e********r
发帖数: 147 | 1 因为项目需要，近期打算对一段基因序列做饱和突变分析，预计将要创建400－450个氨
基酸的定点突变（一次只变一个）。算下来工作量也不算大得不能完成，就算一个人一
个一个地做点突，估计1年左右也就全都能够获得。但好象显得有点儿笨，这么干有没
有什么高通量做点突的技术，既省时间又省精力的？ |
v**********m
发帖数: 5516 | 2 掏钱找公司做，很多公司非常愿意接这样的活。他们有高通量的机器，比你手工快多了。
【在 e********r 的大作中提到】
: 因为项目需要，近期打算对一段基因序列做饱和突变分析，预计将要创建400－450个氨
: 基酸的定点突变（一次只变一个）。算下来工作量也不算大得不能完成，就算一个人一
: 个一个地做点突，估计1年左右也就全都能够获得。但好象显得有点儿笨，这么干有没
: 有什么高通量做点突的技术，既省时间又省精力的？
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e********r
发帖数: 147 | 3 这也是个办法。但国内的这帮公司出活的质量，普遍令人担忧啊......
了。
【在 v**********m 的大作中提到】
: 掏钱找公司做，很多公司非常愿意接这样的活。他们有高通量的机器，比你手工快多了。
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j****n
发帖数: 3370 | 4 这篇刚刚发表文章貌似就是为你准备的 haha
Massively parallel single-amino-acid mutagenesis pp203 - 206
Jacob O Kitzman, Lea M Starita, Russell S Lo, Stanley Fields and Jay
Shendure
doi:10.1038/nmeth.3223
A comprehensive allelic series for a protein of interest with a single
mutation per cDNA template can be generated using a combination of
microarray-based DNA synthesis and overlap-extension mutagenesis. |
v**********8
发帖数: 1685 | 5 是要一个一个突变往WT上叠加，还是只是在WT上做很多点突变？如果是后者，为啥要一
个一个做一年才能做完？就算用最老土的办法，96孔板一板不就能做96个。。。 |
