p****p
发帖数: 3360 | 1 再谢版主把这个版开起来了！
我用果蝇做神经行为学。希望多多了解对神经细胞、neural circuit的functional
manipulation都有什么方法，各有什么优点？
我先说两个能想得起来的：
1. 组织特异性表达离子通道，K，Na，trp channels, channelrhodopsin etc。K，Na
通道constitutive 的表达容易杀死细胞，channelrhodopsin用光来激活，可是有时候
光也会干扰结果。
2. 阻断vesicle traficking。
3. ？？？ |
e***o
发帖数: 344 | 2 to map functional circuit, u can try uncaging glutamate + Gcamp3 or patch
good luck! |
p****p
发帖数: 3360 | 3 谢谢！这些应该都是in vitro的好方法。
提到calcium imaging，现在有没有做动物个体中进行calcium manipulation的办法呢？
另外，记得看过一个方法可以在presynaptic cell中表达一个蛋白，然后去
postsynaptic neuron中去观察？不记得具体怎么做的了。
patch
【在 e***o 的大作中提到】
: to map functional circuit, u can try uncaging glutamate + Gcamp3 or patch
: good luck!
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m*********n
发帖数: 215 | 4 lz, 根据你问问题的方式/内容，诚心诚意说一句：自己先查阅文献是王道。。。。 |
p****p
发帖数: 3360 | 5 Thanks. I normally do search PubMed and google when I need something. I don
't need these for now.
I just want to see what are out there. And see if there's anything that
might be useful to me. or maybe to you too.
【在 m*********n 的大作中提到】
: lz, 根据你问问题的方式/内容，诚心诚意说一句：自己先查阅文献是王道。。。。
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h*******g
发帖数: 711 | 6 What about conditional knockout? |
p****p
发帖数: 3360 | 7 这个好！应该想起来的。谢谢。
做起来比较费时间。Kent Golic做了很多果蝇里面的knockout方法研究，现在还是比较
少的人用。
【在 h*******g 的大作中提到】
: What about conditional knockout?
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l******8
发帖数: 1691 | 8 时间还好吧。我们这儿做果蝇的哥们就是各种各样的con ko多，好像从公司搞很快的样
子。
【在 p****p 的大作中提到】
: 这个好！应该想起来的。谢谢。
: 做起来比较费时间。Kent Golic做了很多果蝇里面的knockout方法研究，现在还是比较
: 少的人用。
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p****p
发帖数: 3360 | 9 这个信息太重要了。我能不能私下和你要这哥们的联系方式？
时间主要是做DNA质粒和后面的杂交筛选确定重组到目的基因了。用公司inject embryo
两个星期的turnover。
不知道果蝇做conditional ko用的是什么重组酶。用Golic的方法，FRT/FLP在做ko的
targeting的时候已经被用了。cre/lox在果蝇里面用的不如FRT/FLP普遍。
【在 l******8 的大作中提到】
: 时间还好吧。我们这儿做果蝇的哥们就是各种各样的con ko多，好像从公司搞很快的样
: 子。
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