m***n
发帖数: 536 | 1 工作原理以及如何做的，介绍一下原理和大概步骤。以及和global ko的区别。
谢谢。 |
s******y
发帖数: 28562 | 2 你想敲掉的基因的exon 两端先knockin flox element
然后和已经knockin 由某个特异pomoter 驱动的cre基因的老鼠杂交
杂交后代的老鼠，在某些组织里会表达cre蛋白，就把flox element 镶嵌的基因序列
剪掉了。
【在 m***n 的大作中提到】
: 工作原理以及如何做的，介绍一下原理和大概步骤。以及和global ko的区别。
: 谢谢。
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D*a
发帖数: 6830 | |
n***g
发帖数: 5027 | 4 没有你这么偷懒的吧？
【在 m***n 的大作中提到】
: 工作原理以及如何做的，介绍一下原理和大概步骤。以及和global ko的区别。
: 谢谢。
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s******a
发帖数: 134 | 5 conditional KO 的efficiency 能用reporter (比如GFP）看到的，GFP一般加在哪里呢
？ |
D*a
发帖数: 6830 | 6 有Rosa26，是一个大家都不知道有什么用的位点，所以往里面加东西，理论上对其他基
因没什么影响
但是GFP的efficiency要先保证，才能保证你的pattern是真正的pattern，这里面有多
少个gfp你才能肉眼可见的问题，有从genomic KO到gfp protein表达的问题，有这个细
胞愿意不愿意gfp在那里呆着的问题
我们用rosa26 LacZ的老鼠，做出来的cre表达time line比直接用pcr晚。
【在 s******a 的大作中提到】
: conditional KO 的efficiency 能用reporter (比如GFP）看到的，GFP一般加在哪里呢
: ？
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s******r
发帖数: 2876 | 7 会不会Cre从转录到翻译，再到重组lacZ Reporter需要时间。
有Rosa26，是一个大家都不知道有什么用的位点，所以往里面加东西，理论上对其他基
因没什么影响
但是GFP的efficiency要先保证，才能保证你的pattern是真正的pattern，这里面有多
少个gfp你才能肉眼可见的问题，有从genomic KO到gfp protein表达的问题，有这个细
胞愿意不愿意gfp在那里呆着的问题
我们用rosa26 LacZ的老鼠，做出来的cre表达time line比直接用pcr晚。
【在 D*a 的大作中提到】
: 有Rosa26，是一个大家都不知道有什么用的位点，所以往里面加东西，理论上对其他基
: 因没什么影响
: 但是GFP的efficiency要先保证，才能保证你的pattern是真正的pattern，这里面有多
: 少个gfp你才能肉眼可见的问题，有从genomic KO到gfp protein表达的问题，有这个细
: 胞愿意不愿意gfp在那里呆着的问题
: 我们用rosa26 LacZ的老鼠，做出来的cre表达time line比直接用pcr晚。
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D*a
发帖数: 6830 | 8 我们是跟target organ 的 target gene 的 genomic pcr比的。
pcr有带的时候，lacZ很淡很淡还是没有，我忘了。
当然，这个也许恰好反映了一个蛋白质从KO到表达的时间。。。
【在 s******r 的大作中提到】
: 会不会Cre从转录到翻译，再到重组lacZ Reporter需要时间。
:
: 有Rosa26，是一个大家都不知道有什么用的位点，所以往里面加东西，理论上对其他基
: 因没什么影响
: 但是GFP的efficiency要先保证，才能保证你的pattern是真正的pattern，这里面有多
: 少个gfp你才能肉眼可见的问题，有从genomic KO到gfp protein表达的问题，有这个细
: 胞愿意不愿意gfp在那里呆着的问题
: 我们用rosa26 LacZ的老鼠，做出来的cre表达time line比直接用pcr晚。
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