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Biology版 - 求一个比较严谨的quantitive immunoflurescence的protocol
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大家都是用什么软件来quantifying fluorescent image?问个电生理的问题,请统计学高人进
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m******5
发帖数: 1383
1
Confocal Image,观察一个transcription factor的relative dosage和其output的关
系。
不知哪位前辈有经验的能不能介绍一个protocol?最好是用image J的
另外,哪个二抗linear range比较好?
n***w
发帖数: 2405
2
我觉得只要你拍照的时候不要饱和你的信号就可以用来quantify。用imagej的话,就
separate channel, subtract background, measure, 至于你要特别严谨,可以找一些
大paper, 方法里写了很多用各种公式啊计算荧光强度。你可以打电话给confocal的客
服,那些工程师会很详细的和你解释如何定量,而且很多confocal的软件自带定量了,
你不一定要用imagej。
s*****j
发帖数: 6435
3
ImageJ is WAY better than any Confocal software.

【在 n***w 的大作中提到】
: 我觉得只要你拍照的时候不要饱和你的信号就可以用来quantify。用imagej的话,就
: separate channel, subtract background, measure, 至于你要特别严谨,可以找一些
: 大paper, 方法里写了很多用各种公式啊计算荧光强度。你可以打电话给confocal的客
: 服,那些工程师会很详细的和你解释如何定量,而且很多confocal的软件自带定量了,
: 你不一定要用imagej。

m******5
发帖数: 1383
4
Thank you!!!! which plugin did you use for quantitive immunoflurescence?

【在 s*****j 的大作中提到】
: ImageJ is WAY better than any Confocal software.
s*****j
发帖数: 6435
5
read the manual, or find a local guy can guide you through.
or just use "Analyze" --> "Measure"

【在 m******5 的大作中提到】
: Thank you!!!! which plugin did you use for quantitive immunoflurescence?
c******o
发帖数: 1184
6
immunoflurescence 很难定量吧,artifact太多,最多比较多少
真要定量还是加个GFP 什么的比较靠铺

【在 m******5 的大作中提到】
: Confocal Image,观察一个transcription factor的relative dosage和其output的关
: 系。
: 不知哪位前辈有经验的能不能介绍一个protocol?最好是用image J的
: 另外,哪个二抗linear range比较好?

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