s****s
发帖数: 16 | 1 比如说，这个基因在肝脏里面不表达，但是想建立transgenic mouse，让这个基因在肝
脏里能够表达。我的问题是：1）有哪些手段可以选择和那种最有效；2）有哪些公司可
以作。 |
s******y
发帖数: 28562 | 2 最简单的方法就是把那个基因接到一个肝脏特定表达的promoter后，然后直接把这个东
西转到卵细胞里去然后做成老鼠。
这个技术很简单，大部分学校的core facility 都可以做。
【在 s****s 的大作中提到】
: 比如说，这个基因在肝脏里面不表达，但是想建立transgenic mouse，让这个基因在肝
: 脏里能够表达。我的问题是：1）有哪些手段可以选择和那种最有效；2）有哪些公司可
: 以作。
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s****s
发帖数: 16 | 3 非常感谢。
【在 s******y 的大作中提到】
: 最简单的方法就是把那个基因接到一个肝脏特定表达的promoter后，然后直接把这个东
: 西转到卵细胞里去然后做成老鼠。
: 这个技术很简单，大部分学校的core facility 都可以做。
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H****N
发帖数: 997 | 4 这个直接打卵就行了，没必要转到ESC里面。但前提是你要有好的PROMOTER,因为有的
PROMOTER很长或者不知上界，需要用BAC做。最保险的方法是把你要表达的基因KNOCKIN
到一个在肝脏表达的基因里，这就需要ESC,但要花比较大的EFFORT。理论上CRISPR也可
以做，但目前用CRISPR做KI老鼠效率太低。
【在 s******y 的大作中提到】
: 最简单的方法就是把那个基因接到一个肝脏特定表达的promoter后，然后直接把这个东
: 西转到卵细胞里去然后做成老鼠。
: 这个技术很简单，大部分学校的core facility 都可以做。
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s******y
发帖数: 28562 | 5 哎呀你说的对。对于这么简单的任务其实刚受精的卵细胞就够了。
不需要开动胚胎干细胞。
肝脏特异的promoter 有好几个很好用的，应该不是问题。
KNOCKIN
【在 H****N 的大作中提到】
: 这个直接打卵就行了，没必要转到ESC里面。但前提是你要有好的PROMOTER,因为有的
: PROMOTER很长或者不知上界，需要用BAC做。最保险的方法是把你要表达的基因KNOCKIN
: 到一个在肝脏表达的基因里，这就需要ESC,但要花比较大的EFFORT。理论上CRISPR也可
: 以做，但目前用CRISPR做KI老鼠效率太低。
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h******y
发帖数: 55 | 6 构一个liver specific construct, 包到AAV8 里面 |
