
1. Wu T., Wang H., He J., Kang L., Jiang Y., Liu J., Zhang Y., Kou
Z., Liu L., Zhang X., Gao S. (2011) Reprogramming of trophoblast stem
cells into pluripotent stem cells by Oct4. Stem Cells 2011 Feb 8.
[Epub ahead of print].
2. Kang L., Wu T., Tao Y., Yuan Y., He J., Zhang Y., Luo T., Kou Z.,
Gao S. (2010) Viable mice produced from 3-factor induced pluripotent
stem (iPS) cells through tetrapl... 阅读全帖 |
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g***y
发帖数: 201 | 11 应该是因为male chimera are more desirable. 如果运气不好，只有一两只老鼠是
chimera，
或者是ES cell contribution比较少，需要筛选很多后代才能得到germline
transmission,
公老鼠breeding就比母老鼠要有优势。
用来注射ES cell 的blastocysts 的性别比是 50：50，但是如果ES cell
contribution比较多的话，
就很可能把本来应该发育成母老鼠的“受体” blastocysts “反转” 成公老鼠。所以
得到chimera是公老鼠
的概率总是比母老鼠要大。
选xy ES cell唯一的drawback大概就是如果想target x-chromosome gene,得到正确克
隆的概率要小些。 |
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Y***y
发帖数: 60 | 12 pat pat
我觉得你有点紧张了，不知道你的医生给你transfer之前有没有让你吃类似安定的药，
我transfer那天早上起来因为紧张胃疼，后来transfer之前一小时吃了那个药，之后人
就比较放松了。
还有day5 transfer一般都是blastocyst，我有一个embryo培养到第五天是10细胞的，
其他的都是blastocyst了，所以那个10细胞的就discard了
JMs都回答的很详细了，具体回答你几个问题
1. 你们在医院休息多久才回家？在医院躺着时，是平躺还是侧躺?腿蜷着吗？我就休息
了30分钟，其中第10分钟自己爬上另一张床。
我在手术的床上躺了10分钟护士就进来让我去上厕所，还特意叮嘱我说上厕所受精卵不
回出来的，说好多人都担心，完全没必要。然后自己就到recovery room，躺了大概40
分钟，护士还给我盖了一个气垫子，重热气的，很舒服，我就睡了一觉。
2. 关于喝水的问题。我很怕自己下一次又忍不住。
你可以试试我的方法，我transfer之前也是担心这个，后来我妈妈教了我一个方法，让
我提前一天相同的时间在家练习一下，大概知道喝多少水能够达到fu |
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k**a
发帖数: 1124 | 13 even the blastocyst one was in early stage, so....... i had like 8 8-cell (all 8AA or 8AA-) embroys on day 3 and don't have one full blastocyst on day 5. something is wrong i just haven't figured out what yet.
younger
goes
can |
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w*********7
发帖数: 1718 | 14 月初发帖提到我第一次fresh cycle没有成功。今天把9月11日见医生的情况update一下。
医生说说不清失败的原因，说本来他是很有信心的。我们提到喝水事件，没好意思告状
，只说喝得太多。他说喝水只是为了他手术方便，从理论上来说，术后尿液流了是不影
响的，但他也承认我当时的情况是unusual。
然后建议我们做frozen cycle。我复印了我的相关report。
a. 我一共stim了12天。 Day 11的E2 test 是4342，flag Hi。当时医生说这是high
risk,但建议我再继续stim一天。Day 12 晚上打的HCG。Day14 取的卵。Day 12没有
blood test, E2应该比这个还高。请大家帮我看一下这个值。
b. 8月14日取卵。8月18日Day 4 fresh transfer 3个，分别是A/B, B, B，都是
Morulae。看起来我的embryo质量不高。
c. 现在冻的5个分别是一个3BB（这个是质量不高的Blastocyst?不知为何Day 4 也会有
Blastocyst。）一个Mor B, 两个Comp B，一个7B。 |
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a**e
发帖数: 381 | 15 Transferred 2 blastocyst. The embroylogist told me they were at grade b at 7
she'll give them grade A. I think she just tried to comfort me. How can they
jump up one grade in merely 2 hours?
The other 8 are still in compact morula stage. They will wait until tomorrow
to see if any can develop into blastocyst and can be frozen. |
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Y***y
发帖数: 60 | 16 刚刚从医院回来，确定明天一早去手术，这两个月的时间，简直像是一场梦一样。到现
在为止都不相信我的宝宝就这样走了
7月份开始见IVF医生，到8月13日取卵7个，受精5个，最后成了4个blastocyst。 8月18
移植两个1级blastocyst。8月27， HCG=162, 8月31 HCG=765.确定好孕了。
9月15日ob ultrasound，同卵的twins，两个宝宝都有心跳，而且大的长的非常好。因
为不能确定是否是一个羊水膜，所以昨天9月30，孕8周，第二次ob ultrasound，结果
两个宝宝都没有心跳了，大小都是7周。
IVF医生refer我们去原来的ob做人流，今天去见ob，她又帮我们做了一次ultrasound，
很确定的说，sorry......而且她说，sac和baby都look very good，实在是不应该出现
这种情况。
从昨天到现在都觉得像是在做梦，真希望这只是梦一场。本来想好昨天做完u/s，来这
里把我们的经验详细介绍给JMs，现在一切都完了。不知道怎么面对未来，整个世界都
好像崩溃了一样。 |
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B*********y
发帖数: 266 | 17 34岁，FSH极高 FSH=20， IVF超高剂量 750units of FOLLISTIM daily！！！
上上周四作的5-DAY ET，
周一第一次血检， HCG=118
周三第二次血检， HCG=235
周五第三次血检， HCG=466
下周会做ULTRASOUND
说说我的IVF经历，与姐妹分享：
* natural IUI （无任何药物针灸），自然排卵后IUI， 4次， ALL FAILED.
* 1st time IVF，300unit FOLLISTIM daily, 只有两个成熟卵泡， IVF aborted --
转成IUI
* 2nd time IVF，750unit FOLLISTIM daily，只有六个卵泡（实际上是 4+2，4个较大
，20，18，17，16，另两个略小于15）， ER 取了5个，4个FERTILIZED, 4个全都成功
长到第三天（two 8-cell， two 7-cell），接着CULTURE 到第五天， 4个全好好的（
一个 Blastocyst， grade B（score 65）； 三个 early Blastocysts, |
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n*******8
发帖数: 585 | 18 星期天transfer的，两个Grade A 的blastocyst，还给俺打印了照片。看着满可爱的，
圆圆的，当中有一团mass， 医生说那会长成未来的baby，别的会长成胎盘什么的。可
惜不会发照片，要不真想发上来给大家看看。；）今天lab打电话，说冻了6个day 6的
blastocyst.
这两天虽说在“卧床”，但也不老实，在床上上网，看连续剧。老躺着也不舒服，所以
也总在床上扭来扭去的。一会儿坐起来，一会侧过来。明天要上班了，倒觉得挺高兴，
可以不用关禁闭了。哎，我是实在做不到一动不动地躺在那里，听天由命吧。 |
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C****g
发帖数: 2220 | 19 真是“大道之行简也”。。。
Summary
Differentiated cells can be reprogrammed to an embryonic-like state by
transfer of nuclear contents into oocytes or by fusion with embryonic stem (
ES) cells. Little is known about factors that induce this reprogramming.
Here, we demonstrate induction of pluripotent stem cells from mouse
embryonic or adult fibroblasts by introducing four factors, Oct3/4, Sox2, c-
Myc, and Klf4, under ES cell culture conditions. Unexpectedly, Nanog was
dispensable. These cells, which we desi... 阅读全帖 |
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n**e
发帖数: 2026 | 20 【 以下文字转载自 Detective 讨论区 】
发信人: nile (nile), 信区: Detective
标 题: 基因宝宝的核心秘密
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Nov 30 01:53:07 2018, 美东)
就在一天之前，2018年11月28日，香港大学李兆基会议中心坐无虚席，中国科学家生物
物理学博士贺建奎在第二届人类基因编辑峰会上作了关于人类第一对基因宝宝诞生的主
题发言并回答了与会者的质问。让我们还是先从科学技术本身出发，去看看贺博士究竟
是怎样把基因宝宝编辑出来的。
首先尼罗河注意到贺博士所谓的道歉。很多人满心盼望着贺博士低头认罪。但是，贺博
士的道歉不是为成功创造基因宝宝的成就道歉。而是为将这一成就首先通过公共媒体发
布而非在专业平台发布对业内人士表示歉意。在尼罗河看来，这纯粹是为了争取科学界
对这一宏伟事业的支持而对他们表示尊重。这证明贺博士很懂得建立统一战线的重要性
。事实上，在决定针对CCR5这个基因进行胚胎编辑之前，他已经通过非公开方式与多位
基因操作的权威专家讨论过，在技术问题上获得了专业认同。
基因宝宝的医学需求和受试者的知情权
艾... 阅读全帖 |
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E*****m
发帖数: 25615 | 21 給基督教國家的一封信 (一)
你相信聖經是上帝的話，耶穌是上帝之子，而且只有那些信仰耶穌的人才能得到救贖。
基督徒的你，相信這些命題不是因為這樣讓你自在，而是你相信這些命題是真實的。在
我指出這些信仰的問題之前，我先承認有許多事情是我們都同意的，比方說，我們同意
如果我們之中的一方是對的，那另一方就是錯的；聖經要不然是上帝的話，要不然就不
是；要不然耶穌提供了人類唯一通往救贖的道路(約翰14:60)，要不然就是沒有這回事
；我們都同意真正的基督徒認為別的信仰都是錯的，而且是錯得很嚴重；要是基督教是
對的，而我還堅持不信，我應該會在地獄裡受煎熬；更糟糕的是，我已經說服了許多人
拒絕相信神，他們也會在永恆之火中哀嚎(馬太25:41)；如果基督教的基本教義是對的
話，我已經用最糟糕的方式虛擲誤用了我的生命，我對以上所述完全承認。我持續而且
公開的拒絕基督教的事實應該讓你相信我是多麼堅信你成為基督徒的理由是不適當的。
當然，也有基督徒既不同意我也不同意你，有些基督徒認為其他的信仰也是通往救贖的
正確方法，有些基督徒並不害怕地獄，有些不相信耶穌復活，這些基督徒通常自稱『宗
教自由派』或者『宗教溫... 阅读全帖 |
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ri
发帖数: 56 | 22 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: ri (ri), 信区: Biology
标 题: 求一篇文章下载 谢谢
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jan 31 09:21:39 2017, 美东)
doi:10.1038/nprot.2014.186
In vitro culture of mouse blastocysts beyond the implantation stages
Ivan Bedzhov,Chuen Yan Leung,Monika Bialecka & Magdalena Zernicka-Goetz
Nature Protocols 9, 2732–2739 (2014)
请回复此贴或发邮件至h******[email protected]
谢谢您的帮忙！ |
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p*******e
发帖数: 480 | 23 don't just preserve eggs! The success rate of pregnancy is unpredictable!
preserve blastocysts!!!
LZ, let me know if you need any help on your sister future fertility concern
! PM me! |
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v********g
发帖数: 25 | 24 This is not true. Preimplantation genetic diagnosis can detect the
fertilized egg's (8 cell blastocyst stage) mutation if the mother's mutation is
known. The turnaround time is fast enough for a Pregnancy. This is being
routinely done. |
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c*****g
发帖数: 408 | 25 按月经日期算，我应该11周了；可是由于我月经非常不规律，并且3周前才测到怀孕，
所以估计现在实际只有8-9周。
昨天第一次看OB，除了做常规检查，还在我肚子上涂gel，拿一个很小巧的仪器（可能
是doppler device）听胎心听了好久，最终也没听到胎心。
医生说11周以上就会听到胎心的；现在没听到，可能胎儿只有8-9周。
没听到胎心我不在意，我担心的是超声对早期胎儿不好。看怀孕书上说，5-10周是器官
形成期，也是birth defect的高风险期。我当时不知道doppler是超声仪器，今天才知
道，所以很担心。
OB还为我order了Pregnancy first trimester，这个检查是不是最好12周以后再做好一
些？我现在很担心超声检查，总想能拖晚一些就拖晚一些。
最后还有一句不太相关的，昨天做pap test取样的时候，阴道感到很热，这是正常的吗
？后悔当时没觉得异常，没问OB。今天想起这点是因为看精华区，看到有人说：美国B
超学会八十年代就有报告(Bethesda，MD)，少量B超没有明显副作用，但太早作B超，可
能对blastocyst和Fetus有possib... 阅读全帖 |
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G****a
发帖数: 10208 | 26 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: toptip (土翁), 信区: Biology
标 题: 从骨科医生到诺贝尔奖-山中伸弥的研究历程
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Oct 17 00:04:30 2012, 美东)
引言
山中伸弥（Shinya Yamanaka）获得诺奖已经有几天了，虽然两年前在听完他的讲座后
我兴致很高地写了两篇文章，这些天我却没有多少动力再写一篇完整的文章来介绍他的
工作。
我一直对中国现在还盛行的规划性科研，应用导向型科研耿耿于怀。这些所谓的重大项
目在立项的当初对目标/前景写得宏大无比，之后却通常草草收场。如果那些重大项目
真的能实现立项当初的用意，那诺贝尔奖早就在中国遍地开花了。广大科研人员都觉得
这种运行模式是一个笑话，饶毅、施一公等大牛也重炮轰击，但是分钱游戏还在进行着
。而公众，包括相当一部分科研人员也并不了解科研的自身规律，总是一再地问做基础
研究有什么用。
Shinya Yamanaka的成功是典型的小实验室自由探索的成功。他的成功再一次提示，有
相当多的科学突破是不可预测的。如果中国有大批优质的小实验室得到稳... 阅读全帖 |
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v*******i
发帖数: 19 | 27 现在吵吵的胚胎干细胞具体是指是受精卵发育几天内的多功能干细胞(pluripotent stem
cell), 这个阶段的胚胎在咱们中学学过的生物课上叫"胚泡"(blastocyst),
它一般只有50-150个细胞. 它除了不能变成生殖功能细胞(如胎盘细胞),可发育
成其他任何一类细胞.
这个胚泡图是wiki上的. 大家可以有个概念.
科学家已经设定了一套很严格的规定, 而且这些规定不是圣经, 它可以被完善.
为了符合NIH资助, 要求这些干细胞:
( http://stemcells.nih.gov/research/registry/eligibilityCriteria.asp
( Information on Eligibility Criteria for Federal Funding of Research on
Human Embryonic Stem Cells)
1, 必须无可能再发育成人.
2, 当初必须是为了生育而形成的
3, 必须争得父母在完全知情下的同意.
4, 必须无利益关系(no financial inducements)
... ...
目前, 拜总 |
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E*****m
发帖数: 25615 | 28 翻自 Letter to a Christian Nation by Sam Harris
http://www.amazon.com/Letter-Christian-Nation-Sam-Harris/dp/030
你相信聖經是上帝的話，耶穌是上帝之子，而且只有那些信仰耶穌的人才能得到救贖。
基督徒的你，相信這些命題不是因為這樣讓你自在，而是你相信這些命題是真實的。在
我指出這些信仰的問題之前，我先承認有許多事情是我們都同意的，比方說，我們同意
如果我們之中的一方是對的，那另一方就是錯的；聖經要不然是上帝的話，要不然就不
是；要不然耶穌提供了人類唯一通往救贖的道路(約翰14:60)，要不然就是沒有這回事
；我們都同意真正的基督徒認為別的信仰都是錯的，而且是錯得很嚴重；要是基督教是
對的，而我還堅持不信，我應該會在地獄裡受煎熬；更糟糕的是，我已經說服了許多人
拒絕相信神，他們也會在永恆之火中哀嚎(馬太25:41)；如果基督教的基本教義是對的
話，我已經用最糟糕的方式虛擲誤用了我的生命，我對以上所述完全承認。我持續而且
公開的拒絕基督教的事實應該讓你相信我是多麼堅信你成為基督徒的理由是... 阅读全帖 |
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r****o
发帖数: 105 | 29 本文献给YL
（十五）初现端倪
上一篇里，我提到了着床／近着床期（4.5dpc ～6.5dpc）。从6.5dpc开始一直到
7.5dpc，小鼠胚胎进入了原肠化期。由于小鼠胚胎此时出现的标志结构叫做原条（
primitive streak），这个时期又称为原条期（primitive streak stage）。原肠化的
定义非常模糊，因为不同动物原肠化具有不同的特征。简单的说，原肠化是指动物胚胎
从简单的囊状结构（囊胚，blastocyst），经历一系列结构重组变化，演化为具有外中
内三个胚层的复杂胚胎结构。如果把胚胎发育比喻为飞机起飞的话，原肠化期之前相当
于飞机在跑道上滑行，原肠化期则相当于飞机加速，脱离地面的一刹那。原肠化期之前
的胚胎只能算是一种热身状态，原肠化期才是胚胎真正开始成型的标志。小鼠胚胎发育
中的原肠化期在显微镜下非常好分辨，因为原肠化之后的胚胎体积突然大了很多，可以
很容易的用镊子分离出来。而原肠化期之前的胚胎在受精之后的六天左右里，体积几乎
没有太大的变化，比受精卵大不了很多。所以仅仅看体积变化，就可以看出原肠化期的
重要性。正因为这个原因，发育生物学家 |
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j********r
发帖数: 156 | 30 多谢楼上，遇到高人了。 公鼠用多大的？母鼠一定要21天的吗(at day 1)? 还没开始
做，以后碰到
问题再多请教。
鼠不算太小
了。 |
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a******n
发帖数: 392 | 31 公鼠用两个月以上的。母鼠不一定非要21天的，老点的也行。 |
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b****n
发帖数: 311 | 32 Kang L, Wang J, Zhang Y, Kou Z, Gao S (2009) iPS cells can support full
term development of tetraploid blastocyst-complemented embryos. Cell Stem
Cell 5(2):135-138.
这篇和周琪的nature一起证明了ips的全能性。人家也是被好多外国报刊采访过的。大
家别瞎猜了，多读多看比较靠谱。 |
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m******5
发帖数: 1383 | 33 Dear All:
I got a mice by hand with specific genetic trait, I want to get a homozygote
mES cell line from it. Knowing that we could not isolate mES cell from
blastocyst in our facility, I tunred to iPS or nuclear transfer.
IS there known facility out there provide service that we could make iPS or
nuclear transfered ES cell in a reasonable price range? thanks!!! |
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o**4
发帖数: 35028 | 34 其实也不难做啊，做作human blastocyst 染色跟hESC染色，一对比就知道是不是有分
化了，marker一大堆
我感觉你的idea成立的可能性不大，做的人应该非常多了 |
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l*******i
发帖数: 153 | 35 这是一个理所当然又直观的思路。
但是，人不同于小鼠，有一个伦理问题在里面，如何拿到足量的oocyte，从2C stage开
始观察，直到blastocyst，这个过程中一系列变化是否和小鼠相似呢？比如说，在小鼠
2C stage,虽然有OCT4转录，但是却不翻译的，即没有OCT4蛋白形成，这是区分
totipotency与pluripotency一个很好的marker。
另外一点，就marker而言，小鼠的ES细胞与人的ES细胞不一样，比如人的ES细胞没有
SSEA1，而小鼠ES细胞有；这个SSEA1是否可以用于区分naive和prime stage呢？似乎没
有这方面的报道，就我个人的看法，我持怀疑态度，因为将普通的人的ES/iPS诱导成
naive状态后，有的文章说，hES-specific的marker(如Tra-60,Tra-81)仍然表达，而
SSEA1不表达；而另一篇文章，直接将human fibroblast诱导成naive-like iPS cells,
后者不但拥有小鼠ES细胞的形态,而且还表达SSEA1,相反,Tra-81却没了。这两组的研究
都表明自己的naive... 阅读全帖 |
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o**4
发帖数: 35028 | 36 可以染ssea4，如果hESC blastocyst也表达，证明差不多，如果只有hESC表达，证明
ICM跟hESC不是一个东西。
另外，human fibroblast诱导成naive-like iPS cells的文献是哪篇啊？
cells, |
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t****p
发帖数: 1504 | 37 引言
山中伸弥（Shinya Yamanaka）获得诺奖已经有几天了，虽然两年前在听完他的讲座后
我兴致很高地写了两篇文章，这些天我却没有多少动力再写一篇完整的文章来介绍他的
工作。
我一直对中国现在还盛行的规划性科研，应用导向型科研耿耿于怀。这些所谓的重大项
目在立项的当初对目标/前景写得宏大无比，之后却通常草草收场。如果那些重大项目
真的能实现立项当初的用意，那诺贝尔奖早就在中国遍地开花了。广大科研人员都觉得
这种运行模式是一个笑话，饶毅、施一公等大牛也重炮轰击，但是分钱游戏还在进行着
。而公众，包括相当一部分科研人员也并不了解科研的自身规律，总是一再地问做基础
研究有什么用。
Shinya Yamanaka的成功是典型的小实验室自由探索的成功。他的成功再一次提示，有
相当多的科学突破是不可预测的。如果中国有大批优质的小实验室得到稳定的资助，那
么类似的科学突破就会随机但是必然地产生。从这种意义上讲，展示Shinya Yamanaka
在研究过程中的这种随机性和必然性，向公众科普科研活动是如何进行的，是值得我花
一点时间的。
解析Shinya Yamanaka发现诱导干细胞（iPS... 阅读全帖 |
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t****p
发帖数: 1504 | 38 引言
山中伸弥（Shinya Yamanaka）获得诺奖已经有几天了，虽然两年前在听完他的讲座后
我兴致很高地写了两篇文章，这些天我却没有多少动力再写一篇完整的文章来介绍他的
工作。
我一直对中国现在还盛行的规划性科研，应用导向型科研耿耿于怀。这些所谓的重大项
目在立项的当初对目标/前景写得宏大无比，之后却通常草草收场。如果那些重大项目
真的能实现立项当初的用意，那诺贝尔奖早就在中国遍地开花了。广大科研人员都觉得
这种运行模式是一个笑话，饶毅、施一公等大牛也重炮轰击，但是分钱游戏还在进行着
。而公众，包括相当一部分科研人员也并不了解科研的自身规律，总是一再地问做基础
研究有什么用。
Shinya Yamanaka的成功是典型的小实验室自由探索的成功。他的成功再一次提示，有
相当多的科学突破是不可预测的。如果中国有大批优质的小实验室得到稳定的资助，那
么类似的科学突破就会随机但是必然地产生。从这种意义上讲，展示Shinya Yamanaka
在研究过程中的这种随机性和必然性，向公众科普科研活动是如何进行的，是值得我花
一点时间的。
解析Shinya Yamanaka发现诱导干细胞（iPS... 阅读全帖 |
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i*****g
发帖数: 11893 | 39 我搞错了，是mESC的东西
Here we show that mouse androgenetic haploid ES (ahES) cell lines can be
established by transferring sperm into an enucleated oocyte. The ahES cells
maintain haploidy and stable growth over 30 passages, express
pluripotent markers, possess the ability to differentiate into all three
germ layers in vitro and in vivo, and contribute to germlines of chimaeras
when injected into blastocysts.
不过，这样子很惊人啊，haploid ESC |
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C***2
发帖数: 62 | 40 Thank you for your reply.
The locus i knockin Cre is expressed in ES with low level. PI want to make
sure whether the inserted Cre work functionally or not before blastocyst
injection.
I recalled that i ever electrotransfer pEGFPN3 to ES, indeed i observed
sporadic GFP. So, i decide to use CMV-Loxp-gfp-Loxp to confirm the
construction.
I feel shame on the third point, how can i make this type of mistakes.
body
Addgene
have
within
in |
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f*********6
发帖数: 94 | 41 Epiblast is a loose term to define undifferentiated pluripotent stem cells
in ICM.
Here is an excerpt from the review I suggested you to read:
...It is expressed in the 8- to 16-cell morula but becomes
restricted to the epiblast cells of the ICM in the expanded
blastocyst, and has been shown to be under the direct regulation of
the pluripotency factors Oct4 (Pou5f1) and Sox2 (Yuan et al.,
1995).
I will strongly suggest you to read the review if you have not done so. It
is a very well-written rev... 阅读全帖 |
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l*******i
发帖数: 153 | 42 干细胞只是众多细胞形态中的一种，并不比其他状态（如成体干细胞，終末分化细胞等
）的细胞处在高一级的状态上，还是我之前说的那样，所有形态/状态的细胞处在同一
水平面上，理论上，所有细胞形态中，任何其中两个都可以进行相互“转化”。
当然，邓的这篇文章比yamanaka的iPS还有一系列transdifferentiation的文章，更进
一步佐证了这种理论，尽管从其实验结果推出其模型，过程似乎并不solid。从这个层
面上讲，邓的“跷跷板”模型是有局限的--不是两者之间的平衡，而应该是“多态平衡
”。
众所周知，GATA3/6, GMNN，HNF4a等TF在Blastocyst之前阶段是高表达的，其对
totipotency维持有重要作用。因此，有一种可能--正如同期preview评论的--需要考虑
到，等所选用的那些lineage specifier可能通过别的pathway，间接地促进endogenous
pluripotency genes(OCT4, NANOG， SOX2等)的表达，来实现reprogramming--类比
miRNA在reprogramming中的作用。如果这种... 阅读全帖 |
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s**i
发帖数: 4448 | 43 When injected into eight-cell embryos or
blastocysts, CiPSCs were capable of integra-
tion into organs of all three germ layers, including
gonads and transmission to subsequent generations
(Fig.3,BtoE,andfig.S16).Unlikechimericmice
generated from iPSCs induced by transcription
factors including
c-Myc
(
14
), the chimeric mice
generated from CiPSCs were 100% viable and
apparently healthy for up to 6 months (Fig. 3F).
These observations suggest that the CiPSCs were
fully reprogrammed into pluripot... 阅读全帖 |
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l**********1
发帖数: 5204 | 44 RAO Anjana? as one expert from 真正的免疫界?
PMID
Top 5 records:
T Cell-Derived IL-17 Mediates Epithelial Changes in the Airway and Drives
Pulmonary Neutrophilia.
J Immunol. 2013 Aug 21. [Epub ahead of print]
PMID: 23966625
Initial activation of STIM1, the regulator of store-operated calcium entry.
Nat Struct Mol Biol. 2013 Aug;20(8):973-81.
Global epigenomic reconfiguration during mammalian brain development.
Science. 2013 Aug 9;341(6146):1237905.
Vitamin C induces Tet-dependent DNA demethylation and... 阅读全帖 |
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H*********a
发帖数: 133 | 45 有位国内显微注的高手现在在美国，她准备今年6月底开始在美国找microinjection位
置。她有7,8年的专职microinjection经历。主要从事：
Nuclear transfer cloning
intracytoplasmic sperm injection
pronuclear injection
blastocyst, 8-cell embryo microinjection of ES cells.
Rederivation
能否指点在美国如何找到专职的显微注射位置？她非常喜欢microinjection，不想找其
它位置。
ES |
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l*******i
发帖数: 153 | 46 太可惜了！
话说回来，STAP cell是否真的存在过？我读那两篇文章时，有一点觉得很奇怪，他们
的细胞竟可以形成placenta。要知道，包括inner cell mass在内 mESC是pluripotent
cell, 一般只能形成embryo,而不能形成extra-embryonic tissue（比如placenta）。
小保方究竟是用了什么细胞，具有totipotency,可以同时形成embryo和placenta? 如果
他们用blastocyst之前的embryo(比如2-cell， 4-cell，8-cell， morula，这些细胞
是totipotent)，倒是可以同时形成embryo和placenta,但这种实验从genetic
manipulation (将GFP reporter整进所用细胞genome)到generate chimeras,不可能是
一个人可以做的，至少得是几个人参与其中。合作者难道就没有质疑吗？
小保方又是怎样收到启发，从而打破常规，检测STAP cell的totipotency的？完全凭空
造假的话，这样的胆子真是难以想象。 |
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l*******i
发帖数: 153 | 47 我对这个STAP cell是半信半疑的。
半疑：如上面有人提出的，动物和人体内有很多组织器官是偏酸性的，为什么没有出现
癌变呢，如果这个STAP cell的理论是正确的话。
半信：STAP cell的totipotency。要知道，目前已有的ESC系，几乎都不具有
totipotency，即只能形成embryo，但不能形成胎盘等extra-embyonic tissue.但小保
方文章的最主要的“卖点”就是这个STAP cell具有totipotency.如果这个STAP cell不
存在的话，那么小保方他们是用什么细胞做了chimeras与四倍体补偿实验？只能是
blastocyst（inner cell mass）之前的细胞，比如2-cell，8-cell或morula embryo。
但是，这样一来，造假的过程就不仅仅是小保方一人可以完成的，必定还有做chimeras
与四倍体补偿实验的实验室。 |
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l*******i
发帖数: 153 | 48 看图片，应该不像artifact,荧光强度与embryo相似。对照组（ESC）则只有embryo有
GFP。所以，就这个实验本身，是可信的。可能性只有两个：1）totipotent STAP cell
真的存在过；2）这个chimeras实验从最初都造假了，inject的不是STAP cell,也不是
STAP-derived cells,而是小鼠blastocyst之前的细胞。如果是第二种可能，说明造假
的不是小保方一人，而是至少两个实验室联合造假。那么，问题并非披露的那么简单，
这可能也是为什么RIKEN要重组发育生物学中心的原因。 |
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l*******i
发帖数: 153 | 49 这也是我想不通的地方。
除非做嵌合体实验的人也参与造假了（将早期胚胎来源的细胞而不是STAP cell打入
blastocyst；而且这一步骤，作为外行的小保方做不了），或者这个STAP cell是真的
，否则无法解释文章中的实验结果。
CDB
决？
RIKEN
CDB |
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l*******i
发帖数: 153 | 50 这也是我想不通的地方。
除非做嵌合体实验的人也参与造假了（将早期胚胎来源的细胞而不是STAP cell打入
blastocyst；而且这一步骤，作为外行的小保方做不了），或者这个STAP cell是真的
，否则无法解释文章中的实验结果。
CDB
决？
RIKEN
CDB |
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