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Biology版 - 做了cell fractionation以后, nucleus里面啥都没了。。。
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关于nuclear loading control的问题关于Western的蛋白定量。
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话题: nucleus话题: cell话题: ponceau话题: 没了
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r******k
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1
为啥做了cell fractionation以后,用立春红染色之后发现 nucleus的那几个lane都染
不上,但是western之前都做了protein quantification了,是有蛋白的呀。。。。。
。 哪位大神有经验吗?
i***l
发帖数: 1656
2
1. Ponceau is not sensitive enough and your samples are composed of many
bands each with low quantity of protein
2. ponceau may not be able to stain certain proteins in your fractions

【在 r******k 的大作中提到】
: 为啥做了cell fractionation以后,用立春红染色之后发现 nucleus的那几个lane都染
: 不上,但是western之前都做了protein quantification了,是有蛋白的呀。。。。。
: 。 哪位大神有经验吗?

r******k
发帖数: 446
3
If i used whole cell lysis ( with our cell fractionation), i saw very
abundance of protein bands with the stain of ponceau S. However, after i
fractionated the sample, it seems nothing can be detected, even in the
cytosol. I have no idea why. 难道cyto/nucleus被抽出来的过程会使得蛋白降解?

【在 i***l 的大作中提到】
: 1. Ponceau is not sensitive enough and your samples are composed of many
: bands each with low quantity of protein
: 2. ponceau may not be able to stain certain proteins in your fractions

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问大伙儿一个CO-IP的问题Nuclear actin distribution
Re: 关于genotyping 的几个问题.问个nucleus/cytosol/membrane fraction protocol
DAPI staining of live mammalian cells请教:组织用1% triton提取以后,剩下的是组织里面哪些成分呢
2012 Nobel Prize in Physiology or Medicine是不是293t细胞不容易做cell fractionation?
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